【摘要】：近幾年來(lái),仔豬腹瀉為生豬養(yǎng)殖業(yè)中最嚴(yán)重的威脅之一,造成了國(guó)內(nèi)甚至全世界范圍內(nèi)極其巨大的經(jīng)濟(jì)損失。科學(xué)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)顯示,產(chǎn)腸毒素型大腸桿菌(ETEC)感染直接導(dǎo)致了四成以上的仔豬腹瀉,且這一比例漸呈逐年上升之勢(shì)。ETEC主要分泌耐熱(ST)與不耐熱(LT)兩種類型的腸毒素,其研究結(jié)果表明:絕大多數(shù)仔豬腹瀉均是由I型耐熱腸毒素(STa)導(dǎo)致。然而,ETEC往往同時(shí)分泌多種腸毒素,在體內(nèi)試驗(yàn)中很難獨(dú)立研究單一毒素的作用,因此,本研究利用本課題組前期成功構(gòu)建的能夠穩(wěn)定表達(dá)I型耐熱腸毒素的重組大腸桿菌為研究對(duì)象,以七日齡仔豬為模式動(dòng)物,剖析單一腸毒素STa對(duì)仔豬腸道的損傷及機(jī)理。本研究將24頭7日齡仔豬隨機(jī)分為四組:空白對(duì)照組、STa組(2×10~9 CFU重組大腸桿菌LMG194-STa)、LMG194組(2×10~9 CFU大腸桿菌LMG194)以及K88組(2×10~9 CFU大腸桿菌K88),其中無(wú)毒的宿主菌大腸桿菌LMG194為陰性對(duì)照組,野生強(qiáng)毒株大腸桿菌K88為陽(yáng)性對(duì)照。試驗(yàn)期7天,仔豬使用人工乳飼喂,各菌株于第5天早晚各一次進(jìn)行口服接種,第七天屠宰取樣。試驗(yàn)結(jié)果如下:1)重組大腸桿菌LMG194-STa對(duì)仔豬腸道結(jié)構(gòu)與屏障功能的影響及機(jī)理與對(duì)照組相比,STa組提高了仔豬小腸的隱窩深度,降低了絨毛高度和絨毛表面積;顯著降低了腸黏膜總蛋白/RNA、總蛋白/DNA及RNA/DNA的比值(P0.05);顯著地調(diào)節(jié)了腸道損傷相關(guān)基因villin,i-FABP,VNN1 and MMP3的相對(duì)表達(dá)量以及腸道屏障功能相關(guān)蛋白o(hù)ccludin、claudin-1的相對(duì)表達(dá)量(P0.05)。2)重組大腸桿菌LMG194-STa對(duì)仔豬腸道炎癥與免疫功能的影響及機(jī)理與對(duì)照組相比,STa組腸黏膜杯狀細(xì)胞數(shù)量與淋巴細(xì)胞密度顯著降低(P0.05);顯著地影響了血漿與腸道中炎性因子濃度(IL6,IL8,IL10,IFN-α,TNF-α)、抗氧化酶(SOD,GPX,CAT,NOS,MPO)與氧化產(chǎn)物(MDA,H_2O_2)的活力與含量(P0.05);顯著地調(diào)節(jié)了炎癥反應(yīng)與氧化應(yīng)激相關(guān)基因CCL2,IL1β,IL4,CXCL9,IFNγ,HSHP1,pBD1,NOX2,GSTO2及相關(guān)蛋白HSP70的相對(duì)表達(dá)量(P0.05)。3)重組大腸桿菌LMG194-STa對(duì)仔豬腸道吸收與轉(zhuǎn)運(yùn)功能的影響及機(jī)理與對(duì)照組相比,STa組血漿D木糖的含量顯著上升(P0.05);并顯著地調(diào)節(jié)了腸道營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收、轉(zhuǎn)運(yùn)及代謝功能相關(guān)基因AQP8,AQP10,b~(0,+)AT,SGLT1,KCNJ13,INSR,PCK1,LPL,REG3G及相關(guān)蛋白AQP3,AQP4,KCNJ13的相對(duì)表達(dá)量(P0.05)。試驗(yàn)結(jié)果表明,表達(dá)I型耐熱腸毒素的重組大腸桿菌LMG194-STa損傷了仔豬腸道黏膜屏障和形態(tài)結(jié)構(gòu),破壞了腸黏膜的生長(zhǎng)與修復(fù),使腸道組織產(chǎn)生了氧化應(yīng)激與炎癥反應(yīng),降低了腸道的屏障、免疫、吸收、轉(zhuǎn)運(yùn)及代謝功能。進(jìn)一步的分子機(jī)理研究顯示,這些影響是由重組菌調(diào)節(jié)仔豬腸道損傷、炎性因子及轉(zhuǎn)運(yùn)載體及營(yíng)養(yǎng)代謝相關(guān)基因和蛋白質(zhì)的調(diào)節(jié)而導(dǎo)致的。
【學(xué)位授予單位】：武漢輕工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：S858.28
【圖文】：

仔豬腹瀉的危害（摘自百度搜索）

大腸桿菌腸毒素的致病機(jī)理

近30年來(lái)ETEC與STa的學(xué)術(shù)熱度（數(shù)據(jù)來(lái)源：知網(wǎng)、PubMed）

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本文編號(hào)：2760778