【摘要】：黃連素(Berberine,BBR)又名小檗堿,是一種異喹啉類生物堿。據報道,黃連素具有多種藥理作用,其中包括抗菌、抗癌、抗氧化和抗炎等。巨噬細胞(Macrophages)是廣泛分布于機體的先天免疫細胞,在各種生理和病理過程中發(fā)揮不同的作用。氧化應激是指細胞或組織中產生和積累的活性氧與生物系統對這些反應產物的解毒能力不平衡而引起的一種現象。炎癥反應是對微生物感染和組織損傷的一種快速而協調的反應,會導致導致免疫細胞向感染或損傷部位遷移。β-羥丁酸(β-hydroxybutyrate,β-HB)在奶牛血液中的濃度與皺胃變位的發(fā)病率存在一定的相關性。研究發(fā)現,奶牛的圍產期是發(fā)生皺胃變位的高發(fā)期,在這期間,奶牛存在廣泛的氧化應激與炎癥反應,機體內的能量代謝與免疫能力都產生了很大的變化。因此,研究對牛巨噬細胞的氧化應激以及炎癥反應的保護對初步探究奶牛皺胃變位具有一定的意義。本論文以黃連素為研究對象,通過體外試驗,探討黃連素對β-羥丁酸誘導的牛巨噬細胞(Bovine macrophage,BM)的氧化應激以及炎癥反應的影響。本試驗首先,利用CCK-8法檢測不同濃度(5,7.5,10μmol/L)的黃連素以及β-HB(2.4mmol/L)對牛巨噬細胞的活性影響,建立β-HB誘導牛巨噬細胞的氧化應激以及炎癥反應模型并進行藥物干預。結果顯示,黃連素(5,7.5,10μmol/L)以及β-HB(2.4 mmol/L)對牛巨噬細胞無毒性。其次,利用試劑盒檢測牛巨噬細胞內ROS、MDA、SOD、CAT的水平,并用Western blot技術檢測Nrf2信號通路相關蛋白的表達,探索黃連素對β-羥丁酸誘導的牛巨噬細胞氧化應激的影響。結果顯示,黃連素能夠抑制牛巨噬細胞中ROS以及MDA的產生。并且,能夠使牛巨噬細胞中SOD以及CAT的含量顯著上升。同時,上調Nrf2、HO-1的表達水平。以上結果證實,黃連素對β-羥丁酸誘導的牛巨噬細胞的氧化應激有保護作用。最后,用熒光定量法檢測IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表達水平,同時,采用Western blot技術檢測NF-κB信號通路相關蛋白的表達。結果表明:黃連素能夠抑制炎性細胞因子IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表達水平,同時黃連素通過下調IκB和P65磷酸化水平,抑制NF-κB信號通路的激活。以上結果證實,黃連素對β-羥丁酸誘導的牛巨噬細胞的炎癥反應有保護作用。本論文初步證實了黃連素對β-羥丁酸誘導的牛巨噬細胞的氧化應激以及炎癥反應有保護作用。以上結果可為黃連素對牛巨噬細胞產生的氧化應激以及炎癥反應的相關研究提供數據參考。同時,進一步為研究黃連素對奶牛皺胃變位的防治提供實驗依據。
【學位授予單位】：吉林農業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：S858.23
【圖文】：

：與 B 液 1:1 混合配置顯影液，放入離心管中注意避光。將需要顯影的儀中，將顯影液均勻的滴在膜上，曝光，顯影。分析：的數據圖利用 ImageJ 進行圖像分析并得出數值。理的數據結果是三次獨立試驗的平均值±標準誤，應用 GraphPad Prism5分析，P<0.05 表示差異顯著，P<0.01 表示差異極顯著，具有統計學意 法檢測黃連素對牛巨噬細胞活性的影響組相比，用 β-HB(2.4 mmol/L)和不同濃度的黃連素（5,7.5,10 μmol/L）的活性沒有統計學差異。結果表明，黃連素（5,7.5,10 μmol/L）對牛巨圖 1.1。

圖 1.2 黃連素對 β-HB 誘導的牛巨噬細胞中 ROS 的影響Fig.1.2 Effects of berberine on ROS in bovine macrophages induced by β-HB：與空白組比較，#P<0.05，##P<0.01；與 β-HB 組比較，*P<0.05，**P<0.01對 β-HB 誘導的牛巨噬細胞中 MDA 的影響組相比，用 β-HB 刺激后，牛巨噬細胞中 MDA 顯著上升。而用不同,10 μmol/L）處理后，顯著抑制了牛巨噬細胞中 MDA 的水平。結果表,10 μmol/L）能夠抑制 β-HB 誘導的牛巨噬細胞中 MDA 的產生。見圖

圖 1.2 黃連素對 β-HB 誘導的牛巨噬細胞中 ROS 的影響Fig.1.2 Effects of berberine on ROS in bovine macrophages induced by β-HB注：與空白組比較，#P<0.05，##P<0.01；與 β-HB 組比較，*P<0.05，**P<0.01連素對 β-HB 誘導的牛巨噬細胞中 MDA 的影響空白組相比，用 β-HB 刺激后，牛巨噬細胞中 MDA 顯著上升。而用不同5,7.5,10 μmol/L）處理后，顯著抑制了牛巨噬細胞中 MDA 的水平。結果5,7.5,10 μmol/L）能夠抑制 β-HB 誘導的牛巨噬細胞中 MDA 的產生。見圖

【參考文獻】

相關期刊論文 前4條

1 景彩萍;何靜子;魏曉麗;;炎癥因子IL-1β、IL-8、TNF-α與乳腺癌的關系[J];延安大學學報(醫(yī)學科學版);2014年03期

2 李鵬;龍淼;張q

本文編號：2762440