【摘要】：半個世紀(jì)以來,狼(Canis lupus)在全球范圍內(nèi)的種群數(shù)量嚴(yán)重下降,分布區(qū)也大大縮小,因而受到法律保護。同時狩獵并利用狼的產(chǎn)品也具有深遠(yuǎn)的文化根源,因此,頻頻發(fā)生盜獵和走私狼及其產(chǎn)品的違法事件。然而,犯罪行為被查獲之后,嫌疑人為了逃避法律打擊往往聲稱所涉動物為家犬。因此,執(zhí)法上需要準(zhǔn)確鑒別狼和家犬(C.l.familiar.s.的方法。因為家犬訓(xùn)化歷史僅有1.5萬年,沒有特有的遺傳突變,因而基于mtDNA的傳統(tǒng)鑒別方法效果不佳。針對這一問題,本研究采用13個核基因組SNP標(biāo)記,基于SNaPshot分型技術(shù)建立了復(fù)合擴增和分型體系,分別對97份蒙古狼(C.l.chanco)和108份家犬進(jìn)行了分析,用R軟件中的assignPOP程序包分析并構(gòu)建鑒別體系。結(jié)果顯示,有12個SNP位點分型可重復(fù)性高,在蒙古狼和家犬的頻率差異大,以此構(gòu)建狼-犬鑒別體系。這一體系將蒙古狼和家犬正確回判的概率在0.97±0.05至1.00±0.03之間,蒙古狼的略高于家犬。以蒙古狼(n=17)和家犬(n=18)隨機樣本進(jìn)行盲測,正確率達(dá)100%。特異性測試表明,只有犬科的北極狐(Vulpes lagopus)和赤狐(V.vulpes)可在一些位點成功分型,而在人類和鹿科、牛科、貓科動物均不能擴增分型,對跨種,尤其是人類DNA污染耐受力強。靈敏度測試表明,最低可靠檢出量為125pg總DNA。平均分析成本為60RMB/樣品。以上結(jié)果表明,本研究建立的方法對鑒別蒙古狼和家犬準(zhǔn)確可靠,靈敏度高,特異性好,成本低廉。所建立的基因頻率數(shù)據(jù)庫可以支持實際執(zhí)法鑒定。
【學(xué)位授予單位】：東北林業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：S829.2;S865
【圖文】：

從而推斷該地區(qū)為家犬的起源地，但事實上，那些地區(qū)雖然馴化過一些動物，逡逑但并不是家犬的發(fā)源地�！绷硗�，通過與狼基因的比較分析，他們認(rèn)為１．５萬年前，幾種逡逑不同的狼分化出了多個品種的家犬（圖１－１）｜４］。逡逑邐逡逑愛斯基摩狗逡逑北美狼＾逡逑—邐ｆ邋玩ｆＳ邋犬逡逑中國狼匕北京猜子狗逡逑松獅狗逡逑－Ｘ邋Ｉ邐斗牛犬逡逑澳洲野狗邐ｔ逡逑＿邐哈叭狗逡逑亞洲野狗邐波索犬逡逑＾邋Ｌ邐紐芬蘭狗逡逑印度狼逡逑格Ｕ邐沙樂基＆逡逑Ｌ邋＾邋ＩｎｉＰ逡逑＼邋獵鹿犬ｒ逡逑Ｈ：＼ｉｒｒ逡逑牧羊犬丨＃獄逡逑歐洲狼邐［獵鳥犬逡逑絲毛狗邐馬耳他犬逡逑＞％逡逑爹利犬逡逑圖丨－１現(xiàn)代品種與４個可能祖先狼之間的關(guān)系１１１逡逑Ｆｉｇ．１－１邋Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ邋ｂｅｔｗｅｅｎ邋ｍｏｄｅｍ邋ｂｒｅｅｄｓ邋ａｎｄ邋ｆｏｕｒ邋ｐｏｓｓｉｂｌｅ邋ａｎｃｅｓｔｒａｌ邋ｗｏｌｖｅｓ逡逑－２－逡逑

逡逑如直方圖所示，亞種內(nèi)距離頻率分布與亞種間距離略有重疊（圖２－１）。但是分析數(shù)據(jù)逡逑可知，蒙古狼和家犬亞種內(nèi)９５％置信區(qū)間的范圍在０．９２至３．４６８的區(qū)間內(nèi)，而亞種間逡逑９５％置信區(qū)間的范圍在４．４２１至４．９５１區(qū)間內(nèi)，亞種內(nèi)和亞種間的遺傳距離分別在這兩逡逑個區(qū)間內(nèi)時，其可信程度高達(dá)９５％。逡逑－１５－逡逑

利用蒙特卡洛交叉驗證計算分配準(zhǔn)確性，設(shè)置三個等級的訓(xùn)練集與四個等級的訓(xùn)練逡逑位點的交叉驗證。圖中共分為三個假設(shè)種群，箱線圖結(jié)果分別代表總體，蒙古狼和家犬逡逑的蒙特卡洛交叉驗證結(jié)果（圖３－１）。ｘ軸所示數(shù)值代表每個模塊中分別選�。担埃�、７０％逡逑和９０％三個等級的隨機個體，ｙ軸代表分配準(zhǔn)確性概率，粉色、綠色、藍(lán)色和紫色四種逡逑箱線顏色分別代表前１０％、２５％、５０％和１００％高尸５７￣的四個等級的訓(xùn)練位點。逡逑結(jié)果表明，在僅選取前２５％高位點對５０％個體的訓(xùn)練集進(jìn)行驗證的條件下，即逡逑可達(dá)到很高的鑒定準(zhǔn)確率。但為達(dá)到最高的準(zhǔn)確率，本研究主要研宄以全部１２個位點逡逑對樣本個體水平的訓(xùn)練集進(jìn)行驗證的分配結(jié)果。逡逑ｏｖｅｒａｌｌ邐ｗｏｌｆ邐ｄｏｇ逡逑Ｔ邋Ｍ邐Ｔ邐ＴＶ＊邐Ｐｒｏｐ邋ｏｆ逡逑＾邋ａ邋？邐＊邐ｔｒａｉｎ邋ｌｏｃｉ逡逑０．９邐？邐？逡逑？邋？邋丫？？邋＿邋１逡逑？邋？逡逑？邐？邐＿邋０．５逡逑？邐＂邐白邋０．２５逡逑？？邐白邋０．１逡逑０．邋８邋－邋？逡逑S緬義�？眷辶x希埃靛澹埃峰危埃瑰危埃靛

本文編號：2750281