【摘要】：超低溫儲存是豬精液長期保存的最實(shí)用方法,能夠提高育種效率,促進(jìn)豬模型動物的快速培育。通過國際交流,豬精液的超低溫保存能夠提高種群的生產(chǎn)力,控制重要的病原體的傳播,還可以進(jìn)行性別選擇~([1])。但是由于豬精液在超低溫儲藏和解凍過程中容易發(fā)生損傷,因此并與液態(tài)儲存體系達(dá)到相同的效果。目前已經(jīng)證明,豬精液在冷凍和解凍后會出現(xiàn)受精能力降低~([2])。精液冷凍和解凍的一個主要問題是對精子造成氧化損傷,誘發(fā)這種氧化損傷的主要原因是由于解凍精子的活性氧水平的增加。豬精子對活性氧敏感性的原因是由于細(xì)胞膜脂質(zhì)中具有相對較高的不飽和脂肪酸和豬精漿具有的相對較低的抗氧化能力。在豬精液超低溫保存和解凍過程中,產(chǎn)生的超氧化物自由基也能夠?qū)е戮幽ぶ兄惖倪^氧化反應(yīng),降低質(zhì)膜的完整性和導(dǎo)致精子凋亡的發(fā)生,從而使精子的活率和活力受到影響。為了改善解凍和冷凍過程造成的這種氧化損傷,可以在冷凍和解凍過程中添加抗氧化物。黃芪多糖(Astragalus polysaccharides,APS)是黃芪的主要成分,被廣泛應(yīng)用在免疫力低下和病毒的傳播感染。黃芪多糖主要是幫助消除超氧化物自由基和降低脂類的過氧化反應(yīng),所以能夠提高免疫調(diào)節(jié)作用。黃芪多糖已經(jīng)被證明具有抗氧化效果,也能夠降低在心肌細(xì)胞中由于自由基引起的脂類過氧化反應(yīng)造成的膜損傷~([3])。而且,在體外通過黃芪處理人的精子可以顯著提高精子活率和線粒體活性。據(jù)此,本研究通過在豬精液解凍過程中加入黃芪多糖評價是否能夠提高精子抗氧化能力,改善精子在體外受精(in vitro fertilization,IVF)時的受精能力,從而進(jìn)一步提高胚胎發(fā)育能力。我們發(fā)現(xiàn)在豬精液解凍過程中加入黃芪多糖能夠提高精子抗氧化能力,從而提高解凍精子體外受精和早期胚胎發(fā)育的能力,豬解凍精液中加入0.5mg/ml黃芪多糖在精子生存能力和精子運(yùn)動能力上相對于對照組沒有顯著影響,但能夠提高線粒體活力,提高精子穿透率進(jìn)而提高體外受精的總效率。而且,我們的結(jié)果表明,在豬精液解凍過程中補(bǔ)充添加黃芪多糖能夠降低活性氧(reactive oxygen species,ROS)的含量,同時提高超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和過氧化氫酶(catalase,CAT)的活性。最后,加入黃芪多糖相對于對照組顯著的提高了穿卵率和囊胚率。我們的結(jié)果表明,黃芪多糖能夠通過抗氧化作用,提高精子在體外受精的受精能力和早期胚胎發(fā)育能力,具有提高豬精子繁殖性能的實(shí)用潛能。
【圖文】：

冷凍儀；B:冷凍精液所使用冷凍曲線；C:冷凍的 0.5mL 凍精管；D:精液復(fù)蘇ezer; B: freezing curve used for frozen sperm; C: 0.5 mL straw; D: frozen sperm th圖 1 本研究中建立的豬精液冷凍-復(fù)蘇體系相關(guān)儀器及條件。he pig sperm frozen-thawed related instruments and conditions establstudy.

圖 2 APS 處理組與對照組精子受精情況。A：對照組；B：APS 處理組Figure 2 The effect of APS treatment on IVF. A: Control group; B: APS treatment gro
【學(xué)位授予單位】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：S828

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本文編號：2697364