【摘要】：黃體是卵泡排卵后形成的一種短暫的內(nèi)分泌腺,在正常生殖周期的調(diào)節(jié)和妊娠的維持中發(fā)揮著重要作用。在沒有懷孕的情況下,黃體經(jīng)歷退化或溶解的過程。有研究表明,在自發(fā)和誘導(dǎo)的黃體退化過程中,許多動(dòng)物均發(fā)生了細(xì)胞凋亡。所以,本試驗(yàn)通過檢測(cè)多種凋亡基因在豬黃體不同時(shí)期退化中的情況,為進(jìn)一步闡明在豬黃體退化的分子機(jī)制提供依據(jù)。本試驗(yàn)以豬黃體為研究對(duì)象,選取初期、中期、后期和白體四個(gè)時(shí)期的豬黃體,通過孕酮檢測(cè)、TUNEL染色和熒光定量PCR技術(shù)對(duì)細(xì)胞凋亡基因Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、TNF-α、Bcl-2及Bax在豬黃體各個(gè)時(shí)期的變化進(jìn)行了檢測(cè)。結(jié)果顯示:1.孕酮水平檢測(cè)結(jié)果:中期孕酮濃度達(dá)到頂峰顯著高于其它三個(gè)時(shí)期(p0.05),中期之后孕酮濃度呈下降趨勢(shì),后期和白體的濃度顯著低于初期(p0.05)。2.TUNEL染色結(jié)果:初期和中期呈陰性反應(yīng),幾乎觀察不到凋亡細(xì)胞,隨著豬黃體的退化,后期和白體呈陽(yáng)性反應(yīng),有較多的細(xì)胞凋亡出現(xiàn)。3.隨著豬黃體退化,Caspase-3表達(dá)量逐漸上升,在白體期達(dá)到最高值且顯著高于其它三個(gè)時(shí)期(p0.05),后期表達(dá)量顯著高于初期和中期(p0.05),初期與中期無顯著性差異(p0.05)。Caspase-8基因在各時(shí)期均有mRNA的表達(dá),隨著豬黃體逐漸退化,表達(dá)量呈上升趨勢(shì),初期和中期表達(dá)量差異不顯著(p0.05)。Caspase-9基因在初期和中期表達(dá)量無顯著性差異(p0.05),隨著豬黃體退化,表達(dá)量呈上升趨勢(shì),在白體期時(shí)表達(dá)量最高,且顯著高于其它三個(gè)時(shí)期(p0.05)。TNF-α基因在初期和中期表達(dá)量無顯著性差異(p0.05),隨著豬黃體逐漸退化,表達(dá)量呈上升趨勢(shì),白體期的表達(dá)量顯著高于后期(p0.05)。隨著豬黃體退化,Bcl-2/Bax的比率呈下降趨勢(shì),表明凋亡過多。本次實(shí)驗(yàn)可以得到這樣的結(jié)論:凋亡基因Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9,TNF-α初期與中期表達(dá)量無顯著性差異,隨著豬黃體逐漸退化,表達(dá)量逐漸上升,在白體期達(dá)到最高值且顯著高于其它三個(gè)時(shí)期,而隨著豬黃體退化,Bcl-2/Bax比率下降。說明以上基因可能參與了豬黃體凋亡。
【學(xué)位授予單位】：延邊大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：S828
【圖文】：

部有血塊；中期：直徑大約在１０－１４邋ｍｍ，黃體表面為淡粉色或粉紅色，有較多逡逑清晰可見的血ｔｉ’分布在表面；后期：宵徑大約在６－８邋ｍｍ，黃體表而為淡黃色，逡逑并且看不到明顯的血管；白體：直徑大約在２－４邋ｍｍ，表面為白色，如圖１所示。逡逑初期邐中期邐后期邐白體逡逑圖１不同時(shí)期的豬黃體逡逑Ｆｉｇｕｒｅ邋１邋ｃｏｒｐｕｓ邋ｌｕｔｅｕｍ邋ｏｆ邋ｐｉｇｓ邋ａｔ邋ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ邋ｓｔａｇｅｓ逡逑１０逡逑

第三章結(jié)果與分析逡逑３．邋１不同時(shí)期豬黃體孕酮濃度的檢測(cè)逡逑豬黃體孕酮濃度檢測(cè)結(jié)果如圖２，中期孕酮濃度達(dá)到頂峰顯著高于其它三個(gè)逡逑時(shí)期（ｐ＜０．０５），中期之后孕酮濃度呈下降趨勢(shì)，后期和白體的濃度顯著低于初逡逑期（ｐ＜０．０５），證明我們對(duì)各時(shí)期的劃分是準(zhǔn)確的。逡逑奶「邐ａ逡逑４０邐■邐Ｉ逡逑■■■逡逑５３５邐■逡逑Ｉ．．：＇：、．逡逑－３０邋．邋ｂ邐ａ邋．逡逑則邋２５邐．邐Ｔ邐ｆ；：，逡逑＾邋２0邐－邐ｒｎ邐ｈ逡逑ｌ１５－邐＿逡逑＿邋１０邐－逡逑＾邋５．邐ｍ邐ｃ邐ｃ逡逑。ｉ邐曑邐．逡逑初期邐中期邐后期邐白體逡逑圖２豬黃體不同時(shí)期孕酮濃度檢測(cè)圖逡逑Ｆｉｇｕｒｅ邋２邋ｐｒｏｇｅｓｔｅｒｏｎｅ邋ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ邋ｉｎ邋Ｃｏｒｐｕｓ邋ｌｕｔｅｕｍ邋ｏｆ邋ｐｉｇ邋ａｔ邋ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ邋ｓｔａｇｅｓ逡逑３．邋２不同時(shí)期豬黃體組織ＴＵＮＥＬ染色逡逑采川豬黃體初期、中期、后期和白體，進(jìn)行石蠟切片，通過ＴＵＮＥＬ染色后逡逑品微鏡觀察，結(jié)果如圖３所示：從圖中可以清晰的看出，初期和中期呈陰性反應(yīng)，逡逑幾乎觀察不到凋亡細(xì)胞，隨著豬黃體的退化，后期和白體呈陽(yáng)性反應(yīng)，有較多的逡逑細(xì)胞凋亡出現(xiàn)，說明細(xì)胞凋亡的數(shù)量與黃體退化呈現(xiàn)？定的相關(guān)性。逡逑Ｅ邐ｍ逡逑２００？ｍ逡逑＼１＞逡逑

３．邋２不同時(shí)期豬黃體組織ＴＵＮＥＬ染色逡逑采川豬黃體初期、中期、后期和白體，進(jìn)行石蠟切片，通過ＴＵＮＥＬ染色后逡逑品微鏡觀察，結(jié)果如圖３所示：從圖中可以清晰的看出，初期和中期呈陰性反應(yīng)，逡逑幾乎觀察不到凋亡細(xì)胞，隨著豬黃體的退化，后期和白體呈陽(yáng)性反應(yīng)，有較多的逡逑細(xì)胞凋亡出現(xiàn)，說明細(xì)胞凋亡的數(shù)量與黃體退化呈現(xiàn)？定的相關(guān)性。逡逑Ｅ邐ｍ逡逑２００？ｍ逡逑＼１＞逡逑

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

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相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

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相關(guān)碩士學(xué)位論文 前3條

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本文編號(hào)：2746010