【摘要】：毛囊是動物毛發(fā)發(fā)生的重要器官,其生長發(fā)育受到多種信號通路的調控,其中FGF家族及其受體FGFR家族對毛囊的生長發(fā)育有著重要影響。毛囊的形成起始于小鼠胚胎期第13天,出生后經過生長期、退化期及靜止期三個階段后進入下一個生長周期。研究表明,FGF家族中的許多成員對毛囊生長周期有一定的調控作用,但FGF21對毛囊的作用幾乎沒有研究,只有2017年張平等人發(fā)現(xiàn)FGF21誘導毛囊由生長期進入退行期,另有研究表明FGFR1可能會促進胚胎期小鼠皮膚細胞遷移,FGFR2基因缺失會引起小鼠皮膚發(fā)育不良,而FGF21及其受體FGFR1、FGFR2在毛囊形成期及出生后第一個生長周期的研究尚未見報道。本研究選取胚胎期13天至18天(E13-E18)小鼠及出生后1-25天小鼠背部皮膚,通過HE染色技術確定其對應的生長周期天數。采用免疫組織化學技術(Immunohistochemical Technique,IHC-P)對FGF21、FGFR1、FGFR2蛋白在小鼠背部皮膚的分布進行定位;通過實時熒光定量PCR(Real-time PCR,RT-PCR)和蛋白免疫印跡技術(Westernblot)從基因水平和蛋白水平對FGF21、FGFR1、FGFR2在小鼠背部皮膚的表達進行定量分析,探究FGF21、FGFR1、FGFR2在小鼠毛囊形成發(fā)育中的作用。實驗結果如下:毛囊形成期:(1)IHC-P實驗結果顯示:FGF21在E13天時表達于基底層細胞中,E14天表達于基底層和毛芽,E17、E18天主要表達在毛乳頭;FGFR1在E13天主要表達于表皮和基底層中,E14天表達于表皮和毛芽,E15、E16天表達在表皮和毛釘中,E17、E18天表達于表皮及毛基質中;FGFR2在E13至E18天主要表達在表皮和基底層。(2)RT-PCR及Westernblot實驗結果顯示:FGF21基因及蛋白的表達量在E13天、E14天和E17天較高;FGFR1基因及蛋白的表達量在整個胚胎期均有較高表達,但無規(guī)律性變化趨勢;FGFR2基因及蛋白的表達量在E13天至E15天呈現(xiàn)下降趨勢,E16天表達量又上升,而后降低。毛發(fā)生長第一個周期:(1)IHC-P實驗結果顯示:FGF21、FGFR1、FGFR2在出生后小鼠背部皮膚毛囊毛乳頭、毛基質、根鞘和皮脂腺處均有免疫陽性反應。FGF21主要在毛乳頭及外根鞘處表達,FGFR1主要在內根鞘中表達;FGFR2主要在毛乳頭及外根鞘中表達。(2)RT-PCR及Western blot實驗結果顯示:FGF21基因及蛋白的表達量從出生后第一天開始下降,在出生后第8天到達最低,之后表達量上升,在出生第23天達到最高;FGFRI與FGFR2的表達量趨勢相同,從1日齡開始下降,在8日齡時降至最低,從12日齡開始上升,在17日齡時達到最高,21日齡至23日齡又呈下降趨勢。結論:(1)在毛囊形成期,FGF21可能確定毛囊形成位置,同時影響毛乳頭的形成;FGFR1沒有明顯的作用;FGFR2在毛囊形成過程中有著重要作用。(2)在出生后第一個毛囊生長周期中,FGF21可能促進毛囊由退化期向靜止期過渡;FGFR1可能控制毛囊生長方向,促進毛囊結構凋亡,使毛囊由退化期進入靜止期;FGFR2可能誘導毛囊中成纖維細胞的生長分化,促進毛囊由退化期進入再生長期。
【圖文】：

Ｅ１３、Ｅ１４天主要表達在表皮和基底層，Ｅ１５天表達在表皮和毛芽，Ｅ１６天表逡逑達較弱，Ｅ１７、Ｅ１８天表達在表皮和未成熟毛囊細胞中，并且主要表達在細胞質中。ＦＧＦＲ２逡逑在Ｅ１３－Ｅ１５天呈現(xiàn)較強染色（

３．２出生后小鼠背部皮膚毛囊免疫組織化學結果逡逑３．２．１邋ＦＧＦ２１在出生后小鼠背部皮膚毛囊中的免疫組織化學結果逡逑免疫組織化學結果顯示，在１Q喠湫∈蟮拿橥酚校疲牽疲玻苯锨墾糶苑從Γㄍ跡保村澹粒�，辶x顯冢常窺喠湫∈蟮拿始巴飧蝕觳獾窖糶苑從Γㄍ跡保村澹攏模澹保層帕湫∈蟮耐飧義锨視醒糶苑從Γㄍ跡保村澹牛�，穷U始懊橥反Ψ從先酰�，１７Q喠浼埃玻卞澹疲繃湫∈蟮拿義先橥反τ薪锨墾糶苑從Γㄍ跡保村澹疲牽

本文編號：2693736