發(fā)布時間：2020-05-29 08:19

【摘要】：豬偽狂犬病是由豬偽狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)引起的豬的急性傳染病。能引起母豬繁殖障礙、仔豬大量死亡,長期以來嚴重危害我國養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展。尤其是在2012年以后,我國各地Bartha-K61疫苗免疫豬群大規(guī)模的爆發(fā)豬偽狂犬病或處于野毒感染狀態(tài),發(fā)病豬場種豬繁殖障礙、仔豬死亡率升高。本研究主要基于對2017年1月至2018年12月送檢病料和血清的檢測,兩年來共接收病原檢測樣品723份、血清檢測樣品8868份,根據(jù)豬群結(jié)構(gòu)、地區(qū)、季節(jié)等因素對樣品進行分類,通過病原學(xué)、血清學(xué)等方面系統(tǒng)的檢測,探究該病近兩年來在山東地區(qū)的流行情況,并對分離毒株的變異進化及毒力進行了檢測分析。病原學(xué)和血清學(xué)的流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示,在2017年度的723份臨床樣品中,經(jīng)PCR檢測82份病原陽性,陽性率為11.20%(82/732),其中第一、二、三、四季度的陽性率分別為17.48%、8.37%、10.06%和11.06%;在2018年度的557份臨床樣品中,經(jīng)PCR檢測42份為病原陽性,陽性率為7.54%(42/557),其中第一、二、三、四季度的陽性率分別為13.37%、2.87%、5.22%和8.33%,病原學(xué)檢測結(jié)果表明,該病發(fā)生具有明顯的季節(jié)性,冬春寒冷季節(jié)多發(fā),且從2017至2018年度該病在山東地區(qū)的陽性率總體呈下降趨勢。另外,調(diào)查發(fā)現(xiàn)豬場周圍及豬場內(nèi)部的其他疑似偽狂犬病死亡動物(狗、兔、貓、牛、羊),經(jīng)PCR檢測多為陰性,說明其他動物偽狂犬病的發(fā)病率極低。PRVgE抗體檢測結(jié)果顯示,在8668份血清中,陽性的4558份,占52.58%。經(jīng)分群統(tǒng)計發(fā)現(xiàn),2017年后備母豬的抗體陽性率最低為40.91%,這與豬場重視留種檢測有關(guān),2018年公豬的抗體陽性率最高為69.69%,經(jīng)產(chǎn)母豬抗體陽性率與生產(chǎn)胎次成正比。陽性病料中分離到16株P(guān)RV,有關(guān)基因檢測表明,本研究分離的毒株和國內(nèi)毒株有比較高的同源性,在遺傳進化關(guān)系上屬于同一分支,明顯區(qū)別于歐美參考株。所有的國內(nèi)流行毒株(包含本研究分離株)的在gE糖蛋白的疏水殘基和親水殘基上有大量的氨基酸突變位點,而且互相之間在親水殘基上都發(fā)生了較多不同的氨基酸位點突變。在gB基因的優(yōu)勢抗原表位上,國內(nèi)流行毒株和歐美參考株依然有著大量的相同的氨基酸位點突變,而且國內(nèi)流行毒株以TA1和TA2變異最為明顯。TK基因的氨基酸位點突變較少,這與其基因的高度保守性有關(guān),遺傳進化關(guān)系上沒有顯著特點。對本研究分離的兩個毒株(濟南株-JNP、泰安株-TA1)進行體內(nèi)外毒力檢測試驗結(jié)果顯示,JNP株TCID_(50)和LD_(50)分別為10~(7.71)TCID_(50)/mL和10~(5.07)LD_(50)/mL,TA1株TCID_(50)和LD_(50)分別為10~(7.23)TCID_(50)/mL和10~(5.01)LD_(50)/mL,兩毒株都有較強致病力互相之間未見明顯差異。病毒分布情況顯示小鼠的腦內(nèi)含量最高,肝臟次之,TA1株各器官含量明顯高于JNP株。因此我們可以得出豬偽狂犬病在山東地區(qū)存在以下幾種特征:(1)在規(guī)�；i場中廣泛流行性且具有較高的感染率;(2)分離毒株與國內(nèi)流行毒株有較高的同源性,但有些毒株抗原表位發(fā)生突變;(3)流行毒株具有較強的致病性。因此,在我國豬場的偽狂犬病防控工作中,研究出符合流行毒株抗原特征的高效疫苗和制定合理的豬場免疫程序及嚴謹?shù)膫慰袢艋桨钙仍诿冀蕖?br>【圖文】：

圖 1 臨床病例剖檢病變Figure 1 pathological changes in clinical cases：A：腦膜充血、出血；B：扁桃體充血紅腫，表面可見灰白色壞死灶；C:脾臟布滿灰白色壞死灶；D：肝臟，布滿灰白色壞死灶；E：腎臟皮質(zhì)部可見針尖大出血點及灰白色壞死點；F：腎臟表面見灰白色壞死點；G：密布灰白色壞死灶；H：肺臟暗紅色充血、腫脹，，并可見灰白色壞死灶。ote:A: meningeal congestion, bleeding; B: tonsillar grayish white necrotic foci; C: spleen with gray-white necrotic fociepatic congestion, covered with gray-white necrotic foci; E: kidney with gray-white necrotic spots; F: kidney with ghite necrotic spots; G: grayish white necrotic foci in the liver; H: grayish white necrotic foci in the lungs.3.2病理組織學(xué)觀察結(jié)果可見到箭頭所指的噬神經(jīng)元現(xiàn)象，大腦血管周圍有大量淋巴細胞和單核細胞浸現(xiàn)“腦血管袖套現(xiàn)象”（圖 2A 和圖 2B）；扁桃體的壞死灶內(nèi)淋巴細胞核壞死崩

免疫組化染色見壞死細胞的核內(nèi)有棕褐色的病毒粒子（圖2C）；脾臟出血、并有大量淋巴細胞壞死，壞死細胞核內(nèi)有紅染包涵體（圖 2D），免疫組化染色見壞死的細胞核內(nèi)有棕褐色的病毒粒子（圖 2E 和圖 2F）。
【學(xué)位授予單位】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：S858.28

【參考文獻】

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本文編號：2686666