【摘要】：馬的盅口亞科線蟲是馬屬動物大腸內(nèi)重要的寄生蟲,隸屬于圓線科。當蟲體大量寄生時會導致宿主貧血、被毛粗亂、消瘦、腹瀉,嚴重者甚至會造成死亡,給養(yǎng)馬業(yè)帶來較為嚴重的損失。該類線蟲以種類多、寄生數(shù)量大為特征,而這類線蟲的分類一直以來都有所爭議。目前,國內(nèi)外學者對盅口亞科線蟲的研究主要集中在形態(tài)學、流行病學及疾病防控等方面,對于該類線蟲的線粒體全基因組、遺傳進化、親緣關系的研究還是相對較少。因此,本研究的目的是對馬的五種盅口亞科線蟲(蝶狀盅口線蟲、碗形盅口線蟲、鼻狀杯環(huán)線蟲、異齒盆口線蟲、微小杯冠線蟲)進行形態(tài)學和分子生物學鑒定,然后擴增其線粒體基因組,對線粒體基因組進行比較分析和進化分析,構建進化樹,探討盅口亞科線蟲與其他線蟲的親緣關系。本研究中的蝶狀盅口線蟲、碗形盅口線蟲、鼻狀杯環(huán)線蟲、微小杯冠線蟲和異齒盆口線蟲形態(tài)學特征均與文獻資料描述相符,五種線蟲的核糖體內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(ITS)序列分別與Gen Bank上已發(fā)表相應線蟲的ITS序列比較,同源性分別為99.9%、99.6%、99.8%、99.7%和99.2%,通過形態(tài)學和分子生物學方法準確地鑒定了五種線蟲。擴增獲得蝶狀盅口線蟲、碗形盅口線蟲、鼻狀杯環(huán)線蟲、微小杯冠線蟲和異齒盆口線蟲的線粒體基因組全長分別為13822 bp、13838 bp、13846 bp、13826 bp和13817 bp,均包含了12個蛋白質(zhì)編碼基因,22個t RNA,2個r RNA和2個非編碼區(qū),所有基因均在同一條鏈上且轉(zhuǎn)錄方向相同。五種線蟲線粒體全基因組的AT含量明顯偏高,分別為75.70%(蝶狀盅口線蟲)、76.12%(碗形盅口線蟲)、74.74%(鼻狀杯環(huán)線蟲)、76.77%(微小杯冠線蟲)和74.65%(異齒盆口線蟲)。五種線蟲線粒體基因組核苷酸序列同源性變化為84.1~95.1%,其中碗形盅口線蟲和蝶狀盅口線蟲的同源性最高,蝶狀盅口線蟲和異齒盆口線蟲同源性最低,三種三齒屬線蟲與盅口亞科線蟲同源性高于同一亞科的馬圓線蟲。同時也發(fā)現(xiàn)目前圓線超科已獲得線粒體基因組的20種線蟲的基因排列順序完全相同。以串聯(lián)的12個蛋白質(zhì)編碼基因作為基因標記重新構建盅口亞科線蟲與其他線蟲之間的進化關系結果顯示三齒屬線蟲與盅口亞科線蟲的進化關系較近,而與同一亞科的馬圓線蟲親緣關系較遠,進一步驗證了三齒屬線蟲應歸屬于盅口亞科的假說。本研究首次獲得了蝶狀盅口線蟲、碗形盅口線蟲、鼻狀杯環(huán)線蟲、微小杯冠線蟲和異齒盆口線蟲的線粒體全基因,通過比較分析發(fā)現(xiàn)目前已獲得的20種圓線超科線蟲的線粒體全基因組基因排列完全一致,且基于線粒體基因組進一步驗證了三齒屬線蟲應歸屬于盅口亞科的假說。本研究不僅豐富了線蟲線粒體數(shù)據(jù)庫,也為今后圓線科線蟲系統(tǒng)發(fā)生學、分子分類學等研究提供了有效的基因標記。
【學位授予單位】：黑龍江八一農(nóng)墾大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：S852.7
【圖文】：

結 果3 結 果3.1 五種蟲體形態(tài)學鑒定取五種蟲體的雌、雄蟲若干在顯微鏡下分別從腹面、側面進行觀察，測量后拍照。蟲體的形態(tài)包括長度、有無背溝，口領和口囊形態(tài)、內(nèi)外葉冠數(shù)量、尾部特征等方面進了詳細的描述，見表 3-1，圖 3-1，蟲體各部分的測量參數(shù)見表 3-2。

3-2 蝶狀盅口線蟲，1：食道區(qū)，腹面觀；2：頭部側面觀；3：頭部腹面觀；4：雌蟲尾部側面觀；5：雄蟲尾部側面觀；6：雄蟲尾部腹面觀；標尺=0.1 mmig. 3-2 The morphological characteristics of Cy. pateratum, 1: Esophageal region, ventral view; 2: The headdorsoventral view; 3: The head, ventral view; 4: The tail of female, dorsoventral view; 5: The tail of male,dorsoventral view; 6: The tail of male, ventral view; Bar=0.1 mm

3-2 蝶狀盅口線蟲，1：食道區(qū)，腹面觀；2：頭部側面觀；3：頭部腹面觀；4：雌蟲尾部側面觀5：雄蟲尾部側面觀；6：雄蟲尾部腹面觀；標尺=0.1 mmig. 3-2 The morphological characteristics of Cy. pateratum, 1: Esophageal region, ventral view; 2: The hedorsoventral view; 3: The head, ventral view; 4: The tail of female, dorsoventral view; 5: The tail of maledorsoventral view; 6: The tail of male, ventral view; Bar=0.1 mm

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