【摘要】：赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)是一種由絲狀真菌產(chǎn)生的霉菌毒素,通過(guò)污染食物和飼料嚴(yán)重影響人類和動(dòng)物的健康,然而OTA對(duì)肉雞的腸毒性的作用機(jī)制尚不明確。硒(Selenium,Se)是人類和動(dòng)物必需的微量營(yíng)養(yǎng)素,在炎癥信號(hào)通路與抗氧化防御中起關(guān)鍵作用。富硒酵母(Selenium Rich Yeast,SeY)是一種富含Se元素的益生菌,有利于動(dòng)物小腸的吸收。SeY對(duì)OTA誘導(dǎo)雞的小腸毒性的影響尚無(wú)研究。本研究的目的確定SeY是否能減輕OTA誘導(dǎo)肉雞十二指腸、空腸、回腸的免疫與氧化損傷。本試驗(yàn)選取體重相近的1日齡肉仔雞80只,隨機(jī)分為四組,每組20只。Control組(0.5 mL生理鹽水+0.5 mL葵花籽油)、OTA組(50μg/kg.bw OTA+0.5mL葵花籽油)、SeY組(0.4 mg/kg SeY)、OTA+SeY組(50μg/kg.bw OTA+0.4 mg/kg SeY)連續(xù)灌胃21天,期間自由采食飲水。試驗(yàn)期間記錄肉雞的體重試驗(yàn)期間記錄肉雞的體重,試驗(yàn)結(jié)束后,收集十二指腸、空腸和回腸,通過(guò)HE染色檢測(cè)小腸絨毛長(zhǎng)度與隱窩深度,通過(guò)PAS染色檢測(cè)腸各段小腸的杯狀細(xì)胞數(shù)量,以試劑盒檢測(cè)腸組織抗氧化水平的變化,利用qPCR和Western Blot的方法檢測(cè)NF-κB和Nrf2信號(hào)通路相關(guān)基因mRNA及標(biāo)志蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果表明:(1)OTA可引起肉雞體重顯著降低,小腸各段的絨毛長(zhǎng)度顯著降低,V/C比值顯著降低,杯狀細(xì)胞數(shù)量顯著下降。(2)SeY能夠抑制OTA暴露導(dǎo)致的肉雞體重降低、絨毛長(zhǎng)度降低、V/C比值降低。(3)SeY能夠使杯狀細(xì)胞數(shù)量顯著升高,促進(jìn)肉雞小腸黏膜分泌。(3)SeY抑制OTA暴露導(dǎo)致的肉雞通過(guò)降低SOD活力、T-AOC含量、T-GSH含量水平,并提高M(jìn)DA含量水平,來(lái)改變十二指腸、空腸、回腸抗氧化狀態(tài)。(4)SeY通過(guò)激活NF-κB和Nrf2信號(hào)通路,引起Il-1β和TNF-α的mRNA水平上調(diào),Nrf2和HO-1的mRNA水平上調(diào),提高肉雞抗炎及抗氧化應(yīng)激的能力。NF-κB蛋白表達(dá)量降低及Nrf2蛋白的表達(dá)來(lái)升高,進(jìn)而提高機(jī)體抗炎反應(yīng)及其抗氧化應(yīng)激能力,增強(qiáng)OTA暴露引起的肉雞小腸組織的損傷。上述結(jié)果表明:SeY通過(guò)NF-κB與Nrf2信號(hào)通路的調(diào)節(jié),對(duì)OTA誘發(fā)的肉雞小腸機(jī)能產(chǎn)生保護(hù)作用,進(jìn)而緩解機(jī)體抗炎反應(yīng)及抗氧化應(yīng)激的能力。
【學(xué)位授予單位】：沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：S858.31
【圖文】：

3 結(jié)果3 結(jié)果3.1 肉雞體重的變化由圖 1（Fig. 1）可以看出，肉雞 OTA 中毒的第 14 d，與對(duì)照組相比，OTA組肉雞的體重呈極顯著下降（p<0.01），說(shuō)明 OTA 通過(guò)降低肉雞體重來(lái)增加對(duì)其機(jī)體的損害作用。與對(duì)照組相比，SeY 組肉雞體重極顯著增加（p<0.01），說(shuō)明 SeY 可以促進(jìn)肉雞的體重增加。與 OTA 組對(duì)比，OTA+SeY 組肉雞體重極顯著增加（p<0.01），說(shuō)明 SeY 能夠有效緩解 OTA 引起的體重降低；同樣，在肉雞 OTA 中毒的第 21 天，與對(duì)照組相比，OTA 組肉雞的體重呈極顯著下降（p<0.01），SeY 組肉雞體重極顯著增加（p<0.01）。與 OTA 組對(duì)比，OTA+SeY組肉雞體重極顯著增加（p<0.01）。

3.2.2 肉雞小腸絨毛高度與隱窩深度的測(cè)量由表 2（Table.2）可知，與對(duì)照組相比，OTA 組小腸的絨毛高度呈極顯著下降趨勢(shì)（p<0.01），OTA 能夠降低十二指腸的絨毛高度，從未減少小腸吸收營(yíng)養(yǎng)的表面積，降低小腸的屏障作用；與對(duì)照組相比，SeY 組十二指腸和空腸的絨毛高度呈極顯著升高（p<0.01），回腸的絨毛高度呈顯著升高（p<0.05），說(shuō)明 SeY可以顯著增加小腸絨毛高度，增加小腸的黏膜屏障作用；與 OTA 組相比，OTA+SeY 組的肉雞十二指腸，空腸和回腸絨毛高度呈極顯著升高（p<0.01），說(shuō)明 SeY 可以顯著拮抗 OTA 對(duì)小腸腸絨毛的損傷。與對(duì)照組相比，OTA 組十二指腸隱窩深度極顯著升高（p<0.01），回腸的隱窩深度顯著升高（p<0.05）,說(shuō)明 OTA 對(duì)十二指腸黏膜的損害最嚴(yán)重，其中十二指腸損害最顯著；與OTA組相比，SeY 組十二指腸隱窩深度呈顯著下降（p<0.05），空腸隱窩深度呈極顯著下降（p<0.01）；與 OTA 組相比，OTA+SeY 肉雞空腸的圖 2 肉雞小腸 HE 染色微觀圖（比例尺=500um）Fig. 2 Broiler small intestine HE staining micrograph（scale bar = 50μm）

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