【摘要】：流感是一種常見的以呼吸道發(fā)病為主的具有高度傳染性疾病。該疾病由正粘病毒科流感病毒屬中A型流感病毒引起的。流感病毒屬于嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生物,需要借助宿主細(xì)胞內(nèi)的細(xì)胞因子和合成機(jī)制來完成自身的復(fù)制。同時,病毒入侵將會引起宿主的免疫應(yīng)答,來抵御病毒入侵。因此,研究病毒與宿主細(xì)胞的相互作用是一件非常重要有意義的課題,可以更好地理解宿主是如何抵御病毒入侵的,而病毒又是如何逃避宿主細(xì)胞免疫應(yīng)答來完成復(fù)制的,這有助于尋找新的抗病毒靶位點(diǎn)。NDRG1蛋白是一種細(xì)胞質(zhì)蛋白,在上皮細(xì)胞中高表達(dá),具有多種生物學(xué)功能和調(diào)控眾多細(xì)胞信號通路的調(diào)控因子,在細(xì)胞周期調(diào)控,細(xì)胞成熟、分化,血管生成,腫瘤抑制和P53介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡中均起著重要作用,而抑制NF-κB信號通路活性是它一個很重要功能。因此,對NDRG1蛋白與流感病毒復(fù)制之間是否存在聯(lián)系很感興趣。本文研究了NDRG1蛋白對禽流感H5N1亞型病毒在A549細(xì)胞中復(fù)制的作用。首先,禽流感病毒進(jìn)行感染A549細(xì)胞試驗(yàn),用熒光定量PCR和Western Blot檢測顯示,接種病毒后細(xì)胞內(nèi)NDRG1表達(dá)量上升,即流感病毒可以誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)NDRG1蛋白表達(dá)。接著構(gòu)建了靶向NDRG1基因的RNAi載體和表達(dá)載體,通過低表達(dá)和過表達(dá)NDRG1來研究對流感病毒的復(fù)制的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn),當(dāng)NDRG1低表達(dá)時,病毒的復(fù)制能力也下降了;而過表達(dá)時病毒的復(fù)制能力也增強(qiáng)了。也就是說NDRG1可以促進(jìn)病毒復(fù)制。最后,由于NDRG1蛋白可以通過抑制IKKβ位點(diǎn)來弱化NF-κB信號通路活性。因此,構(gòu)建了IKKβ表達(dá)載體,通過細(xì)胞因子IFN-β、IL-8的表達(dá)水平和病毒復(fù)制能力來研究該載體是否能克服NDRG1蛋白對NF-κB信號通路的弱化作用。結(jié)果顯示,IKKβ表達(dá)載體可以克服NDRG1的弱化作用,同時病毒的復(fù)制能力也下降了。從而說明NDRG1蛋白可以通過抑制NF-κB信號通路降低細(xì)胞先天免疫應(yīng)答來促進(jìn)病毒復(fù)制的。
【學(xué)位授予單位】：河北科技師范學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：S852.65
【圖文】：

第一章 緒論1.1 流感病毒概述流行性感冒（簡稱流感）是一種常見的以呼吸道發(fā)病為主的具有高度傳的病毒性疾病。該疾病由正粘病毒科流感病毒屬中 A 型流感病毒（influenzirus，IAVs）引起的。流感沒有國界限制，是一種全球性疾病，每年大約造00 萬到 500 萬臨床感染病例，其中有 25 萬到 50 萬致死病例[1, 2]。IAVs 可以感染多種動物，如人類、豬、馬、海洋哺乳動物和各種鳥類等一般在種內(nèi)傳播，偶爾也會跨物種傳播[3, 4]。水禽作為流感病毒的自然宿主乎攜帶了 A 型流感病毒的全部亞型[5, 6]。因此，它們被認(rèn)為是其他流感病毒頭，是由它們傳播給其它動物的（見圖 1-1）。

圖 1-2 歷史上有記錄的流感病毒 5 次大流行（引自文獻(xiàn)[8]）Fig 1-2 Fith recorded pandemics of IAVs in historyH3N2 和 B 型流感病毒是人類目前季節(jié)性流感病毒暴發(fā)為止，有記錄的流感大流行發(fā)生了 5 次，20 世紀(jì)發(fā)生發(fā)生了一次（見圖 1-2）。1918 年暴發(fā)的“西班牙流感”是起的，共造成了超過 5 000 萬人死亡。而 1957 年暴發(fā)”的 H2N2 亞型病毒代替了之前 H1N1 亞型在人類社會中

圖 1-3 歷年 H5N1 感染和死亡人數(shù)ses and deaths of human infection avian influenza A/H5N1 virus ov，不僅是人源流感病毒對人類健康存在著巨大的危害，在潛在風(fēng)險，對公共健康構(gòu)成了潛在威脅。這不僅需要毒流行、傳播情況，研究它們在禽類和其它宿主中進(jìn)化還要研究它們在宿主體內(nèi)與宿主分子的相互作用關(guān)系，新的策略。毒分類和命名病毒內(nèi)部的基質(zhì)蛋白（matrix，M）和核蛋白（nucleopr可以分為甲（A）、乙（B）和丙（C）三型。而根據(jù)病毒集素（hemagglutinin, HA）和神經(jīng)氨酸酶（neuraminidaIAVs 可以分為不同亞型[5]。到目前為止，人類已經(jīng)從自A 亞型和 11 個 NA 亞型[14]。除了 H17N10 和 H18N11 目

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 萬春鵬;周壽然;左愛仁;;RNA干擾機(jī)制及其應(yīng)用研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2008年02期

本文編號：2762422