【摘要】：畜牧生產(chǎn)上,微生物添加劑具有調(diào)節(jié)宿主腸道微生態(tài)平衡和提高動(dòng)物對(duì)飼料消化利用效率的作用。家兔為單胃草食動(dòng)物,其消化特點(diǎn)與豬、禽類和反芻動(dòng)物有一定差異,因此在這些動(dòng)物上使用的益生菌在家兔上并不完全適用,而針對(duì)家兔研究開發(fā)的微生物制劑種類較少。煎盤梭菌(Clostridium sartagoforme)具有分解纖維、淀粉、幾丁質(zhì)等多種碳水化合物的作用;該菌能夠產(chǎn)生芽孢,相比于乳酸菌和雙歧桿菌具有更好的抗逆性;作為厭氧菌,煎盤梭菌在適應(yīng)消化道厭氧環(huán)境方面具有一定的優(yōu)勢(shì);而目前關(guān)于煎盤梭菌應(yīng)用在動(dòng)物上的研究還未見報(bào)道。另外,家兔生產(chǎn)上關(guān)于日糧中淀粉具體需要量沒有明確規(guī)定。基于這些原因,本試驗(yàn)從伊拉肉兔糞便中分離鑒定了煎盤梭菌XN-T4,并研究了煎盤梭菌和淀粉水平對(duì)獺兔生產(chǎn)性能、免疫特性、腸道發(fā)育、盲腸內(nèi)環(huán)境和盲腸菌群的影響,從而為家兔微生物添加劑的研究開發(fā)提供資料依據(jù),并進(jìn)一步補(bǔ)充完善家兔營(yíng)養(yǎng)需要和飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)。本試驗(yàn)研究結(jié)果如下:1利用梭菌增殖培養(yǎng)基(RCM),通過厭氧培養(yǎng),結(jié)合16S rDNA分子鑒定技術(shù),從伊拉肉兔糞便中分離得到煎盤梭菌XN-T4,該菌株為革蘭氏陽(yáng)性厭氧菌,能夠產(chǎn)生芽孢,具有較好的胃酸和膽鹽耐受性,并且能夠耐受80℃的高溫10 min。2隨機(jī)選取162只35日齡斷奶獺兔進(jìn)行二因素三水平的飼養(yǎng)試驗(yàn),將試驗(yàn)獺兔分成AG、AZ、AD、BG、BZ、BD、CG、CZ、CD共9組:字母A、B、C表示基于獺兔平均體重的菌劑添加量,分別是10~8 CFU/kg、10~6 CFU/kg和僅添加培養(yǎng)基的空白對(duì)照;G、Z、D分別表示淀粉水平為24.4%、18.6%、12.7%的日糧。每組3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)6只獺兔。預(yù)飼期7 d,正飼期28 d,期間測(cè)定獺兔體增重和每個(gè)重復(fù)總的耗料量;最后5 d采用全收糞法,每個(gè)重復(fù)選取1只獺兔收集糞便,并單獨(dú)測(cè)定其采食量。飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后每個(gè)重復(fù)選取1只,共27只獺兔進(jìn)行屠宰取樣,測(cè)定其營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率、免疫器官指數(shù)、血清免疫指標(biāo)和腸絨毛高度,并對(duì)其盲腸pH、氨態(tài)氮濃度和菌群結(jié)構(gòu)進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果表明:(1)A、B、C三種處理?xiàng)l件下,獺兔腹瀉率和死亡率無顯著差異(P0.05);平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)和屠宰率有隨著菌的添加量增加而降低的趨勢(shì),而料重比(F/G)有升高的趨勢(shì)(P0.05);粗蛋白(CP)、中性洗滌纖維(NDF)、酸性洗滌纖維(ADF)的消化率有上升趨勢(shì)(P0.05);肝臟指數(shù)有隨菌的添加量增加而降低的趨勢(shì)(P0.05)。(2)采食不同淀粉含量日糧的獺兔腹瀉率有隨淀粉含量上增加而上升的趨勢(shì)(P0.05);采食18.6%淀粉水平日糧的獺兔ADFI、屠宰率和對(duì)于CP的消化率最高(P0.05),而F/G比最低(P0.05);采食12.7%淀粉含量日糧的獺兔回腸絨毛高度低于其他兩組(P0.05)。(3)以上測(cè)定指標(biāo)在添加煎盤梭菌和飼喂不同淀粉水平日糧處理?xiàng)l件下無互作效應(yīng)。3通過對(duì)飼養(yǎng)試驗(yàn)部分的獺兔盲腸內(nèi)容物pH、氨態(tài)氮和菌群結(jié)構(gòu)進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果顯示:(1)A、B、C三種處理?xiàng)l件下獺兔盲腸內(nèi)容物pH和氨態(tài)氮濃度差異均不顯著(P0.05),但隨著菌劑添加量的增加,擬桿菌門(Bacteroidetes)相對(duì)豐度提高,而厚壁菌門(Firmicutes)相對(duì)豐度降低;綱水平上,擬桿菌綱(Bacteroidia)相對(duì)豐度升高而梭菌綱(Clostridia)相對(duì)豐度降低。(2)G、Z、D三種日糧水平條件下,試驗(yàn)兔盲腸內(nèi)容物pH差異不顯著(P0.05);氨態(tài)氮濃度有隨日糧淀粉含量降低而升高的趨勢(shì)(P0.05);在菌群結(jié)構(gòu)上,采食18.6%淀粉水平日糧的獺兔盲腸疣微菌門(Verrucomicrobia)的Akkermansia屬相對(duì)豐度最高。綜上,添加煎盤梭菌不能提高獺兔對(duì)于淀粉的消化率;相比于24.4%和12.7%淀粉含量的日糧,18.6%淀粉水平的日糧飼喂條件下獺兔生產(chǎn)性能最佳。
【學(xué)位授予單位】：西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：S829.1
【圖文】：

圖 1-1 直鏈淀粉與直鏈淀粉分子化學(xué)結(jié)構(gòu)示意圖Fig 1-1 The molecular structure of amylose and amylopectin starch.2 淀粉的分類食物中的淀粉首先被唾液中的 α-淀粉酶水解，然后在小腸被胰 α-淀粉酶水解成麥、麥芽三糖和其他支鏈寡糖，這類物質(zhì)也被稱為 α-極限糊精，它們通過麥芽糖酶淀粉酶(MGAM)和蔗糖酶-異麥芽糖酶(SI)的作用進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為葡萄糖(Lee B et13)。根據(jù)機(jī)體對(duì)淀粉的消化速度不同，淀粉被分為快速消化淀粉(Rapidly Digestarch，SDS)、慢速消化淀粉(Slowly Digestible Starch，SDS)和抗性淀粉(Resistant St)�？焖傧矸郏冈诳谇缓托∧c中能被迅速消化吸收的那部分淀粉，這部分淀粉迅速分解為葡萄糖以提高血糖供應(yīng)能量，消化所需時(shí)間少于 20 min。慢速消化淀粉在小腸能被完全吸收，但是所需時(shí)間大約在 20 min～120 min，能續(xù)釋放葡萄糖，維持餐后血糖穩(wěn)定，有效防止胰島素抵抗現(xiàn)象的出現(xiàn)(Englyst HN e92)。抗性淀粉，歐洲聯(lián)合行動(dòng)(EURESTA)經(jīng)過討論分析，將食物中不能被小腸消化吸

煎盤梭菌XN-T4 16S rDctrophoresis of C. sartag測(cè)序長(zhǎng)度為 1432bpGCTGACCCTACCTTATTGCCAACTCTCACCGCGACATTCTCAGCCTACAATCCGCATCTTTTTGTACTATGATTTGACGTCATGCTCAACTTAATCCCAACATCTCACCCGAAGGGACTTTTCTTCGCGTTGCTCAATTCCTTTGAGTTTTGCGGCGGCAC

AGGTTGCCCACGTGTTACTCACCCGTCCGCCGCTAGGTTCATCCCCGAAGGGAATCTCCTCGCTCGACTGCATGGTAGCACGCGCC在 Genebank 數(shù)據(jù)庫(kù)中將所得序列進(jìn)行 BLAST 后，只有 Clostridium sartagoforme與 XN-T4 與同源性最高，16Sr DNA 序列 Query cover 為 100%，Identities 達(dá)到 99%，見圖 2-2。選擇同源性較高的幾個(gè)菌株，做系統(tǒng)進(jìn)化樹，結(jié)果見圖 2-3。因此可以認(rèn)為 XN-T4即為煎盤梭菌(Clostridium sartagoforme)。

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2750025