赤芍對MRSA ST-59菌株抗生素敏感性及致病性的影響

發(fā)布時間：2020-07-08 09:15

【摘要】：金黃色葡萄球菌是一種重要的人獸共患病原菌,動物感染后可引起極高的發(fā)病率和死亡率。特別是多重耐藥性金黃色葡萄球菌MRSA的出現(xiàn)和流行后,使抗生素在抗細菌感染的治療上面臨極大的挑戰(zhàn),因此研發(fā)新的抗菌藥物替代品成為目前主要的研究方向。有研究發(fā)現(xiàn),中藥在治療細菌性感染方面療效顯著,同時其還具有延緩、逆轉細菌耐藥性的作用,我們前期研究發(fā)現(xiàn),赤芍水提物在抑制金葡菌增殖、降低細胞損傷方面具有很好的效果。本研究通過體外試驗研究赤芍對細菌藥物敏感性和毒素分泌的影響,并通過體內試驗探討赤芍與抗生素聯(lián)用對MRSA ST-59感染小鼠肺炎的影響。赤芍水提物對金葡菌基因組學的分析結果顯示,赤芍水提物作用5h后,差異sRNA靶基因有所調整,且隨濃度的增加調整數(shù)量有所增加。聚類分析顯示這些基因參與增殖、細菌感染、細菌抗性、細胞周期等。信號通路分析結果發(fā)現(xiàn)赤芍可以干擾金葡菌細胞周期及細菌抗性相關基因的表達。該結果表明赤芍水提物對金葡菌ATCC-29213多種生物學功能基因存在影響。采用微量稀釋法檢測金葡菌MRSA ST-59對不同抗生素敏感性的結果發(fā)現(xiàn),MRSA ST-59對林可霉素、阿奇霉素、氯霉素、利奈唑胺、鹽酸強力霉素、鹽酸環(huán)丙沙星具有耐藥性,當與赤芍水提物聯(lián)合應用后,發(fā)現(xiàn)金葡菌增殖活性隨著赤芍水提物濃度增高而顯著降低,與單獨應用抗生素的對照組差異顯著。不同的是MRSA ST-59對抗生素利福平、慶大霉素表現(xiàn)敏感,給予抗生素后就可以抑制細菌的存活率,與赤芍水提物聯(lián)合應用后,反而增加了細菌的存活率。該結果表明亞抑菌濃度的抗生素與亞抑菌濃度的赤芍水提物聯(lián)合用藥后,可提高MRSA ST-59菌株對抗生素的敏感性。Western blot檢測亞抑菌濃度赤芍水提物與亞抑菌濃度抗生素聯(lián)用對MRSA ST-59毒力因子HLα、SEA、SEB、SPA表達的結果顯示,赤芍在亞抑菌濃度下與32μg/mL抗生素聯(lián)用對MRSA ST-59毒力因子HLα、SEA、SEB、SPA蛋白表達均具有很好的抑制作用,該結果表明亞抑菌濃度的赤芍水提物與亞抑菌濃度的抗生素聯(lián)用后,能顯著的降低MRSA ST-59毒力因子HLα、SEA、SEB、SPA的表達量,具有降低MRSA ST-59致病性的作用。通過鼻滴法感染小鼠建立小鼠肺炎感染模型后,將赤芍與抗生素林可霉素聯(lián)用,于給藥處理3、7日后對小鼠肺部做組織學檢測、肺菌含量檢測,并用Western blot檢測肺部金葡菌HLα、SEA、SEB、SPA的表達量。該結果表明亞抑菌濃度的赤芍水提物與亞抑菌濃度的林可霉素聯(lián)用,可顯著降低MRSA ST-59對小鼠的致病性,減輕小鼠肺組織的損傷,增強林可霉素的抗菌能力。以上研究結果提示,亞抑菌濃度的赤芍水提物與亞抑菌濃度的抗生素聯(lián)用后,可以明顯提高MRSA ST-59對林可霉素、阿奇霉素、氯霉素、利奈唑胺、鹽酸強力霉素和鹽酸環(huán)丙沙星的敏感性,使抗生素在亞抑菌濃度下可以有效的起到抗菌作用,同時可降低MRSA ST-59毒素蛋白的表達,降低該菌的致病力,減輕動物感染部位的組織損傷。
【學位授予單位】：北京農學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：S853.74
【圖文】：

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