瘤胃pH下乳酸作為枯草芽孢桿菌可利用碳源的研究
本文關鍵詞:瘤胃pH下乳酸作為枯草芽孢桿菌可利用碳源的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:乳酸在很多反芻動物體內,可以被組織細胞和微生物細胞產生的酶代謝掉,不會積累,但由于某些原因導致乳酸在體內積累時,就會引起代謝疾病。瘤胃酸中毒是一種乳酸代謝疾病,是由于反芻動物大量攝食碳水化合物飼料后,因體內乳酸產生菌和利用菌之間菌群失調,乳酸在體內積累而引起的疾病,不僅影響動物健康,還會帶來經濟損失。作為一種可以添加在飼料中的微生物,枯草芽孢桿菌適應性強,能夠在瘤胃環(huán)境中存活。本文以7株枯草芽孢桿菌為實驗菌株,探究了其利用乳酸作為碳源的生長表現,旨在為解決瘤胃酸中毒提供新的思路。主要研究結果如下:(1)以1.0%濃度的乳酸作為唯一碳源,并將培養(yǎng)基pH分別調至5.3和6.2,370C培養(yǎng)枯草芽孢桿菌72h。結果表明:枯草芽孢桿菌可以在pH5.3-6.2的,以1.0%濃度的乳酸作為唯一碳源的培養(yǎng)基中生長。(2)在不添加碳源,只添加蛋白胨一種氮源的培養(yǎng)基中,370C培養(yǎng)枯草芽孢桿菌72h。結果表明:枯草芽孢桿菌僅利用氮源就可以生長。(3)改變溫度、pH、培養(yǎng)基中的乳酸濃度和葡萄糖濃度,分析影響乳酸利用率的因素。結果表明:300C以下枯草芽孢桿菌可以生長但不利用乳酸。370C下:在pH5.4-7.4范圍內,pH越高,乳酸利用率越低;在1.0~2.0%范圍內,乳酸濃度越高,乳酸利用率越低,但乳酸濃度達到2.0%時菌株依然可以生長;在0.1-1.0%范圍內,葡萄糖濃度越高,乳酸利用率越低。(4)對枯草芽孢桿菌粗酶液進行SDS-PAGE實驗,并測定胞內丙酮酸含量。結果表明枯草芽孢桿菌代謝乳酸的途徑為:乳酸脫氫酶催化乳酸產生丙酮酸。綜合,乳酸能夠作為枯草芽孢桿菌可利用的碳源,這為解決瘤胃酸中毒問題提供了新思路。
【關鍵詞】:乳酸 枯草芽孢桿菌 瘤胃酸中毒
【學位授予單位】:北京林業(yè)大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:S816
【目錄】:
- 摘要3-4
- Abstract4-8
- 1. 文獻綜述8-16
- 1.1 瘤胃酸中毒簡介8
- 1.2 瘤胃酸中毒的防治方法8-10
- 1.3 瘤胃中的微生物10-12
- 1.4 枯草芽孢桿菌簡介12-14
- 1.4.1. 枯草芽孢桿菌生理特征12
- 1.4.2 枯草芽孢桿菌在實際中的應用12-14
- 1.5 研究目的和意義14-16
- 2. 枯草芽孢桿菌菌株的篩選16-32
- 2.1 材料與方法16-20
- 2.1.1 實驗設備16-17
- 2.1.2 實驗菌株與試劑17
- 2.1.3 培養(yǎng)基17-18
- 2.1.4 實驗方法18-20
- 2.2 結果與分析20-31
- 2.2.1 枯草芽孢桿菌在模擬瘤胃pH條件下的生長表現20-26
- 2.2.2 pH對供試菌株生長的影響26-28
- 2.2.3 氮源對供試菌株生長的影響28-30
- 2.2.4 供試菌株培養(yǎng)液乳酸濃度變化30-31
- 2.3 本章小結31-32
- 3. 影響枯草芽孢桿菌利用乳酸的因素分析32-41
- 3.1 材料與方法32-34
- 3.1.1 實驗設備32
- 3.1.2 實驗菌種與試劑32-33
- 3.1.3 實驗方法33-34
- 3.2 結果與分析34-40
- 3.2.1 不同溫度對菌株利用乳酸的影響34-35
- 3.2.2 不同pH對菌株利用乳酸的影響35-36
- 3.2.3 不同濃度乳酸對菌株利用乳酸的影響36-38
- 3.2.4 不同濃度葡萄糖對菌株利用乳酸的影響38-40
- 3.3 本章小結40-41
- 4. 枯草芽孢桿菌利用乳酸的機理分析41-51
- 4.1 材料與方法41-46
- 4.1.1 實驗設備41
- 4.1.2 實驗菌種與試劑41-42
- 4.1.3 實驗方法42-46
- 4.2 結果與分析46-50
- 4.2.1 乳酸脫氫酶檢測46-47
- 4.2.2 SDS-PAGE電泳檢測47-49
- 4.2.3 丙酮酸生成量檢測49-50
- 4.3 本章小結50-51
- 5. 總結與展望51-52
- 5.1 主要結論51
- 5.2 展望51-52
- 參考文獻52-56
- 個人簡介56-57
- 導師簡介57-59
- 致謝59
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