發(fā)布時間：2020-07-08 03:04

【摘要】：黃體是卵泡排卵后形成的一種短暫的內(nèi)分泌腺,在正常生殖周期的調(diào)節(jié)和妊娠的維持中發(fā)揮著重要作用。在沒有懷孕的情況下,黃體經(jīng)歷退化或溶解的過程。有研究表明,在自發(fā)和誘導的黃體退化過程中,許多動物均發(fā)生了細胞凋亡。所以,本試驗通過檢測多種凋亡基因在豬黃體不同時期退化中的情況,為進一步闡明在豬黃體退化的分子機制提供依據(jù)。本試驗以豬黃體為研究對象,選取初期、中期、后期和白體四個時期的豬黃體,通過孕酮檢測、TUNEL染色和熒光定量PCR技術(shù)對細胞凋亡基因Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、TNF-α、Bcl-2及Bax在豬黃體各個時期的變化進行了檢測。結(jié)果顯示:1.孕酮水平檢測結(jié)果:中期孕酮濃度達到頂峰顯著高于其它三個時期(p0.05),中期之后孕酮濃度呈下降趨勢,后期和白體的濃度顯著低于初期(p0.05)。2.TUNEL染色結(jié)果:初期和中期呈陰性反應,幾乎觀察不到凋亡細胞,隨著豬黃體的退化,后期和白體呈陽性反應,有較多的細胞凋亡出現(xiàn)。3.隨著豬黃體退化,Caspase-3表達量逐漸上升,在白體期達到最高值且顯著高于其它三個時期(p0.05),后期表達量顯著高于初期和中期(p0.05),初期與中期無顯著性差異(p0.05)。Caspase-8基因在各時期均有mRNA的表達,隨著豬黃體逐漸退化,表達量呈上升趨勢,初期和中期表達量差異不顯著(p0.05)。Caspase-9基因在初期和中期表達量無顯著性差異(p0.05),隨著豬黃體退化,表達量呈上升趨勢,在白體期時表達量最高,且顯著高于其它三個時期(p0.05)。TNF-α基因在初期和中期表達量無顯著性差異(p0.05),隨著豬黃體逐漸退化,表達量呈上升趨勢,白體期的表達量顯著高于后期(p0.05)。隨著豬黃體退化,Bcl-2/Bax的比率呈下降趨勢,表明凋亡過多。本次實驗可以得到這樣的結(jié)論:凋亡基因Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9,TNF-α初期與中期表達量無顯著性差異,隨著豬黃體逐漸退化,表達量逐漸上升,在白體期達到最高值且顯著高于其它三個時期,而隨著豬黃體退化,Bcl-2/Bax比率下降。說明以上基因可能參與了豬黃體凋亡。
【學位授予單位】：延邊大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：S828
【圖文】：

部有血塊；中期：直徑大約在１０－１４邋ｍｍ，黃體表面為淡粉色或粉紅色，有較多逡逑清晰可見的血ｔｉ’分布在表面；后期：宵徑大約在６－８邋ｍｍ，黃體表而為淡黃色，逡逑并且看不到明顯的血管；白體：直徑大約在２－４邋ｍｍ，表面為白色，如圖１所示。逡逑初期邐中期邐后期邐白體逡逑圖１不同時期的豬黃體逡逑Ｆｉｇｕｒｅ邋１邋ｃｏｒｐｕｓ邋ｌｕｔｅｕｍ邋ｏｆ邋ｐｉｇｓ邋ａｔ邋ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ邋ｓｔａｇｅｓ逡逑１０逡逑

第三章結(jié)果與分析逡逑３．邋１不同時期豬黃體孕酮濃度的檢測逡逑豬黃體孕酮濃度檢測結(jié)果如圖２，中期孕酮濃度達到頂峰顯著高于其它三個逡逑時期（ｐ＜０．０５），中期之后孕酮濃度呈下降趨勢，后期和白體的濃度顯著低于初逡逑期（ｐ＜０．０５），證明我們對各時期的劃分是準確的。逡逑奶「邐ａ逡逑４０邐■邐Ｉ逡逑■■■逡逑５３５邐■逡逑Ｉ．．：＇：、．逡逑－３０邋．邋ｂ邐ａ邋．逡逑則邋２５邐．邐Ｔ邐ｆ；：，逡逑＾邋２0邐－邐ｒｎ邐ｈ逡逑ｌ１５－邐＿逡逑＿邋１０邐－逡逑＾邋５．邐ｍ邐ｃ邐ｃ逡逑。ｉ邐曑邐．逡逑初期邐中期邐后期邐白體逡逑圖２豬黃體不同時期孕酮濃度檢測圖逡逑Ｆｉｇｕｒｅ邋２邋ｐｒｏｇｅｓｔｅｒｏｎｅ邋ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ邋ｉｎ邋Ｃｏｒｐｕｓ邋ｌｕｔｅｕｍ邋ｏｆ邋ｐｉｇ邋ａｔ邋ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ邋ｓｔａｇｅｓ逡逑３．邋２不同時期豬黃體組織ＴＵＮＥＬ染色逡逑采川豬黃體初期、中期、后期和白體，進行石蠟切片，通過ＴＵＮＥＬ染色后逡逑品微鏡觀察，結(jié)果如圖３所示：從圖中可以清晰的看出，初期和中期呈陰性反應，逡逑幾乎觀察不到凋亡細胞，隨著豬黃體的退化，后期和白體呈陽性反應，有較多的逡逑細胞凋亡出現(xiàn)，說明細胞凋亡的數(shù)量與黃體退化呈現(xiàn)？定的相關(guān)性。逡逑Ｅ邐ｍ逡逑２００？ｍ逡逑＼１＞逡逑

３．邋２不同時期豬黃體組織ＴＵＮＥＬ染色逡逑采川豬黃體初期、中期、后期和白體，進行石蠟切片，通過ＴＵＮＥＬ染色后逡逑品微鏡觀察，結(jié)果如圖３所示：從圖中可以清晰的看出，初期和中期呈陰性反應，逡逑幾乎觀察不到凋亡細胞，隨著豬黃體的退化，后期和白體呈陽性反應，有較多的逡逑細胞凋亡出現(xiàn)，說明細胞凋亡的數(shù)量與黃體退化呈現(xiàn)？定的相關(guān)性。逡逑Ｅ邐ｍ逡逑２００？ｍ逡逑＼１＞逡逑

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前2條

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相關(guān)博士學位論文 前1條

1 張學敬;前列腺素和孕酮對小鼠黃體退化中Slit/Robo表達的調(diào)節(jié)及相關(guān)機理[D];中國農(nóng)業(yè)大學;2014年

相關(guān)碩士學位論文 前3條

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2 周少荷;丹參酮Ⅰ調(diào)控人肝癌7721細胞凋亡機制的研究[D];西北大學;2018年

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本文編號：2746010