【摘要】：剛地弓形蟲是一種原生動物寄生蟲,也是常見的一種人畜共患病。根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查我們普遍認(rèn)為只感染溫血?jiǎng)游铩５?從遠(yuǎn)離貓糞污染的草食動物和鳥類的流行病學(xué)調(diào)查也顯示出高感染率。實(shí)驗(yàn)室前期研究顯示,媒介節(jié)肢動物蜱可作為弓形蟲在自然界的保存宿主。為全面了解自然條件下,蜱體感染弓形蟲的情況,本研究開展不同地點(diǎn)、不同宿主來源和不同種類的蜱體攜帶弓形蟲的分子檢測,并對陽性樣本中的弓形蟲基因進(jìn)行分型,以期為弓形蟲流行病學(xué)研究提供資料。(1)本研究對1275份蜱DNA樣品進(jìn)行定量PCR分子檢測,共發(fā)現(xiàn)88份為陽性樣本,陽性率為6.90%。其中檢測的吸血蜱樣本總數(shù)為848份,陽性樣本數(shù)為55份,陽性率為6.49%;檢測的未吸血蜱樣本總數(shù)為427份,陽性樣本數(shù)為33份,陽性率為7.73%。(2)在吸血蜱中,成蜱攜帶弓形蟲的陽性率為7.69%,若蜱攜帶弓形蟲的陽性率為1.90%;幼蜱攜帶弓形蟲的陽性率為0;在未吸血蜱中,成蜱攜帶弓形蟲的陽性率為7.96%,若蜱攜帶弓形蟲的陽性率為0;幼蜱攜帶弓形蟲的陽性率為14.29%。(3)不同蜱種的陽性率差異并不大。在吸血蜱中,長角血蜱攜帶弓形蟲的陽性率為8.05%;血紅扇頭蜱攜帶弓形蟲的陽性率為7.50%;鐮形扇頭蜱攜帶弓形蟲的陽性率為12.12%;微小牛蜱攜帶弓形蟲的陽性率為0;草原革蜱攜帶弓形蟲的陽性率為10%;褐黃血蜱攜帶弓形蟲的陽性率為3.07%;血蜱屬攜帶弓形蟲的陽性率為20%;扇頭屬攜帶弓形蟲的陽性率為5.22%以及未鑒定蜱種攜帶弓形蟲的陽性率為0。在未吸血蜱中,長角血蜱攜帶弓形蟲的陽性率為7.67%;血紅扇頭蜱攜帶弓形蟲的陽性率為8.7%;鐮形扇頭蜱攜帶弓形蟲的陽性率為8.33%;扇頭屬攜帶弓形蟲的陽性率為6.25%以及未鑒定蜱種攜帶弓形蟲的陽性率為0。(4)對所有通過定量PCR檢測顯示出攜帶弓形蟲的陽性樣本再用巢式PCR方法進(jìn)行檢測,均成功擴(kuò)增出目的條帶,將目的條帶進(jìn)行膠回收并送測序,測序所得結(jié)果與數(shù)據(jù)庫標(biāo)準(zhǔn)序列進(jìn)行比對,與弓形蟲529-bp重復(fù)序列片段相似程度高達(dá)99%以上。說明所有陽性樣本均攜帶弓形蟲。(5)采用巢式PCR方法對所有使用定量PCR方法檢測出攜帶弓形蟲的陽性樣本進(jìn)行基因分型,結(jié)果顯示所有陽性樣本均為弓形蟲ME49蟲株,即弓形蟲Ⅱ型弱毒株。(6)構(gòu)建吸血蜱陽性樣本與未吸血蜱陽性樣本數(shù)據(jù)進(jìn)化樹,并對數(shù)據(jù)進(jìn)行卡方檢驗(yàn)分析其顯著差異性。發(fā)現(xiàn)吸血蜱與未吸血蜱之間的差異不顯著。綜上所述,本研究發(fā)現(xiàn)自然界蜱感染弓形蟲較為普遍,蜱總體感染陽性率為6.90%;在檢測的6種硬蜱中,5種蜱均感染,不同蜱種的陽性率無顯著差異;在蜱的三個(gè)不同發(fā)育階段,相較而言成蜱感染率較高,吸血蜱與未吸血蜱之間的差異不顯著�；蚍中徒Y(jié)果顯示,所有陽性樣本均為弓形蟲Ⅱ型。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果我們可以發(fā)現(xiàn)蜱攜帶弓形蟲在流行病學(xué)中具有重要意義,人類弓形蟲感染需要高度重視。
【學(xué)位授予單位】：揚(yáng)州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：S852.7
【圖文】：

將吸血蜱和未吸血蜱根據(jù)不同發(fā)育階段進(jìn)行分類統(tǒng)計(jì)，鑒定出蜱種的包括長角血逡逑蜱、血紅扇頭蜱、鐮形扇頭蜱、微小牛蜱、草原革蜱以及褐黃血蜱，其余為鑒定為扇頭逡逑屬、血蜱屬以及未鑒定出種屬的蜱樣本（圖１－１）。逡逑ＩＳ３吸血蜱逡逑４００１逡逑Ｅ３末艱血蜱逡逑３00逡逑毅邐Ｕ逡逑掩邋２００邋Ｍ邋ｐｇ逡逑ｇ：邋ｐｉＭ邋Ｉ逡逑＊邋ｉ0．邋（Ｉ邋｜邋Ｉ逡逑0邋ＩＪ邋１邋目W邋ｗｉ邐ｒａ邋＿邋ｍ，邋ｃａ逡逑圖１－１不同蜱種采集到蜱樣本數(shù)逡逑Ｆｉｇ．邋１－１邋Ｎｕｍｂｅｒ邋ｏｆ邋ｔｉｃｋ邋ｓａｍｐｌｅｓ邋ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ邋ｂｙ邋ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ邋ｓｐｅｃｉｅｓ逡逑

２．４不同宿主蜱樣本數(shù)逡逑將吸血蜱樣本和未吸血蜱樣本根據(jù)不同宿主進(jìn)行分類匯總，宿主只要分為犬、牛羊逡逑以及游離蜱（圖１－２）。逡逑６００－｜逡逑0吸血蜱逡逑＿邐Ｅ３３未吸血蜱逡逑Ｉ邋４００＇邐Ｉ逡逑Ｊ邐Ｉ邐ｉ邐｜逡逑懾螊p邐Ｉ逡逑０邐ｍｍ邐＿＿邐Ｍ逡逑十邋＆邐＆邋香令逡逑圖１－２不同宿主采集到蜱樣本數(shù)逡逑Ｆｉｇ．邋１－２邋Ｎｕｍｂｅｒ邋ｏｆ邋ｔｉｃｋ邋ｓａｍｐｌｅｓ邋ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ邋ｆｒｏｍ邋ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ邋ｈｏｓｔｓ逡逑根據(jù)上圖可知：采集到宿主為犬的吸血蜱樣本有５００份，未吸血蜱樣本有１１８份；宿逡逑主為牛的吸血蜱樣本有４８份，而未吸血蜱沒有；宿主為羊的吸血蜱樣本為３００份，未吸逡逑血蜱沒有；另外采集到的游離蜱樣本有３０９份。逡逑２．５不同發(fā)育階段蜱樣本數(shù)逡逑將吸血蜱和未吸血蜱根據(jù)不同發(fā)育階段進(jìn)行分類匯總，蜱主要分為幼蜱、若蜱以及逡逑成蜱三個(gè)發(fā)育階段，采集到的吸血蜱均為叮咬在宿主體表，或腹部腫脹充盈的蜱。采集逡逑到的未吸血蜱主要是粘附在宿主皮毛而未叮咬在皮膚上，或者腹部干癟的游離蜱。（圖逡逑１－３）。逡逑

２．６蜱樣本ＤＮＡ瓊脂糖凝膠電泳檢測逡逑對定量ＰＣＲ后的擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳檢測，使用全自動凝膠成像分析系統(tǒng)逡逑Ｇｅｌ邋Ｄｏｃ邋ＥＺ對目的條帶進(jìn)行觀察（圖１－４）。逡逑Ｍ邋１邐２邐３邐４邐５邐６邐７邐８邐９邐１０邐１１邐１２邐１３邐１４邐１５邋１６逡逑■■■■逡逑ＩＩ—逡逑圖１－４蜱ＤＮＡ樣本瓊脂糖凝膠電泳圖逡逑Ｆｉｇ．邋１－４邋Ｔｉｃｋｓ邋ＤＮＡ邋ｓａｍｐｌｅｓ邋ｇｅｌ邋ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ邋ｏｆ邋ａｇａｒｏｓｅ邋ｇｅｌ逡逑

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 羅瀟;張莉;呂艷;李海龍;;我國弓形蟲病誤診現(xiàn)狀及其研究進(jìn)展[J];中國病原生物學(xué)雜志;2018年05期

2 李秀萍;薛�，�;王剛;金蓮軍;;青海省湖東種羊場羊弓形蟲病流行病學(xué)的調(diào)查[J];青海畜牧獸醫(yī)雜志;2017年01期

3 宋玉英;;家兔弓形蟲病的防治[J];中國養(yǎng)兔;2017年03期

4 胡小林;;羊弓形蟲病的診斷與防治[J];湖南畜牧獸醫(yī);2017年05期

5 何彥春;李珊;李旭蓉;錢振波;;甘肅省張掖市動物弓形蟲病血清學(xué)調(diào)查[J];中國動物檢疫;2016年03期

6 馬超鋒;;河南信陽地區(qū)羊弓形蟲病的血清流行病學(xué)調(diào)查[J];畜牧與獸醫(yī);2016年09期

7 馬超鋒;孫何云;張軼;饒兵;;河南信陽犬弓形蟲病血清流行病學(xué)調(diào)查[J];中國獸醫(yī)雜志;2016年09期

8 肖思宇;呂芳麗;;眼弓形蟲病的臨床研究進(jìn)展[J];熱帶醫(yī)學(xué)雜志;2014年10期

9 ;宣傳普及防治弓形蟲病 發(fā)展邊貿(mào)為民營企業(yè)點(diǎn)贊[J];中國周刊;2017年06期

10 楊兆民;;弓形蟲病對婦女兒童的危害及防治策略[J];家庭醫(yī)藥.就醫(yī)選藥;2016年08期

相關(guān)會議論文 前10條

1 薛書江;董雪艷;劉全;許應(yīng)天;;籠養(yǎng)黑熊弓形蟲病血清流行病學(xué)調(diào)查[A];中國動物學(xué)會寄生蟲學(xué)專業(yè)委員會第十屆全國寄生蟲學(xué)青年工作者學(xué)術(shù)研討會論文摘要集[C];2016年

2 黃建榮;;弓形蟲病診治進(jìn)展[A];全國寄生蟲病高峰論壇暨2016年浙江省熱帶病與寄生蟲病學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2016年

3 趙鵬;張守發(fā);賈立軍;于龍政;;吉林省長春地區(qū)牛弓形蟲病流行病學(xué)調(diào)查[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會獸醫(yī)寄生蟲學(xué)分會第十三次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2015年

4 王正松;聶浩;方瑞;肖犟;馮輝輝;涂攀;周艷琴;趙俊龍;;湖北省規(guī)模化豬場弓形蟲病動態(tài)流行病學(xué)調(diào)查[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會家畜寄生蟲學(xué)分會第六次代表大會暨第十次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2009年

5 劉文韜;路義鑫;鹿凌巖;穆永才;劉俊超;戴麗梅;宋銘忻;;黑龍江省部分地區(qū)牛弓形蟲病血清學(xué)調(diào)查[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會家畜寄生蟲學(xué)分會第六次代表大會暨第十次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2009年

6 李輝;張健;;一例犬弓形蟲病的診斷與治療[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會小動物醫(yī)學(xué)分會第四次學(xué)術(shù)研討會、中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會獸醫(yī)外科學(xué)分會第十六次學(xué)術(shù)研討會論文集（2）[C];2009年

7 李祥瑞;;弓形蟲病的流行的新趨勢[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會食品衛(wèi)生學(xué)分會第十一次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2010年

8 崔平;秦建華;方素芳;;河北省動物弓形蟲病流行病學(xué)調(diào)查[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會家畜寄生蟲學(xué)分會第五次代表大會暨第八次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2004年

9 朱引潔;吳文學(xué);賀國強(qiáng);;弓形蟲病的診斷現(xiàn)狀[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會家畜寄生蟲學(xué)分會第九次學(xué)術(shù)研討會論文摘要集[C];2006年

10 孫秀濤;謝銀杰;楊建發(fā);李樹榮;段綱;鄒豐才;;云南省部分地區(qū)家畜弓形蟲病血清流行病學(xué)調(diào)查[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會家畜寄生蟲學(xué)分會第六次代表大會暨第十次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2009年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 小郭;弓形蟲病危害不輕[N];中國商報(bào);2000年

2 記者 周俏春;專家敬告：“準(zhǔn)媽媽”慎養(yǎng)貓[N];新華每日電訊;2003年

3 戴培紅;北京友誼醫(yī)院探索治療弓形蟲病的新途徑[N];中國醫(yī)藥報(bào);2000年

4 杜長明;當(dāng)心寵物身上的“寵物”[N];中國醫(yī)藥報(bào);2001年

5 王志海 邵芹;犬弓形蟲病[N];中國畜牧報(bào);2003年

6 臨城縣畜牧局 李路民;豬得弓形蟲病 吃了貓的虧[N];河北科技報(bào);2002年

7 李水源;當(dāng)前豬場弓形蟲病的防控[N];中國畜牧獸醫(yī)報(bào);2013年

8 劉延年;家畜弓形蟲病的防治[N];中國畜牧水產(chǎn)報(bào);2001年

9 邢臺市獸醫(yī)院 邢蘭君 高社朝;豬高燒不退 沒準(zhǔn)是弓形蟲病[N];河北科技報(bào);2002年

10 本報(bào)記者 白軼南;弓形蟲病 危及胎兒健康[N];保健時(shí)報(bào);2005年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 王銘;弓形蟲移動聯(lián)結(jié)復(fù)合物成員棒狀體頸部蛋白4的功能研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2017年

2 聞慧琴;弓形蟲多態(tài)性毒力相關(guān)效應(yīng)分子GRA15_Ⅱ/ROP 16_(Ⅰ/Ⅲ)致小鼠不良妊娠結(jié)局的研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

3 劉卿;弓形蟲MIC6/7/8及GRA15互作蛋白的篩選、鑒定及GRA15對宿主細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的影響[D];湖南農(nóng)業(yè)大學(xué);2017年

4 韓亞莉;弓形蟲扁菱形蛋白酶4和組織蛋白酶C1的免疫學(xué)研究[D];山東大學(xué);2018年

5 徐穎;弓形蟲RH、PRU和VEG蟲株中ROP38功能的比較研究[D];中國農(nóng)業(yè)大學(xué);2018年

6 張曉;雌二醇和孕酮對弓形蟲侵染的影響及其機(jī)制[D];中國農(nóng)業(yè)大學(xué);2018年

7 司進(jìn);弓形蟲病免疫診斷及靶向生物治療的研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2005年

8 王洪法;弓形蟲ROP2基因在大腸桿菌和卡介苗中的表達(dá)及免疫原性的研究[D];吉林大學(xué);2005年

9 李華文;我國弓形蟲不同分離株、RH株及其突變體同源性和差異研究[D];中山大學(xué);2004年

10 劉世國;精液傳播弓形蟲的實(shí)驗(yàn)研究[D];華中科技大學(xué);2006年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 馮q

本文編號：2746888