發(fā)布時(shí)間：2020-07-22 02:50

【摘要】：初情期是動(dòng)物從幼年向獲得繁殖能力的過(guò)渡時(shí)期,也是雌性動(dòng)物初次發(fā)情并排卵的時(shí)期,象征著母畜具備了繁衍生息的能力。初情期啟動(dòng)機(jī)制較為復(fù)雜,目前尚未完全闡明,且以往關(guān)于初情期啟動(dòng)機(jī)制的研究多集中在嚙齒類和靈長(zhǎng)類動(dòng)物,家畜方面的研究相對(duì)較少。本研究擬從DNA甲基化角度探索母羊初情期啟動(dòng)機(jī)制,首先利用熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)首先利用熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)母羊初情期啟動(dòng)啟動(dòng)過(guò)程中下丘腦DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶1(DNA methyltransferases 1,Dnmt1)和甲基化CPG結(jié)合蛋白(Methyl-CpG-binding protein 2,MeCP2)、促性腺激素釋放激素(Gonadotropin-releasing hormone,GnRH)和KiSS-1基因的表達(dá)規(guī)律,其次通過(guò)免疫熒光雙標(biāo)記方法檢測(cè)Dnmt1和MeCP2在下丘腦中的分布定位及其與GnRH和KiSS-1蛋白之間的分布關(guān)系。研究結(jié)果如下:利用熒光定量PCR技術(shù)發(fā)現(xiàn),GnRH、KiSS-1、Dnmt1和MeCP2在母羊下丘腦中均有表達(dá),隨著初情期的到來(lái),GnRH和KiSS-1表達(dá)量逐漸升高,且初情期顯著高于初情前期和臨近初情期,Dnmt1和MeCP2表達(dá)量逐漸降低,且初情期和臨近初情期顯著低于初情前期。通過(guò)免疫熒光雙標(biāo)記方法研究發(fā)現(xiàn)Dnmt1和MeCP2在母羊下丘腦POA(Preoptic Area)和ARC(Arcuate Nucleus)均有分布,在ARC分別與GnRH和Kisspeptin神經(jīng)元存在明顯的共表達(dá)模式,隨著初情期啟動(dòng)時(shí)過(guò)程中ARC共表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量顯著增多。在POA中,GnRH表達(dá)較多,且與Dnmt1和MeCP2呈共表達(dá),隨著初情期啟動(dòng)共表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)呈下降趨勢(shì)。Kisspeptin表達(dá)較少,仍與Dnmt1和MeCP2呈共表達(dá),初情期啟動(dòng)過(guò)程中共表達(dá)陽(yáng)性數(shù)量呈下降趨勢(shì)。本研究通過(guò)檢測(cè)母羊初情期啟動(dòng)過(guò)程中下丘腦Dnmt1、MeCP2、GnRH和KiSS-1基因的表達(dá)和分布,研究結(jié)果表明,Dnmt1、MeCP2、GnRH和KiSS-1基因在母羊下丘腦中均有表達(dá),且在下丘腦ARC和POA中Dnmt1和MeCP2與GnRH和Kisspeptin之間存在明顯的共表達(dá)模式�？梢�(jiàn),Dnmt1和MeCP2可能通過(guò)調(diào)控GnRH和Kisspeptin蛋白的表達(dá)參與母羊初情期啟動(dòng)。
【學(xué)位授予單位】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：S826
【圖文】：

圖 1 HPG 軸示意圖Fig.1 HPG axis schematic diagram從表觀遺傳學(xué)角度講，它可以改變 GnRH 神經(jīng)元細(xì)胞成熟的化自身是認(rèn)為改變基因的轉(zhuǎn)錄率通過(guò)兩種機(jī)制。首先，CPG 甲

圖 2 Kisspeptin 在 HPG 軸中的作用示意圖Figure.2 Schematic diagram of the role of Kisspeptin in the HPG axsspeptin 對(duì)生殖系統(tǒng)的調(diào)節(jié)作用于 Kisspeptin 對(duì)動(dòng)物機(jī)體的調(diào)節(jié)作用很復(fù)雜，其中對(duì)生殖系統(tǒng)的研

圖 3 RNA 瓊脂糖凝膠電泳圖Fig.3 RNA agarose gel electrophoresisnRH、KiSS-1、Dnmt1 和 MeCP2 mRNA 表達(dá)為內(nèi)參基因，利用熒光定量 PCR 法檢測(cè) Gn的表達(dá)情況，結(jié)果顯示，隨著初情期啟動(dòng) GnP<0.05），Dnmt1 和 MeCP2 基因表達(dá)量在臨見(jiàn)圖 4 至圖 7：

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 田園;宋敏;方富貴;;動(dòng)物初情期表觀遺傳調(diào)控的研究進(jìn)展[J];家畜生態(tài)學(xué)報(bào);2015年04期

2 劉宵;王樹(shù)迎;尹玉濤;張德敏;黃麗波;侯衍猛;;濟(jì)寧青山羊生后發(fā)育階段GnRH與GnRHR陽(yáng)性細(xì)胞在下丘腦分布規(guī)律的研究[J];畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào);2012年08期

3 王軍;孫蕾;張濤;周海柱;婁玉杰;;Kisspeptin在初情期前母羊下丘腦的分布定位[J];中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào);2012年20期

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1 蔣書(shū)東;方富貴;王然;安好峰;花雯;劉亞杰;趙熙杰;李福寶;;kisspeptin在雌性大鼠初情期發(fā)育進(jìn)程中下丘腦的表達(dá)[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物解剖學(xué)及組織胚胎學(xué)分會(huì)第十七次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集（上）[C];2012年

本文編號(hào)：2765211