【摘要】：金黃色葡萄球菌是一種重要的人獸共患病原菌,動物感染后可引起極高的發(fā)病率和死亡率。特別是多重耐藥性金黃色葡萄球菌MRSA的出現(xiàn)和流行后,使抗生素在抗細(xì)菌感染的治療上面臨極大的挑戰(zhàn),因此研發(fā)新的抗菌藥物替代品成為目前主要的研究方向。有研究發(fā)現(xiàn),中藥在治療細(xì)菌性感染方面療效顯著,同時其還具有延緩、逆轉(zhuǎn)細(xì)菌耐藥性的作用,我們前期研究發(fā)現(xiàn),赤芍水提物在抑制金葡菌增殖、降低細(xì)胞損傷方面具有很好的效果。本研究通過體外試驗(yàn)研究赤芍對細(xì)菌藥物敏感性和毒素分泌的影響,并通過體內(nèi)試驗(yàn)探討赤芍與抗生素聯(lián)用對MRSA ST-59感染小鼠肺炎的影響。赤芍水提物對金葡菌基因組學(xué)的分析結(jié)果顯示,赤芍水提物作用5h后,差異sRNA靶基因有所調(diào)整,且隨濃度的增加調(diào)整數(shù)量有所增加。聚類分析顯示這些基因參與增殖、細(xì)菌感染、細(xì)菌抗性、細(xì)胞周期等。信號通路分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)赤芍可以干擾金葡菌細(xì)胞周期及細(xì)菌抗性相關(guān)基因的表達(dá)。該結(jié)果表明赤芍水提物對金葡菌ATCC-29213多種生物學(xué)功能基因存在影響。采用微量稀釋法檢測金葡菌MRSA ST-59對不同抗生素敏感性的結(jié)果發(fā)現(xiàn),MRSA ST-59對林可霉素、阿奇霉素、氯霉素、利奈唑胺、鹽酸強(qiáng)力霉素、鹽酸環(huán)丙沙星具有耐藥性,當(dāng)與赤芍水提物聯(lián)合應(yīng)用后,發(fā)現(xiàn)金葡菌增殖活性隨著赤芍水提物濃度增高而顯著降低,與單獨(dú)應(yīng)用抗生素的對照組差異顯著。不同的是MRSA ST-59對抗生素利福平、慶大霉素表現(xiàn)敏感,給予抗生素后就可以抑制細(xì)菌的存活率,與赤芍水提物聯(lián)合應(yīng)用后,反而增加了細(xì)菌的存活率。該結(jié)果表明亞抑菌濃度的抗生素與亞抑菌濃度的赤芍水提物聯(lián)合用藥后,可提高M(jìn)RSA ST-59菌株對抗生素的敏感性。Western blot檢測亞抑菌濃度赤芍水提物與亞抑菌濃度抗生素聯(lián)用對MRSA ST-59毒力因子HLα、SEA、SEB、SPA表達(dá)的結(jié)果顯示,赤芍在亞抑菌濃度下與32μg/mL抗生素聯(lián)用對MRSA ST-59毒力因子HLα、SEA、SEB、SPA蛋白表達(dá)均具有很好的抑制作用,該結(jié)果表明亞抑菌濃度的赤芍水提物與亞抑菌濃度的抗生素聯(lián)用后,能顯著的降低MRSA ST-59毒力因子HLα、SEA、SEB、SPA的表達(dá)量,具有降低MRSA ST-59致病性的作用。通過鼻滴法感染小鼠建立小鼠肺炎感染模型后,將赤芍與抗生素林可霉素聯(lián)用,于給藥處理3、7日后對小鼠肺部做組織學(xué)檢測、肺菌含量檢測,并用Western blot檢測肺部金葡菌HLα、SEA、SEB、SPA的表達(dá)量。該結(jié)果表明亞抑菌濃度的赤芍水提物與亞抑菌濃度的林可霉素聯(lián)用,可顯著降低MRSA ST-59對小鼠的致病性,減輕小鼠肺組織的損傷,增強(qiáng)林可霉素的抗菌能力。以上研究結(jié)果提示,亞抑菌濃度的赤芍水提物與亞抑菌濃度的抗生素聯(lián)用后,可以明顯提高M(jìn)RSA ST-59對林可霉素、阿奇霉素、氯霉素、利奈唑胺、鹽酸強(qiáng)力霉素和鹽酸環(huán)丙沙星的敏感性,使抗生素在亞抑菌濃度下可以有效的起到抗菌作用,同時可降低MRSA ST-59毒素蛋白的表達(dá),降低該菌的致病力,減輕動物感染部位的組織損傷。
【學(xué)位授予單位】：北京農(nóng)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：S853.74
【圖文】：

圖 1-1 金黃色葡萄球菌及其所分泌的毒力因子Fig.1-1 Structure of S. aureus and virulence factors （Lowy FD, 1998, New England Journal of Medicine）1.1.2.1 腸毒素金葡菌腸毒素（Staphylococcus aureus Enterotoxins, SEs）主要是由耐熱核酸酶陽性的菌株和

圖 1-2 β-內(nèi)酰胺類抗生素結(jié)構(gòu)Fig.1-2 β-lactam antibiotic structureβ-內(nèi)酰胺類抗生素得益于其特別作用機(jī)制使得具備很強(qiáng)的抗菌能力。β-內(nèi)酰胺類的抗生素可以過抑制 D-丙氨酰- D-丙氨酸轉(zhuǎn)肽酶，阻礙細(xì)菌合成細(xì)胞壁[65]。細(xì)菌合成細(xì)胞壁離不開肽聚糖（Peptidoglycan），是其構(gòu)成了細(xì)胞壁中最堅(jiān)韌的三維立體框架，功能體現(xiàn)在鞏固結(jié)構(gòu)維持形態(tài)

7圖 1-3 青霉素作用機(jī)理Fig. 1-3 Penicillin mechanismPBPs 是一種細(xì)菌細(xì)胞壁合成的酶，其可以保持細(xì)菌的正常形態(tài)和功能。每種細(xì)菌細(xì)胞膜上

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6 黃孔威;傅乃武;;赤芍對實(shí)驗(yàn)?zāi)[瘤生長和轉(zhuǎn)移的影響[J];中國藥學(xué)雜志;1980年12期

7 孫U

本文編號：2746366