【摘要】：近年來幼齡反芻動物免疫功能和營養(yǎng)調(diào)控的研究越來越受到重視,早期營養(yǎng)策略可作為調(diào)控幼齡反芻動物斷奶前后的生產(chǎn)性能和免疫功能的一種手段。本文通過對羔羊生長性能、養(yǎng)分消化的連續(xù)觀察,以及對瘤胃發(fā)酵功能、消化酶活性和微生物區(qū)系檢測,研究了代乳粉飼喂量和斷奶日齡對羔羊生長性能和營養(yǎng)物質(zhì)消化以及瘤胃功能的影響。進(jìn)一步通過轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)研究了早期營養(yǎng)調(diào)控對羔羊腸道基因表達(dá)的影響,闡述了代乳粉飼喂量影響羔羊生長并建立斷奶后生長優(yōu)勢的可能機(jī)理。此外,通過連續(xù)監(jiān)測斷奶后羔羊血液中激素水平、血細(xì)胞數(shù)量變化、急性期蛋白濃度和細(xì)胞因子基因表達(dá)量評估斷奶應(yīng)激對羔羊免疫功能的影響,并且進(jìn)一步通過研究羔羊腸道組織形態(tài)學(xué)、細(xì)胞因子的基因表達(dá)、粘膜和食糜中微生物區(qū)系變化以及宿主和微生物之間的關(guān)系,解釋了代乳粉飼喂量調(diào)控斷奶羔羊的生理和免疫功能的可能機(jī)理。本文主要研究結(jié)果如下:1.代乳粉飼喂量和斷奶日齡對羔羊生產(chǎn)性能和瘤胃功能的影響本研究選擇32只日齡一致初生重接近的湖羊公羔,隨機(jī)分為4組,分別接受4種處理:21 d斷奶2%平均體重代乳粉飼喂量(21dC,n=8);21 d斷奶4%平均體重代乳粉飼喂量(21dH,n=8);35 d斷奶2%平均體重代乳粉飼喂量(35dC,n=8);35 d斷奶4%平均體重代乳粉飼喂量(35dH,n=8)。結(jié)果表明,在50 d時,提高代乳粉飼喂量可降低中性洗滌纖維的消化率(P=0.001),其他營養(yǎng)物質(zhì)消化率無顯著差異(P0.05)。推遲到35 d斷奶有利于羔羊的快速生長,羔羊平均日增重(P=0.001)、末體重(P=0.013)和胴體重(P=0.008)有明顯優(yōu)勢。提高代乳粉飼喂量可促進(jìn)羔羊快速生長,顯著提高平均日增重(P=0.013)和胴體重(P=0.036),并可將生長發(fā)育的優(yōu)勢保持到50 d。2.代乳粉飼喂量對小腸形態(tài)學(xué)和功能的影響本研究選擇試驗1中生長優(yōu)勢明顯的35 d斷奶代乳粉飼喂量為2%或4%平均體重的2組羔羊(C,n=8;H,n=8),利用RNA-Seq技術(shù)對羔羊空腸的基因表達(dá)差異進(jìn)行研究,結(jié)合空腸組織形態(tài)學(xué)、消化酶活性對早期營養(yǎng)影響羔羊生長性能、養(yǎng)分消化的調(diào)控通路和機(jī)制做進(jìn)一步探討。結(jié)果表明,提高代乳粉飼喂量可以顯著提高羔羊空腸的乳糖酶(P0.001)、淀粉酶(P0.001)、脂肪酶(P=0.001)、胰蛋白酶(P=0.002)和糜蛋白酶(P0.001)活性,以及腸絨毛長度(P=0.001)和肌層厚度(P=0.007)。本研究共得到1179個差異表達(dá)基因,其中有882個基因顯著上調(diào)(P0.05),有297個基因顯著下調(diào)(P0.05)。GO富集分析結(jié)果表明,差異表達(dá)基因主要富集到了營養(yǎng)物質(zhì)吸收和代謝通路。提高代乳粉飼喂量可通過調(diào)控羔羊空腸組織中AHSG、ACAT1、BCKDHB、FADS1、INSIG1、PCK1等基因的表達(dá)量來促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的吸收轉(zhuǎn)運(yùn)和代謝過程,從而提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用和沉積。3.斷奶應(yīng)激影響幼齡反芻動物免疫功能的Meta分析本研究通過篩選共納入11篇文獻(xiàn),采用回歸分析解釋異質(zhì)性來源,敏感性分析評估結(jié)果穩(wěn)定性,使用漏斗圖評估發(fā)表偏倚。結(jié)果表明,血漿中皮質(zhì)醇濃度在斷奶后1~3 d(P=0.046)和11~14 d(P=0.001)顯著升高;血液中觸珠蛋白和纖維蛋白原濃度在斷奶后1~14 d顯著升高(P0.01)。敏感性分析表明所有結(jié)果穩(wěn)定可靠,漏斗圖分析表明皮質(zhì)醇、觸珠蛋白和纖維蛋白原僅存在少量的發(fā)表偏倚�？蓪⑵渥鳛闈撛诘纳飿�(biāo)志物應(yīng)用于今后反芻動物斷奶應(yīng)激的研究中。4.代乳粉飼喂量對斷奶后羔羊免疫功能的影響本研究試驗動物和飼養(yǎng)管理同試驗1,分別對21 d和35 d兩個斷奶日齡下,代乳粉飼喂量為2%或4%平均體重的4組羔羊,在斷奶后0、1、2、3、7、14和21 d的生理和免疫指標(biāo)進(jìn)行檢測分析。結(jié)果表明血漿中皮質(zhì)醇和TNFα濃度的升高可在3 d內(nèi)恢復(fù);CXCL8(P0.001)、IL1β(P0.001)和GRα(P0.001)等促炎性細(xì)胞因子的基因表達(dá)量在斷奶后21 d仍高于斷奶前水平,證明斷奶應(yīng)激可導(dǎo)致長期炎癥反應(yīng)。營養(yǎng)調(diào)控可使羔羊斷奶后呈現(xiàn)完全不同的免疫狀態(tài),代乳粉飼喂量由平均體重的2%提高到平均體重的4%可降低斷奶應(yīng)激引起的免疫應(yīng)答和炎癥反應(yīng),保護(hù)羔羊的健康和動物福利。5.代乳粉飼喂量對羔羊空腸組織炎癥反應(yīng)和微生物區(qū)系的影響本研究選擇試驗4中斷奶后免疫應(yīng)答差異最明顯的21 d斷奶代乳粉飼喂量為2%或4%平均體重的2組羔羊(C,n=8;H,n=8),通過研究其空腸組織形態(tài)學(xué)、促炎性細(xì)胞因子的基因表達(dá),以及空腸粘膜和食糜的微生物區(qū)系,對早期營養(yǎng)調(diào)控羔羊生理和免疫功能的作用機(jī)理進(jìn)行研究。結(jié)果表明,提高代乳粉飼喂量可降低空腸組織TLR4和TNFα的表達(dá)量(P0.01),減輕腸道炎癥反應(yīng)保護(hù)腸道組織結(jié)構(gòu)的完整性和屏障功能。提高代乳粉飼喂量可降低腸道中如:Plesiomonas(0.75%vs.0.18%,P=0.017)等致病微生物菌屬的相對豐度,調(diào)節(jié)腸道內(nèi)環(huán)境,影響微生物群落組成和優(yōu)勢菌群的穩(wěn)定定植,從而長期保護(hù)羔羊的腸道健康,進(jìn)而有益于其生理狀態(tài)和免疫功能。
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：S826.5
【圖文】：

州大學(xué)博士學(xué)位論文 代乳粉飼喂量對羔羊生產(chǎn)性能和免疫功能的影響及機(jī)理研究平 2 倍[30]吮礱鞫夏逃げ喚隹梢雜盞繼瞧ぶ始に胤置讜黽

本文編號：2734837