【摘要】：本研究以3~4歲成年關(guān)中驢為研究對象,旨在研究其胃腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)、消化酶活性、微生物菌群多樣性及其盲腸液體外發(fā)酵性能。以期為驢的營養(yǎng)調(diào)控及飼料配制提供理論依據(jù)。試驗總共包括三部分內(nèi)容:試驗一驢胃腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)及功能研究。選用4頭體重基本一致(平均體重為192.85±8.87 kg)的成年關(guān)中驢,屠宰后按解剖學(xué)特征快速分離胃、十二指腸、空腸、回腸、盲腸、結(jié)腸和直腸。分別測定重量、相對重(%活體重及%總胃腸重量)、內(nèi)容物重量和內(nèi)容物相對重(%活體重及%總胃腸內(nèi)容物重),觀察組織形態(tài),測定消化酶活性及VFA含量。結(jié)果表明:(1)胃腸道形態(tài)結(jié)構(gòu):驢盲腸重量、相對重、內(nèi)容物重及內(nèi)容物相對重均顯著高于胃及其余各腸段(P0.05),十二指腸相對重顯著低于空腸和回腸(P0.05),結(jié)腸內(nèi)容物及內(nèi)容物相對重均顯著高于直腸(P0.05);驢胃腸道組織形態(tài)中,空腸絨毛高度顯著低于十二指腸、回腸(P0.05),各部位絨毛寬度無顯著性差異(P0.05),隱窩深度為空腸、回腸顯著低于十二指腸(P0.05),絨毛高度/隱窩深度(V/C)值為回腸顯著高于十二指腸和空腸(P0.05),回腸黏膜厚度顯著高于其他各腸段(P0.05),結(jié)腸、直腸黏膜厚度顯著低于其他各部位(P0.05),黏膜肌層厚度則是胃顯著高于各腸段(P0.05)。(2)胃腸道消化酶活性:回腸胰蛋白酶顯著低于十二指腸、空腸(P0.05),十二指腸糜蛋白酶顯著高于空腸、回腸(P0.05),空腸淀粉酶顯著高于十二指腸(P0.05),空腸脂肪酶顯著高于胃(P0.05);驢大腸各段各纖維素降解酶活性均為盲腸最高,且顯著高于結(jié)腸、直腸(P0.05),且結(jié)腸木聚糖酶和羧甲基纖維素酶顯著高于直腸(P0.05)。(3)發(fā)酵參數(shù):除結(jié)腸外,驢腸道內(nèi)容物pH隨腸道后沿呈逐漸增高趨勢,差異不顯著(P0.05),但腸道各段顯著高于胃(P0.05);乙酸、丙酸、丁酸及總揮發(fā)性脂肪酸(TVFA)均為結(jié)腸最高,且大腸各段顯著高于胃及小腸各段(P0.05)�？梢婓H對日糧中蛋白質(zhì)的消化主要在小腸前段完成,淀粉和脂肪的消化主要以空腸為主,回腸對養(yǎng)分的吸收能力可能高于胃、十二指腸及空腸;纖維素等碳水化合物的酵解主要在盲腸與結(jié)腸中進行。試驗二驢胃腸道微生物組成及多樣性研究。采用Illumina MiSeq高通量測序技術(shù)檢測驢胃腸道各部位內(nèi)容物中微生物區(qū)系。試驗結(jié)果為:共獲得1152881條有效序列,平均每個樣品所得有效序列數(shù)為42699條,平均長度為419 bp。共獲得927個OTUs。所有樣品共注釋了16個門,29個綱,47個目、95個科和233個屬。在門水平下,驢胃腸道細菌來自15個菌門,其中厚壁菌門(Firmicutes)為胃腸道各段的第一優(yōu)勢菌門,變形菌(Proteobacteria)是胃和小腸各段的第二大優(yōu)勢菌門,而大腸各段的第二大優(yōu)勢菌群為擬桿菌門(Bacteroidetes);結(jié)腸、直腸菌群豐度指數(shù)ACE和Chao1顯著高于胃及其余各腸段(P0.05),菌群多樣性指數(shù)Simpson和Shannon在胃和小腸各段間均無顯著性差異(P0.05),大腸各段Simpson指數(shù)顯著低于胃和小腸各段(P0.05),而大腸各段Shannon指數(shù)顯著高于胃和小腸各段(P0.05),即大腸微生物多樣性及豐度高于胃和小腸;經(jīng)PCoA和UPGMA分析發(fā)現(xiàn)驢胃腸道細菌可聚類為兩大簇,胃和小腸為一簇,大腸為一簇。驢胃腸道微生物在二級功能分類水平上共獲得了39個KEGG功能簇,其中占主導(dǎo)作用的功能有碳水化合物代謝、Global and overview maps、氨基酸代謝、膜運輸、能量代謝等與代謝及調(diào)節(jié)相關(guān)基因。試驗三驢盲腸液體外發(fā)酵性能研究。本試驗旨在研究燕麥干草與苜蓿不同比例組合對驢盲腸液體外發(fā)酵的影響,為肉驢養(yǎng)殖中粗飼料的科學(xué)利用提供理論依據(jù)。將燕麥干草和苜蓿按干物質(zhì)比為80:20、60:40、40:60和20:80分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組,通過體外產(chǎn)氣法與人工體外持續(xù)發(fā)酵裝置培養(yǎng)2、4、8、12和24 h,發(fā)酵終止后測定發(fā)酵參數(shù)和飼草養(yǎng)分降解率,通過24 h時發(fā)酵參數(shù)的加權(quán)估算值計算飼草組合效應(yīng)值。結(jié)果表明:(1)燕麥干草與苜蓿不同比例組合影響了其養(yǎng)分降解率。隨著苜蓿比例的增加,干物質(zhì)(DM)和酸性洗滌纖維(ADF)降解率增大,Ⅳ組顯著高于Ⅰ組(P0.05),各組中性洗滌纖維(NDF)降解率差異不顯著(P0.05)。(2)發(fā)酵液pH隨苜蓿比例的增加逐漸升高,Ⅳ組顯著高于Ⅰ組(P0.05);各時間點產(chǎn)氣量(GP)均為Ⅱ組顯著高于其余3組(P0.05),且24 h時Ⅳ組顯著高于Ⅰ和Ⅲ組(P0.05);從發(fā)酵12 h開始,Ⅲ、Ⅳ組氨態(tài)氮(NH_3-N)濃度顯著高于Ⅰ、Ⅱ組(P0.05);24 h時Ⅱ組微生物蛋白(MCP)濃度顯著高于Ⅲ組(P0.05),與Ⅰ、Ⅳ組無顯著差異(P0.05);燕麥與苜蓿不同比例組合對揮發(fā)性脂肪酸(VFA)有顯著影響,24 h時Ⅰ和Ⅳ組丙酸濃度顯著高于Ⅱ和Ⅲ組(P0.05),而Ⅰ、Ⅱ組TVFA含量顯著高于Ⅲ、Ⅳ組(P0.05)。(3)發(fā)酵24 h后Ⅰ、Ⅱ和Ⅳ組均產(chǎn)生正組合效應(yīng),且Ⅳ組效應(yīng)值最大,而Ⅲ組產(chǎn)生負組合效應(yīng)。綜上所述:燕麥干草與苜蓿按20:80組合時DM、NDF和ADF降解率高于其他比例組合,且多項組合效應(yīng)值更高,即燕麥干草與苜蓿以20:80組合時驢盲腸體外發(fā)酵效果最佳。
【圖文】：

甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2019 屆碩士學(xué)位論文由 OTU 花瓣圖可知（圖 2-1），各部位所共有 OTU 數(shù)為，其中胃和盲腸組各有 2 個特有 OTUs，空腸組有 1 個特有生物存在差異。

化道各部位微生物存在差異。圖 2-1 驢胃腸道細菌 OTU 花瓣圖Fig2-1 Gastrointestinal bacteria OTU petal diagram
【學(xué)位授予單位】：甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：S822.5

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本文編號：2686160