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某蛋雞場禽流感抗體監(jiān)測及5株H9亞型禽流感病毒的全基因序列分析

發(fā)布時(shí)間:2020-06-16 10:20
【摘要】:禽流感(Avian influenza,AI)是由禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)引起的一種禽類的感染和/或疾病綜合征。禽流感主要分為高致病性禽流感(Highly Pathogenic Avian Influenza,HPAI)和低致病性禽流感(Low Pathogenic Avian Influenza,LPAI),給養(yǎng)禽業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失,同時(shí)也威脅著人類的健康,尤其是H9N2亞型的AIV,不僅自身是主要的病原,還能作為其他血清型AIV的內(nèi)部基因的供體。因此,H9N2亞型的AIV備受流感研究工作者關(guān)注。疫苗防控仍是我國目前防控禽流感的最有效手段之一,合理的免疫程序是疫苗防控的關(guān)鍵,通過抗體檢測可以及時(shí)了解免疫情況,另一方面,對流行毒株進(jìn)行變異分析,將有助于了解疫苗與流行毒株的匹配程度。1.某蛋雞場禽流感疫苗的抗體效價(jià)監(jiān)測某蛋雞場的一批蛋雞,按照該雞場自定的免疫程序進(jìn)行免疫,每個(gè)月采血檢測禽流感疫苗的抗體效價(jià)。結(jié)果顯示,針對H5亞型(Re-6株、Re-7株、Re-8株)、H7亞型和H9亞型禽流感病毒的母源抗體分別為 8.0±1.781og2、6.28±1.68Iog2、8.34 ± 1.10log2、0log2和8.36±1.851og2。在接種各種疫苗后,針對H5亞型毒株的抗體效價(jià)均開始上升,平均在6 log2左右;針對H7亞型毒株的抗體上升迅速平穩(wěn),在雞群的整個(gè)飼養(yǎng)期間始終大于6 log2;針對H9亞型的毒株,在免疫30天后產(chǎn)生較高水平的抗體,維持了 2個(gè)月,隨后抗體效價(jià)開始下降,最低降到了 3.5 log2,接著在未加強(qiáng)免疫的情況下出現(xiàn)抗體上升的現(xiàn)象,分析原因可能是有野毒株的感染。在監(jiān)測過程中,群體的抗體效價(jià)水平數(shù)據(jù)的離散值波動(dòng)較小,說明疫苗的質(zhì)量良好,免疫的過程較為規(guī)范合理,誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生的抗體水平比較穩(wěn)定。2.5株H9亞型禽流感病毒的全基因序列分析共收集22份臨床病料,采用雞胚接種法分離病毒,通過血清學(xué)試驗(yàn)結(jié)合RT-PCR法進(jìn)行病毒的鑒定,結(jié)果顯示,共分離到5株H9亞型AIV。通過對AIV單一感染樣品進(jìn)行基因測序分析,共獲得5株H9N2亞型AIV全基因序列。血凝素(HA)基因核苷酸序列的遺傳進(jìn)化分析表明,5株H9亞型HA基因均屬于Y280亞系,是目前華東地區(qū)的優(yōu)勢流行株,295位多了一個(gè)潛在的糖基化位點(diǎn)。神經(jīng)氨酸酶(NA)基因的遺傳進(jìn)化分析表明,5株分離株的NA基因在遺傳進(jìn)化上都位于Dk/HK/Y280/97-like分支內(nèi),接近于華東地區(qū)的經(jīng)典疫苗株Ck/SH/F/98,在63-65位都缺失了 3個(gè)氨基酸殘基TEI,受此影響所有分離株在61位均缺少NIT這一糖基化位點(diǎn)。PB1、PA、NP和NS基因仍處于Ck/SH/F/98亞系分支,而PB2基因和M基因處于Qa/HK/G1/97亞系分支。總之,基因的整體情況變異不大。
【學(xué)位授予單位】:揚(yáng)州大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號】:S852.65
【圖文】:

抗體監(jiān)測


2結(jié)果逡逑2.1邋Re-6株抗體監(jiān)測結(jié)果逡逑如圖1所示,從平均m抗體水平來看,針對H5亞型禽流感病毒Re-6株的抗原來說,逡逑雛雞在首次免疫前,其體內(nèi)的母源抗體較高,HI的抗體效價(jià)達(dá)到8.0±1.781og2。35日齡逡逑時(shí)免疫H5亞型重組禽流感病毒三價(jià)滅活疫苗(Re-6株+Re-7株+Re-8株);41日齡檢測逡逑HI抗體效價(jià)為0.32邋±1.101og2,降低到了最低水平;90日齡加強(qiáng)免疫H5亞型重組禽流感逡逑病毒三價(jià)滅活疫苗(Re-6株+Re-7株+Re-8株),102日齡檢測HI抗體效價(jià)在8.34±邋1.561og2逡逑以上;133日齡達(dá)到最高值9.04邋±1.431og2;此后,抗體效價(jià)呈現(xiàn)下降趨勢,但是效價(jià)也邐,逡逑達(dá)到了邋6邋log2。之后,在241、272和433日齡免疫了三次重組禽流感病毒(H5+H7)二價(jià)逡逑滅活疫苗(H5的Re-8株和H7N9的Re-1株),由于Re-8疫苗株的交叉保護(hù)反應(yīng),Re-6逡逑株的HI效價(jià)又上升到了邋7邋bg2以上,之后又有緩慢下降的趨勢,但總體水平都在6邋l0g2逡逑以上

抗體監(jiān)測


Fig邋1邋The邋monitor邋of邋antibody邋levels邋from邋Re-6邋vaccine邋strain逡逑2.2邋Re-7株抗體監(jiān)測結(jié)果逡逑如圖2所示,從平均HI抗體水平來看,針對H5亞型禽流感病毒Re-7株的抗原來說,逡逑雛雞在首次免疫前,其體內(nèi)的母源抗體較高,HI的抗體效價(jià)在6.28土邋1.681og2。35日齡時(shí)逡逑免疫H5亞型重組禽流感病毒三價(jià)滅活疫苗(Re-6株+Re-7株+Re-8株);41日齡檢測HI逡逑抗體效價(jià)為1.9±1.301og2,降低到了最低水平;90日齡加強(qiáng)免疫H5亞型重組禽流感病毒逡逑三價(jià)滅活疫苗(Re-6株+Re-7株+Re-8株),102日齡檢測HI抗體效價(jià)為6.88±邋1.171og2,逡逑接近7.01og2;邋154日齡達(dá)到最高值6.98±1.531og2;此后,抗體效價(jià)呈現(xiàn)下降趨勢,效價(jià)逡逑降到了4.5±0.9710^2。之后,在241、272和433日齡免疫了三次重組禽流感病毒(1^5+只7)逡逑二價(jià)滅活疫苗(H5的Re-8株和H7N9的Re-1株),由于Re-8疫苗株的交叉保護(hù)反應(yīng),逡逑Re-7株的HI效價(jià)又上升到了邋6邋l0g2左右,維持了邋7個(gè)月之后又有緩慢下降的趨勢。逡逑從數(shù)據(jù)的離散值來看

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本文編號:2715918


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