【摘要】：赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)是一種由絲狀真菌產(chǎn)生的霉菌毒素,通過污染食物和飼料嚴(yán)重影響人類和動物的健康,然而OTA對肉雞的腸毒性的作用機制尚不明確。硒(Selenium,Se)是人類和動物必需的微量營養(yǎng)素,在炎癥信號通路與抗氧化防御中起關(guān)鍵作用。富硒酵母(Selenium Rich Yeast,SeY)是一種富含Se元素的益生菌,有利于動物小腸的吸收。SeY對OTA誘導(dǎo)雞的小腸毒性的影響尚無研究。本研究的目的確定SeY是否能減輕OTA誘導(dǎo)肉雞十二指腸、空腸、回腸的免疫與氧化損傷。本試驗選取體重相近的1日齡肉仔雞80只,隨機分為四組,每組20只。Control組(0.5 mL生理鹽水+0.5 mL葵花籽油)、OTA組(50μg/kg.bw OTA+0.5mL葵花籽油)、SeY組(0.4 mg/kg SeY)、OTA+SeY組(50μg/kg.bw OTA+0.4 mg/kg SeY)連續(xù)灌胃21天,期間自由采食飲水。試驗期間記錄肉雞的體重試驗期間記錄肉雞的體重,試驗結(jié)束后,收集十二指腸、空腸和回腸,通過HE染色檢測小腸絨毛長度與隱窩深度,通過PAS染色檢測腸各段小腸的杯狀細(xì)胞數(shù)量,以試劑盒檢測腸組織抗氧化水平的變化,利用qPCR和Western Blot的方法檢測NF-κB和Nrf2信號通路相關(guān)基因mRNA及標(biāo)志蛋白的表達水平。結(jié)果表明:(1)OTA可引起肉雞體重顯著降低,小腸各段的絨毛長度顯著降低,V/C比值顯著降低,杯狀細(xì)胞數(shù)量顯著下降。(2)SeY能夠抑制OTA暴露導(dǎo)致的肉雞體重降低、絨毛長度降低、V/C比值降低。(3)SeY能夠使杯狀細(xì)胞數(shù)量顯著升高,促進肉雞小腸黏膜分泌。(3)SeY抑制OTA暴露導(dǎo)致的肉雞通過降低SOD活力、T-AOC含量、T-GSH含量水平,并提高MDA含量水平,來改變十二指腸、空腸、回腸抗氧化狀態(tài)。(4)SeY通過激活NF-κB和Nrf2信號通路,引起Il-1β和TNF-α的mRNA水平上調(diào),Nrf2和HO-1的mRNA水平上調(diào),提高肉雞抗炎及抗氧化應(yīng)激的能力。NF-κB蛋白表達量降低及Nrf2蛋白的表達來升高,進而提高機體抗炎反應(yīng)及其抗氧化應(yīng)激能力,增強OTA暴露引起的肉雞小腸組織的損傷。上述結(jié)果表明:SeY通過NF-κB與Nrf2信號通路的調(diào)節(jié),對OTA誘發(fā)的肉雞小腸機能產(chǎn)生保護作用,進而緩解機體抗炎反應(yīng)及抗氧化應(yīng)激的能力。
【學(xué)位授予單位】：沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：S858.31
【圖文】：

3 結(jié)果3 結(jié)果3.1 肉雞體重的變化由圖 1（Fig. 1）可以看出，肉雞 OTA 中毒的第 14 d，與對照組相比，OTA組肉雞的體重呈極顯著下降（p<0.01），說明 OTA 通過降低肉雞體重來增加對其機體的損害作用。與對照組相比，SeY 組肉雞體重極顯著增加（p<0.01），說明 SeY 可以促進肉雞的體重增加。與 OTA 組對比，OTA+SeY 組肉雞體重極顯著增加（p<0.01），說明 SeY 能夠有效緩解 OTA 引起的體重降低；同樣，在肉雞 OTA 中毒的第 21 天，與對照組相比，OTA 組肉雞的體重呈極顯著下降（p<0.01），SeY 組肉雞體重極顯著增加（p<0.01）。與 OTA 組對比，OTA+SeY組肉雞體重極顯著增加（p<0.01）。

3.2.2 肉雞小腸絨毛高度與隱窩深度的測量由表 2（Table.2）可知，與對照組相比，OTA 組小腸的絨毛高度呈極顯著下降趨勢（p<0.01），OTA 能夠降低十二指腸的絨毛高度，從未減少小腸吸收營養(yǎng)的表面積，降低小腸的屏障作用；與對照組相比，SeY 組十二指腸和空腸的絨毛高度呈極顯著升高（p<0.01），回腸的絨毛高度呈顯著升高（p<0.05），說明 SeY可以顯著增加小腸絨毛高度，增加小腸的黏膜屏障作用；與 OTA 組相比，OTA+SeY 組的肉雞十二指腸，空腸和回腸絨毛高度呈極顯著升高（p<0.01），說明 SeY 可以顯著拮抗 OTA 對小腸腸絨毛的損傷。與對照組相比，OTA 組十二指腸隱窩深度極顯著升高（p<0.01），回腸的隱窩深度顯著升高（p<0.05）,說明 OTA 對十二指腸黏膜的損害最嚴(yán)重，其中十二指腸損害最顯著；與OTA組相比，SeY 組十二指腸隱窩深度呈顯著下降（p<0.05），空腸隱窩深度呈極顯著下降（p<0.01）；與 OTA 組相比，OTA+SeY 肉雞空腸的圖 2 肉雞小腸 HE 染色微觀圖（比例尺=500um）Fig. 2 Broiler small intestine HE staining micrograph（scale bar = 50μm）

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本文編號：2735845