【摘要】:豬偽狂犬病是由豬偽狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)引起的豬的急性傳染病。能引起母豬繁殖障礙、仔豬大量死亡,長(zhǎng)期以來(lái)嚴(yán)重危害我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展。尤其是在2012年以后,我國(guó)各地Bartha-K61疫苗免疫豬群大規(guī)模的爆發(fā)豬偽狂犬病或處于野毒感染狀態(tài),發(fā)病豬場(chǎng)種豬繁殖障礙、仔豬死亡率升高。本研究主要基于對(duì)2017年1月至2018年12月送檢病料和血清的檢測(cè),兩年來(lái)共接收病原檢測(cè)樣品723份、血清檢測(cè)樣品8868份,根據(jù)豬群結(jié)構(gòu)、地區(qū)、季節(jié)等因素對(duì)樣品進(jìn)行分類,通過(guò)病原學(xué)、血清學(xué)等方面系統(tǒng)的檢測(cè),探究該病近兩年來(lái)在山東地區(qū)的流行情況,并對(duì)分離毒株的變異進(jìn)化及毒力進(jìn)行了檢測(cè)分析。病原學(xué)和血清學(xué)的流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示,在2017年度的723份臨床樣品中,經(jīng)PCR檢測(cè)82份病原陽(yáng)性,陽(yáng)性率為11.20%(82/732),其中第一、二、三、四季度的陽(yáng)性率分別為17.48%、8.37%、10.06%和11.06%;在2018年度的557份臨床樣品中,經(jīng)PCR檢測(cè)42份為病原陽(yáng)性,陽(yáng)性率為7.54%(42/557),其中第一、二、三、四季度的陽(yáng)性率分別為13.37%、2.87%、5.22%和8.33%,病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果表明,該病發(fā)生具有明顯的季節(jié)性,冬春寒冷季節(jié)多發(fā),且從2017至2018年度該病在山東地區(qū)的陽(yáng)性率總體呈下降趨勢(shì)。另外,調(diào)查發(fā)現(xiàn)豬場(chǎng)周圍及豬場(chǎng)內(nèi)部的其他疑似偽狂犬病死亡動(dòng)物(狗、兔、貓、牛、羊),經(jīng)PCR檢測(cè)多為陰性,說(shuō)明其他動(dòng)物偽狂犬病的發(fā)病率極低。PRVgE抗體檢測(cè)結(jié)果顯示,在8668份血清中,陽(yáng)性的4558份,占52.58%。經(jīng)分群統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn),2017年后備母豬的抗體陽(yáng)性率最低為40.91%,這與豬場(chǎng)重視留種檢測(cè)有關(guān),2018年公豬的抗體陽(yáng)性率最高為69.69%,經(jīng)產(chǎn)母豬抗體陽(yáng)性率與生產(chǎn)胎次成正比。陽(yáng)性病料中分離到16株P(guān)RV,有關(guān)基因檢測(cè)表明,本研究分離的毒株和國(guó)內(nèi)毒株有比較高的同源性,在遺傳進(jìn)化關(guān)系上屬于同一分支,明顯區(qū)別于歐美參考株。所有的國(guó)內(nèi)流行毒株(包含本研究分離株)的在gE糖蛋白的疏水殘基和親水殘基上有大量的氨基酸突變位點(diǎn),而且互相之間在親水殘基上都發(fā)生了較多不同的氨基酸位點(diǎn)突變。在gB基因的優(yōu)勢(shì)抗原表位上,國(guó)內(nèi)流行毒株和歐美參考株依然有著大量的相同的氨基酸位點(diǎn)突變,而且國(guó)內(nèi)流行毒株以TA1和TA2變異最為明顯。TK基因的氨基酸位點(diǎn)突變較少,這與其基因的高度保守性有關(guān),遺傳進(jìn)化關(guān)系上沒(méi)有顯著特點(diǎn)。對(duì)本研究分離的兩個(gè)毒株(濟(jì)南株-JNP、泰安株-TA1)進(jìn)行體內(nèi)外毒力檢測(cè)試驗(yàn)結(jié)果顯示,JNP株TCID_(50)和LD_(50)分別為10~(7.71)TCID_(50)/mL和10~(5.07)LD_(50)/mL,TA1株TCID_(50)和LD_(50)分別為10~(7.23)TCID_(50)/mL和10~(5.01)LD_(50)/mL,兩毒株都有較強(qiáng)致病力互相之間未見(jiàn)明顯差異。病毒分布情況顯示小鼠的腦內(nèi)含量最高,肝臟次之,TA1株各器官含量明顯高于JNP株。因此我們可以得出豬偽狂犬病在山東地區(qū)存在以下幾種特征:(1)在規(guī);i場(chǎng)中廣泛流行性且具有較高的感染率;(2)分離毒株與國(guó)內(nèi)流行毒株有較高的同源性,但有些毒株抗原表位發(fā)生突變;(3)流行毒株具有較強(qiáng)的致病性。因此,在我國(guó)豬場(chǎng)的偽狂犬病防控工作中,研究出符合流行毒株抗原特征的高效疫苗和制定合理的豬場(chǎng)免疫程序及嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膫慰袢艋桨钙仍诿冀蕖?br>
【圖文】:
圖 1 臨床病例剖檢病變Figure 1 pathological changes in clinical cases:A:腦膜充血、出血;B:扁桃體充血紅腫,表面可見(jiàn)灰白色壞死灶;C:脾臟布滿灰白色壞死灶;D:肝臟,布滿灰白色壞死灶;E:腎臟皮質(zhì)部可見(jiàn)針尖大出血點(diǎn)及灰白色壞死點(diǎn);F:腎臟表面見(jiàn)灰白色壞死點(diǎn);G:密布灰白色壞死灶;H:肺臟暗紅色充血、腫脹,,并可見(jiàn)灰白色壞死灶。ote:A: meningeal congestion, bleeding; B: tonsillar grayish white necrotic foci; C: spleen with gray-white necrotic fociepatic congestion, covered with gray-white necrotic foci; E: kidney with gray-white necrotic spots; F: kidney with ghite necrotic spots; G: grayish white necrotic foci in the liver; H: grayish white necrotic foci in the lungs.3.2病理組織學(xué)觀察結(jié)果可見(jiàn)到箭頭所指的噬神經(jīng)元現(xiàn)象,大腦血管周圍有大量淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞浸現(xiàn)“腦血管袖套現(xiàn)象”(圖 2A 和圖 2B);扁桃體的壞死灶內(nèi)淋巴細(xì)胞核壞死崩

免疫組化染色見(jiàn)壞死細(xì)胞的核內(nèi)有棕褐色的病毒粒子(圖2C);脾臟出血、并有大量淋巴細(xì)胞壞死,壞死細(xì)胞核內(nèi)有紅染包涵體(圖 2D),免疫組化染色見(jiàn)壞死的細(xì)胞核內(nèi)有棕褐色的病毒粒子(圖 2E 和圖 2F)。
【學(xué)位授予單位】:山東農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:S858.28
【參考文獻(xiàn)】
相關(guān)期刊論文 前10條
1 何啟蓋;童光志;楊漢春;張桂紅;姜平;張永光;張改平;伍少欽;章洪皸;;豬偽狂犬病流行病學(xué)特征、凈化技術(shù)及其應(yīng)用示范[J];中國(guó)畜牧雜志;2015年24期
2 竇立靜;齊向濤;;新疆北疆豬偽狂犬病毒野毒的PCR檢測(cè)[J];草食家畜;2015年05期
3 劉曜綜;芮萍;王秋悅;馬芮;楊彩然;劉謝榮;吳建華;馬增軍;;豬流行偽狂犬病毒gE基因檢測(cè)及生物信息學(xué)分析[J];中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào);2015年04期
4 廖飛;黃增榮;趙孝木;莫心虎;吳通奎;姜艷;黃功明;楊先富;;豬偽狂犬病的致病機(jī)制與防控措施[J];貴州畜牧獸醫(yī);2015年01期
5 楊文萍;顧真慶;孫海鳳;董靜;侯成才;白娟;姜平;;偽狂犬病毒流行毒株的抗原性和血清中和特性分析[J];畜牧與獸醫(yī);2014年10期
6 王獻(xiàn)偉;王獻(xiàn)偉;;豬偽狂犬疫苗免疫效果追蹤[J];當(dāng)代畜牧;2014年03期
7 童武;張青占;鄭浩;劉飛;姜一峰;單同領(lǐng);周艷君;童光志;;免疫后發(fā)病仔豬中偽狂犬病毒的分離和鑒定[J];中國(guó)動(dòng)物傳染病學(xué)報(bào);2013年03期
8 彭金美;安同慶;趙鴻遠(yuǎn);劉益民;陳家锃;冷超糧;孫艷;常丹;田志軍;童光志;;豬偽狂犬病病毒新流行株的分離鑒定及抗原差異性分析[J];中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào);2013年01期
9 黃海彬;程安春;汪銘書(shū);;皰疹病毒糖蛋白C的研究進(jìn)展[J];中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào);2010年02期
10 郭廣君;呂素芳;沈志強(qiáng);管宇;肖躍強(qiáng);曲光剛;張松林;魏鳳;畢研麗;;山東省分離強(qiáng)毒株豬偽狂犬病病毒SA株TK基因結(jié)構(gòu)與進(jìn)化分析[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);2009年15期
本文編號(hào):
2686666
本文鏈接:http://sikaile.net/yixuelunwen/dongwuyixue/2686666.html