【摘要】：金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是一種人畜共患病原菌,該菌引起的兔壞死性肺炎,常常導致兔急性呼吸窘迫,伴胸腔積液、咯血并快速致死,給兔養(yǎng)殖業(yè)造成巨大的經(jīng)濟損失。盡管一些抗生素對兔壞死性肺炎具有一定的治療效果,但是金黃色葡萄球菌耐藥菌株的出現(xiàn)以及抗生素藥物殘留問題,使得抗生素療法受到了限制。因此,急需尋找一種既能夠有效防治金黃色葡萄球菌感染引起的兔壞死性肺炎,又能在生產(chǎn)過程中提供無藥殘和安全健康的肉質(zhì)品的生物治療藥物。噬菌體是一類能夠感染細菌的病毒,它能夠侵入細菌細胞內(nèi),特異性殺死細菌,為防控金黃色葡萄球菌感染引起的疾病提供了一種有前景的替代療法。多項研究表明,噬菌體針對一些細菌感染具有很好的治療效果,反映了噬菌體用于治療的潛力。然而,目前噬菌體尚未用于預防和治療由金黃色葡萄球菌引起的兔壞死性肺炎感染。為了研究噬菌體是否對金黃色葡萄球菌引起的兔壞死性肺炎具有治療作用,本文進行了一系列的研究。首先,從臨床獲得的患有壞死性肺炎的兔肺中分離鑒定了多株金黃色葡萄球菌。藥敏試驗結(jié)果表明這些菌株具有多重耐藥性,主要對青霉素,紅霉素,氯霉素和氟喹諾酮類等抗生素具有抗性,但所有這些菌株對抗生素利奈唑胺敏感。隨后,利用其中一株金黃色葡萄球菌分離株S6作為宿主菌,從污水樣品中分離篩選出一株新的金黃色葡萄球菌噬菌體并將其命名為VB-Sav M-JYL01,并進一步研究了噬菌體VB-Sav M-JYL01的主要生物學特性。噬菌體VB-Sav M-JYL01在TSB固體平板上形成圓形透明噬斑,直徑約為1-2 mm。透射電鏡下觀察噬菌體VB-Sav M-JYL01的形態(tài),結(jié)果顯示該噬菌體具有正二十面體的頭部和可伸縮的尾部,表明該噬菌體屬于肌尾噬菌體科。當感染復數(shù)為0.01時,噬菌體的效價達到最大值,約為9.8×109 PFU/m L。一步生長曲線測定結(jié)果顯示,噬菌體VB-Sav M-JYL01的潛伏期約為20 min,爆發(fā)量約為100 PFU/cell,表明該噬菌體具有高效的裂解活性。此外,噬菌體宿主譜測定結(jié)果顯示,該噬菌體有較寬的宿主譜,裂解率為75.7%(50/66)。噬菌體VB-Sav M-JYL01全基因組學研究表明,該噬菌體基因組全長141,384 bp,含有219個開放閱讀框,其中未發(fā)現(xiàn)與細菌毒力、抗生素抗性以及溶原生成相關基因,這為該噬菌體用于治療性研究奠定了基礎。本文進一步評估了噬菌體VB-Sav M-JYL01對兔壞死性肺炎模型的治療效果。體內(nèi)實驗結(jié)果顯示,單次鼻內(nèi)給予3×109 PFU的噬菌體VB-Sav M-JYL01可在48 h有效提高兔存活率至90%(9/10),而通過PBS或利奈唑胺治療后的保護率分別為10%(1/10)和80%(8/10)。兔肺部菌落計數(shù)結(jié)果表明,噬菌體VB-Sav M-JYL01治療組在感染24 h后肺部菌載量為4.18×104 CFU/g,與PBS治療組(7.38×107 CFU/g)以及利奈唑胺治療組(3.12×105 CFU/g)相比顯著降低。此外,與PBS治療組相比,噬菌體VB-Sav M-JYL01能夠顯著改善肺組織損傷程度。同時,噬菌體VB-Sav M-JYL01治療后的兔血液及肺泡灌洗液中的總蛋白、殺白細胞素(PVL)、α-毒素(Hla)以及相關細胞因子的含量顯著低于PBS處理組。以上研究結(jié)果表明,金黃色葡萄球菌噬菌體VB-Sav M-JYL01具有高裂解活性和寬宿主譜,且在體外和體內(nèi)均能有效的殺死金黃色葡萄球菌,該噬菌體在治療金黃色葡萄球菌感染以及作為防治金黃色葡萄球菌引起的兔壞死性肺炎方面具有很大的潛力。
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：S858.291
【圖文】：

定和藥敏試驗分析系統(tǒng)色葡萄球的分離與鑒定劃線對菌株進行了分呈金黃色。革蘭氏染色后藍紫色，形態(tài)呈葡萄串核糖核酸凝膠電泳結(jié)果 bp 位置處出現(xiàn)一條目的萄球菌，并依次將其命1，S12，S13，S14，S1，表明這 16 株分離的金

圖 1.2 顯微鏡下分離菌的顏色與形態(tài)r and morphology of the isolated bacteria u圖 1.3 分離菌 Gap 基因的 PCR 鑒定ig 1.3 PCR identification of isolate Gap g

第二篇 研究內(nèi)容 第一章 兔壞死性肺炎金黃色葡萄球菌的分離、鑒定及 物敏感性測圖 1.2 顯微鏡下分離菌的顏色與形態(tài) 1.2 The color and morphology of the isolated bacteria under the micros

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 帥金鳳;黃坤玲;劉建華;楊會榮;牛波;路素坤;曹麗潔;及立立;;肺炎支原體感染致兒童壞死性肺炎的臨床特征分析[J];臨床兒科雜志;2019年01期

2 費文yN;羅健;;兒童壞死性肺炎診治進展[J];臨床兒科雜志;2018年04期

3 李曉慶;李德麗;殷欣;李虹彥;;28例壞死性肺炎患兒的護理[J];護理學雜志;2018年16期

4 李寧;郭軍;;39例兒童社區(qū)獲得性重癥壞死性肺炎病原學分析[J];中國現(xiàn)代藥物應用;2017年19期

5 陳琬;;小兒壞死性肺炎的病理基礎及影像表現(xiàn)[J];中國實用醫(yī)藥;2013年30期

6 洪波;朱月鈕;朱曉東;;9例兒童壞死性肺炎的臨床護理體會[J];中國護理管理;2013年S1期

7 祁昊;彭韶;;兒童壞死性肺炎臨床診治分析[J];臨床兒科雜志;2012年08期

8 張或，雷振之;壞死性肺炎[J];醫(yī)師進修雜志;1994年01期

9 富紹禎;;噴霧器與醫(yī)院內(nèi)感染[J];國外醫(yī)學(醫(yī)院管理分冊);1988年02期

10 陳凈;張文雙;鄒映雪;;小兒壞死性肺炎的臨床診斷和治療研究進展[J];醫(yī)學理論與實踐;2019年14期

相關會議論文 前10條

1 楊男;尚云曉;;兒童壞死性肺炎49例臨床分析[A];第二十次全國兒科中西醫(yī)結(jié)合學術會議資料匯編[C];2016年

2 朱曉東;朱月鈕;陳菲;張明軍;;兒童壞死性肺炎臨床分析[A];中華醫(yī)學會第十七次全國兒科學術大會論文匯編（上冊）[C];2012年

3 朱曉東;朱月鈕;陳菲;張明軍;;兒童壞死性肺炎臨床分析[A];2012年江浙滬兒科學術年會暨浙江省醫(yī)學會兒科學分會學術年會、兒內(nèi)科疾病診治新進展國家級學習班論文匯編[C];2012年

4 于鑫巖;李梅;楊蕊;;12例肺炎鏈球菌性壞死性肺炎的臨床分析[A];中華醫(yī)學會急診醫(yī)學分會第17次全國急診醫(yī)學學術年會論文集[C];2014年

5 周云連;張園園;陳志敏;;肺炎鏈球菌壞死性肺炎與肺炎支原體壞死性肺炎的臨床特征分析[A];2014年浙江省醫(yī)學會兒科學分會學術年會暨兒內(nèi)科疾病診治新進展國家級繼續(xù)教育學習班論文匯編[C];2014年

6 王玉靜;劉春峰;;兒童肺炎鏈球菌壞死性肺炎臨床特點分析[A];中華醫(yī)學會第十七次全國兒科學術大會論文匯編（上冊）[C];2012年

7 王穎碩;陳志敏;;兒童肺炎支原體感染相關的壞死性肺炎[A];中華醫(yī)學會第十七次全國兒科學術大會論文匯編（上冊）[C];2012年

8 王穎碩;陳志敏;;兒童肺炎支原體感染相關的壞死性肺炎[A];2012年江浙滬兒科學術年會暨浙江省醫(yī)學會兒科學分會學術年會、兒內(nèi)科疾病診治新進展國家級學習班論文匯編[C];2012年

9 王穎碩;陳志敏;;兒童肺炎支原體感染相關的壞死性肺炎[A];中華醫(yī)學會第十三屆全國兒科呼吸學術會議論文匯編[C];2012年

10 李敏;;中國社區(qū)獲得性MRSA分子特征及感染控制特略[A];第一次全國中西醫(yī)結(jié)合檢驗醫(yī)學學術會議暨中國中西醫(yī)結(jié)合學會檢驗醫(yī)學專業(yè)委員會成立大會論文匯編[C];2014年

相關重要報紙文章 前5條

1 馬玉勝;勤看勤查早識鴿病[N];河北科技報;2006年

2 映南;“三看九查”辨鴿病[N];四川科技報;2002年

3 薛照文;“十查”辨鴿病[N];中國畜牧報;2003年

4 茜茜;犬腺病毒Ⅱ型感染[N];中國畜牧報;2002年

5 吉林省雙陽區(qū)長嶺鄉(xiāng)畜牧獸醫(yī)站 丁海鵬 秋紅;一眼認出病鴿[N];河北科技報(農(nóng)村版);2000年

相關碩士學位論文 前10條

1 冀亞路;金黃色葡萄球菌噬菌體VB-SavM-JYL01的生物學特性及其對兔壞死性肺炎實驗治療的研究[D];吉林大學;2019年

2 楊偉娜;支氣管鏡在45例兒童壞死性肺炎中的臨床應用[D];吉林大學;2019年

3 唐琳;17例兒童肺炎支原體感染壞死性肺炎臨床特點分析[D];重慶醫(yī)科大學;2019年

4 馮馨;先天性肺囊腫合并感染與壞死性肺炎的早期鑒別[D];鄭州大學;2019年

5 李偉霞;兒童肺炎支原體壞死性肺炎預測指標研究[D];鄭州大學;2019年

6 費文yN;26例兒童壞死性肺炎的臨床分析[D];重慶醫(yī)科大學;2018年

7 劉帥帥;35例兒童壞死性肺炎臨床特征研究[D];吉林大學;2015年

8 祁昊;兒童壞死性肺炎12例臨床診治分析[D];鄭州大學;2013年

9 常文嬌;金黃色葡萄球菌PV-殺白細胞素（PVL）對多形核粒細胞的影響[D];安徽醫(yī)科大學;2011年

10 葉們;61例肺隱球菌病的臨床分析[D];浙江大學;2016年

本文編號：2761095