【摘要】：赤羽病又名阿卡斑病(Akabane disease,AKAD),是由阿卡斑病毒(Akabanevirus,AKAV)引起的一種蟲媒傳染病,其主要侵害牛、羊等反芻動物,臨床表現(xiàn)以流產(chǎn)、早產(chǎn)、死產(chǎn)和胎兒的先天性關(guān)節(jié)彎曲—積水性無腦綜合征(AH綜合征)為主,也有一些毒株可引起新生動物的非化膿性腦脊髓炎。赤羽病廣泛分布于非洲、亞洲及大洋洲,通過嗜血媒介昆蟲進(jìn)行傳播。本研究對采集自廣西共2411份牛和山羊血清樣品(其中山羊血清1428份,采集自12個(gè)市;牛血清983份,采集自13個(gè)市)使用ELISA方法進(jìn)行AKAV抗體檢測。結(jié)果表明,廣西14個(gè)地市的牛和山羊群中均存在AKAV感染,各地感染情況不一,且牛的陽性率顯著高于山羊,牛群總陽性率為63.89%,山羊總陽性率36.48%。通過對各地區(qū)AKAV抗體陽性率進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)山羊的AKAV抗體陽性率以梧州市最高,為62.50%;牛的AKAV抗體陽性率以南寧最高,為82.29%。分析導(dǎo)致AKAV抗體陽性動物分布的環(huán)境影響因素時(shí)發(fā)現(xiàn),廣西牛和山羊AKAV的感染受到地理位置(緯度)和氣候因素(溫度,降雨量)的影響。本研究在廣西大化縣丹丈屯和板外屯以及興業(yè)縣蒲塘鎮(zhèn)龍旗村設(shè)立的三個(gè)監(jiān)控點(diǎn)中進(jìn)行傳播媒介調(diào)查,共發(fā)現(xiàn)五種庫蠓,分別為Culicoides oxystoma(尖嗓庫蠓)、Culicoidesperegrinus(異域庫螓)、Culicoides arakawae(荒川庫蠓)、Culicoides humeralis(肩宏庫蠓)和Culicoides homotomus(原野庫蠓)。其中異域庫蠓和尖嗓庫蠓占比較大,為優(yōu)勢種屬。本研究在大化丹丈監(jiān)控點(diǎn)山羊血液中分離到一株AKAV,命名為GXDH01,這是我國首株山羊源AKAV。通過分段擴(kuò)增的方法獲得GXDH01株的全基因序列,其中L節(jié)段全長6968bp,M節(jié)段全長4309bp,S節(jié)段全長856bp。基因序列遺傳進(jìn)化分析表明,該病毒與分離自牛的日本和韓國病毒株親緣關(guān)系較近,屬于亞洲群。但L節(jié)段與M、S節(jié)段分別屬于不同的大分支,有發(fā)生基因重組的可能。通過開展GXDH01株對乳鼠,成年小鼠和竹鼠的致病性研究時(shí)發(fā)現(xiàn),GXDH01株通過腦內(nèi)接種可使乳鼠死亡,LD50為104.6TCID50;但不能使成年小鼠出現(xiàn)癥狀,該試驗(yàn)結(jié)果與AKAV標(biāo)準(zhǔn)株OBE-1攻毒試驗(yàn)結(jié)果相同。將GXDH01株通過皮下接種的方式攻毒50日齡幼年竹鼠,可使竹鼠出現(xiàn)神經(jīng)癥狀并死亡。接種劑量為106.9TCID50時(shí),死亡率為66.7%;接種量為105.9TCID50,死亡率為33.3%。死亡竹鼠剖檢可見腦組織和肺臟出血,肝臟出現(xiàn)壞死。病理檢測可見腦組織血管周圍有單層或多層細(xì)胞浸潤,形成“血管套”;肝組織內(nèi)見數(shù)個(gè)壞死灶,灶內(nèi)肝細(xì)胞變性、壞死,大量炎性細(xì)胞浸潤、壞死,血管周圍大量炎性細(xì)胞浸潤;肺支氣管及肺泡腔內(nèi)大量中性粒細(xì)胞,局部肺組織內(nèi)出血,肺泡隔增厚。
【學(xué)位授予單位】：廣西大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：S855.3
【圖文】：

ＡＫＡＶ［３９】；邋２００３年，Ｈｕａｎｇ邋Ｃ等在臺灣無癥狀的豬身上分離出一株ＡＫＡＶ，并通逡逑過ＡＫＡＶ抗體檢測發(fā)現(xiàn)，臺灣的豬群中有很高的ＡＫＡＶ陽性率［４氣逡逑綜合上述報(bào)道，繪制ＡＫＡＶ世界分布圖（圖１－１）。由圖可知，ＡＫＡＶ主要的逡逑流行區(qū)域?yàn)閬喼蕖⒎侵薜牟糠謬乙约鞍拇罄麃�。逡逑１邋ｔ逡逑？邋漙逡逑ｗ逡逑圖１－１邋ＡＫＡＶ的世界分布逡逑Ｆｉｇ．邋１－１邋Ｗｏｒｌｄ邋ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ邋ｏｆ邋ＡＫＡＶ逡逑黑色表示該地區(qū)有ＡＫＡＶ病毒分離和ＡＫＡＶ抗體；紅色表示該地區(qū)僅存在ＡＫＡＶ抗體逡逑Ｂｌａｃｋ邋ｉｎｄｉｃａｔｅｓ邋ＡＫＡＶ邋ｖｉｒｕｓ邋ｉｓｏｌａｔｉｏｎ邋ａｎｄ邋ＡＫＡＶ邋ａｎｔｉｂｏｄｙ邋ｉｎ邋ｔｈｅ邋ｒｅｇｉｏｎ．Ｒｅｄ邋ｉｎｄｉｃａｔｅｓ邋ｔｈｅ逡逑ｐｒｅｓｅｎｃｅ邋ｏｆ邋ＡＫＡＶ邋ａｎｔｉｂｏｄｙ邋ａｌｏｎｅ邋ｉｎ邋ｔｈｉｓ邋ｒｅｇｉｏｎ逡逑４逡逑

Ｆｉｇｕｒｅ邋１－２邋Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ邋ｄｉａｇｒａｍ邋ｏｆ邋Ｓ，邋Ｍ邋ａｎｄ邋Ｌ邋ｏｆ邋ＡＫＡＶ邋ｇｅｎｏｍｅ逡逑Ｌ節(jié)段的ＯＲＦ編碼唯一產(chǎn)物Ｌ蛋白。在其５＇和３＇端的ＮＣＲ分別長３０ｎｔ和逡逑８２ｎｔ，鍋柄狀結(jié)構(gòu)長２２ｂｐ。如圖１－２所示：除３＿端９和１９位的２個(gè)殘基外，其余逡逑２０個(gè)殘基均可按照“沃森一克里克”法則進(jìn)行配對。逡逑Ｍ節(jié)段的ＯＲＦ編碼高甘露糖型ＧＰ前體（ＧＰＣ），該ＧＰ前體可被宿主細(xì)胞蛋逡逑白酶切割成三個(gè)部分，分別為Ｇ２蛋白，ＮＳｍ蛋白和Ｇ１蛋白。其３＇－ＮＣＲ和５＇－ＮＣＲ逡逑分別長８１ｎｔ和２２ｎｔ，鍋柄狀結(jié)構(gòu)序列長２２ｂｐ。如圖１－２所示：除３＋端８？９位的２逡逑個(gè)殘基外，其余２０個(gè)殘基均可配對［６５］。逡逑Ｓ節(jié)段的０ＲＦ有兩個(gè)，且高度重疊，分別編碼Ｎ和ＮＳｓ兩個(gè)蛋白，編碼ＮＳｓ逡逑蛋白的ＯＲＦ在Ｎ蛋白的內(nèi)部。Ｓ節(jié)段的鍋柄狀結(jié)構(gòu)與Ｌ和Ｍ節(jié)段有所不同，根逡逑據(jù)報(bào)道，其３＇－ＮＣＲ和５＇－ＮＣＲ的長度分別為１２３ｎｔ和３３ｎｔ，鍋柄狀結(jié)構(gòu)序列長２４ｂｐ，逡逑如圖１－２所示

邐Ｌ逡逑５邋ＡＧＵＡＧＵＧＵＧＣＣＣＣＵＡＡＡＵＧＣＡＡ逡逑圖１－２ＡＫＡＶ基因組Ｓ、Ｍ和Ｌ示意圖逡逑Ｆｉｇｕｒｅ邋１－２邋Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ邋ｄｉａｇｒａｍ邋ｏｆ邋Ｓ，邋Ｍ邋ａｎｄ邋Ｌ邋ｏｆ邋ＡＫＡＶ邋ｇｅｎｏｍｅ逡逑Ｌ節(jié)段的ＯＲＦ編碼唯一產(chǎn)物Ｌ蛋白。在其５＇和３＇端的ＮＣＲ分別長３０ｎｔ和逡逑８２ｎｔ，鍋柄狀結(jié)構(gòu)長２２ｂｐ。如圖１－２所示：除３＿端９和１９位的２個(gè)殘基外，其余逡逑２０個(gè)殘基均可按照“沃森一克里克”法則進(jìn)行配對。逡逑Ｍ節(jié)段的ＯＲＦ編碼高甘露糖型ＧＰ前體（ＧＰＣ），該ＧＰ前體可被宿主細(xì)胞蛋逡逑白酶切割成三個(gè)部分，分別為Ｇ２蛋白，ＮＳｍ蛋白和Ｇ１蛋白。其３＇－ＮＣＲ和５＇－ＮＣＲ逡逑分別長８１ｎｔ和２２ｎｔ，鍋柄狀結(jié)構(gòu)序列長２２ｂｐ。如圖１－２所示：除３＋端８？９位的２逡逑個(gè)殘基外，其余２０個(gè)殘基均可配對［６５］。逡逑Ｓ節(jié)段的０ＲＦ有兩個(gè)，且高度重疊，分別編碼Ｎ和ＮＳｓ兩個(gè)蛋白，編碼ＮＳｓ逡逑蛋白的ＯＲＦ在Ｎ蛋白的內(nèi)部。Ｓ節(jié)段的鍋柄狀結(jié)構(gòu)與Ｌ和Ｍ節(jié)段有所不同

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本文編號：2762319