【摘要】：日本乙型腦炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)是一種屬于黃病毒科黃病毒屬的噬神經性病毒,主要通過侵入中樞神經系統引起神經炎癥。該病毒引起的日本乙型腦炎(Japanese encephalitis,JE)是一種嚴重危害公共衛(wèi)生的人畜共患傳染病,致死率達到25%左右。本研究通過MicroRNA基因芯片和MicroRNA測序分析,發(fā)現在JEV感染期間小鼠腦組織和神經母瘤細胞中大部分miRNA表達下調;利用miRDB和TargetScan分析發(fā)現miR-466d-3p靶向作用IL-1β,并通過體外轉染miR-466d-3p的模擬物和抑制劑進一步確定了miR-466d-3p與IL-1β的靶向關系;本研究構建了JEV所有非結構蛋白真核表達質粒,通過轉染小鼠的小膠質細胞和神經母瘤細胞發(fā)現NS3能夠抑制miR-466d-3p等miRNA的表達,證明NS3抑制宿主miRNA表達的功能。綜上所述,乙腦病毒NS3能夠有效抑制宿主miR-466d-3p等miRNA的表達,進而促進神經炎癥的發(fā)生。
【學位授予單位】：內蒙古大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：S852.65
【圖文】：

內蒙古大學碩士學位論文例數據的統計顯示，2004 到 2015 年期間，累積乙腦病例 37973 例，其中人群主要是青少年和養(yǎng)殖戶。乙腦病毒分布于亞洲東部和溫帶及熱帶的南部地區(qū)，在地理位置上遍布于（中國，日本，韓國，西伯利亞，臺灣，菲律賓和越南），東南亞和澳大北部（柬埔寨，印度尼西亞，老撾，馬來西亞，泰國和托雷斯），以及南孟加拉國，不丹，印度，緬甸，尼泊爾和斯里蘭卡）等這些地域內[11,12,13]國，除了東北，青海，新疆，西藏之外的其他省份都有乙腦病例的報道。

圖 1.2 乙腦病毒的結構[18]Figue 1.2 The structure of Japanese encephalitis virus geneJEV 是不分節(jié)段單股正鏈 RNA 病毒，與黃熱病病毒、（YFV）、西尼羅病毒（WNV）、登革病毒（DENV）等同樣都屬于黃病毒科（Flaviviridae）黃病毒（Favivirus）[19]。JEV 的基因組長 11kb，具有一個開放閱讀框，其 5’端具有帽子結構，3’端無 poly（A）結尾。該病毒基因組編碼了十個蛋白，包括結構蛋白和非結構蛋白，三個結構蛋白分別為核衣殼蛋白（C）、膜蛋白（PrM）、囊膜蛋白（E），七個非結構蛋白分別為 NS1 蛋白、NS2A 蛋白、NS2B 蛋白、NS3 蛋白、NS4A 蛋白、NS4B 蛋白和 NS5 蛋白[20]。核衣殼蛋白 C 與核酸包裹在脂質的囊膜內部，膜蛋白 PrM、囊膜蛋白 E鑲嵌其中，C 蛋白具有 120 個氨基酸并形成同源二聚體，它主要參與病毒基因組的包裝和核衣殼的形成[21]。prM 蛋白和 E 蛋白是兩個具有跨膜功能的糖蛋白，它們可以在信號肽酶的翻譯切割后從新生的多蛋白中釋放出來。在未成熟的病毒體中，prM 蛋白可以作為伴侶蛋白參與 E 蛋白的折疊和組裝，當病毒從

圖 2.1 經 JEV 感染發(fā)病的小鼠腦部具有顯著性變化的 miRNA 表達譜e 2.1 The expression profiles of significantly different miRNA in mouse braiinfection鼠腦組織中兩種主要組成細胞是神經細胞和膠質細胞，為了進中實驗結果，我們分別以 1Moi 的 JEV 病毒（SA 和 P3）感染）和膠質細胞（BV2）。48h 后處理細胞并對 mNA 細胞中的 m分析，其表達譜顯示在 41 條具有顯著性變化的宿主 miRNA 中 的表達為顯著下調（圖 2.2）。

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本文編號：2753037