【摘要】：沙門菌是世界范圍內(nèi)主要的人獸共患腸道病原菌之一,在全球范圍內(nèi)的豬肉生產(chǎn)鏈中廣泛分布,生豬因此成為沙門菌的主要載體。然而多種沙門菌在健康豬體內(nèi)呈潛伏感染,因此沙門菌更加容易流向人們的餐桌從而危害人類健康甚至危及生命。我國是豬肉生產(chǎn)和食用的大國,更應(yīng)重視豬肉生產(chǎn)鏈中沙門菌的防控。豬養(yǎng)殖場作為豬肉生產(chǎn)鏈中的源頭,對(duì)豬場沙門菌的防控更是我國食品安全控制的重要環(huán)節(jié)。本研究對(duì)上海某家規(guī)�；i場進(jìn)行了為期兩年的沙門菌流行病學(xué)調(diào)查,以期闡明規(guī)�；i場沙門菌流行規(guī)律,并提出針對(duì)性的防控措施。2016年4月至2018年3月期間,共采集糞便樣品587份,分離獲得沙門菌158株,總分離率為26.9%;采集飼料樣品201份,分離得到10株沙門菌,檢出率為5.0%;采集環(huán)境拭子樣品72份,分離得到15株沙門菌,分離率為20.8%。血清型分布結(jié)果顯示鼠傷寒沙門菌為豬場優(yōu)勢(shì)血清型(39.0%),倫敦沙門菌(24.0%)和肯塔基沙門菌(17.0%)也占據(jù)較大比重;飼料樣品中分離到的菌株主要為鼠傷寒沙門菌(30.0%)和羅森沙門菌(40.0%)。研究期間,豬場沙門菌分離率呈現(xiàn)2次主要變化,將沙門菌分離情況分為3個(gè)階段。2016年4月至12月,豬群沙門菌感染率為46.2%;第二個(gè)階段為2017年3月至9月,沙門菌分離率為8.8%;第三階段為2017年10月至2018年3月,沙門菌分離率為32.6%。沿著豬場生產(chǎn)線,對(duì)豬場12頭母豬跟蹤調(diào)查發(fā)現(xiàn),1頭豬在產(chǎn)房環(huán)節(jié)感染肯塔基沙門菌,2頭豬在保育環(huán)節(jié)分別感染肯塔基沙門菌和羅森沙門菌,說明產(chǎn)房和保育舍是沙門菌感染的風(fēng)險(xiǎn)環(huán)節(jié)。對(duì)豬場154株沙門菌分離株進(jìn)行20種抗生素的耐藥性試驗(yàn),結(jié)果表明70%以上的菌株對(duì)林可霉素、四環(huán)素、土霉素、氨芐西林和萘啶酸有耐藥性,其中林可霉素、四環(huán)素和土霉素為豬場內(nèi)常用藥物。多重耐藥方面,多數(shù)菌株表現(xiàn)7重耐藥,部分鼠傷寒沙門菌和肯塔基沙門菌對(duì)18種抗生素有耐藥性。為了探明飼料、環(huán)境與豬源沙門菌的關(guān)系,對(duì)58株鼠傷寒沙門菌和20株羅森沙門菌進(jìn)行脈沖場凝膠電泳試驗(yàn)。結(jié)果表明,豬場優(yōu)勢(shì)的鼠傷寒沙門菌可以分為4個(gè)主要的PFGE型(T1、T2、T3、T4),其中37株分離株為主體部分T1型,表明2016年10月至2017年11月該型沙門菌為優(yōu)勢(shì)PFGE型,長期在豬群和豬場環(huán)境中流行;2016年5月至2016年7月于飼料原料和豬糞便中分離到的7株鼠傷寒沙門菌系T2型,表明飼料中的沙門菌感染了豬群;2017年10月出現(xiàn)了新的PFGE型T3;2017年11月則從新引進(jìn)的種豬糞便中分離到T4型鼠傷寒沙門菌,表明種豬攜帶外源沙門菌。對(duì)羅森沙門菌的PFGE試驗(yàn)表明,除個(gè)別分離株的PFGE型不同以外,其余沙門菌可以分為2種PFGE型(R1、R2),尤其是R2型菌株中包括飼料和糞便中分離到的沙門菌,進(jìn)一步表明被污染的飼料極有可能是場內(nèi)沙門菌的污染源。結(jié)合沙門菌分離率的變化,2017年9月從飼料中分離到羅森沙門菌之后,豬場糞便樣品中羅森沙門菌的分離率大幅升高,并且飼料源與糞便源分離株屬于同一種PFGE型,表明被污染的飼料是導(dǎo)致豬場沙門菌感染率發(fā)生變化,由第二階段進(jìn)入第三階段的重要原因。選取23株鼠傷寒沙門菌和7株羅森沙門菌進(jìn)行了全基因組測(cè)序分析,結(jié)果表明,羅森沙門菌中除SH086以外,其余菌株之間相似性為99.0%～99.6%,其中SH134(飼料來源)與SH136(糞便來源)相似性達(dá)到99.6%;鼠傷寒沙門菌菌株之間相似性為99.8%～100.0%,其中SH035(飼料來源)與SH034(糞便來源)相似性高達(dá)99.95%,直接表明被污染的飼料是豬場沙門菌的來源。鼠傷寒沙門菌SH073來源于豬舍工人雙手擦拭樣,與從糞便樣品中分離得到的SH071和SH081系同一克隆,表明工作人員是豬舍沙門菌傳播的重要載體。2016年11月對(duì)豬場沙門菌防控措施進(jìn)行了優(yōu)化,主要包括三個(gè)部分。一是加強(qiáng)對(duì)飼料中細(xì)菌的監(jiān)測(cè);二是改進(jìn)豬場管理模式,提高對(duì)工作人員消毒的要求,對(duì)相關(guān)措施強(qiáng)制執(zhí)行;三是優(yōu)化豬場消毒程序,將消毒時(shí)間設(shè)置在豬群較活躍的時(shí)間點(diǎn),噴霧消毒時(shí)間延長30s。結(jié)果顯示,優(yōu)化消毒后,豬對(duì)沙門菌的感染率由43.0%降至8.8%,表明對(duì)防控措施的改進(jìn)是導(dǎo)致豬場沙門菌的流行率由第一階段進(jìn)入第二階段的主要原因。對(duì)環(huán)境中沙門菌的定量測(cè)定結(jié)果顯示,在圍欄中,沙門菌覆蓋量在優(yōu)化消毒前為6.1 MPN/g,優(yōu)化后降為小于3 MPN/g;優(yōu)化后水嘴的沙門菌載量比優(yōu)化前亦有所下降。結(jié)果表明,加強(qiáng)對(duì)工作人員的管理,合理優(yōu)化消毒程序可以顯著降低豬場沙門菌的分離率。
【圖文】：

持仔豬生長所需的恒溫環(huán)境（２５°Ｃ），通風(fēng)條件差，適宜細(xì)菌滋生；仔豬體型較小，并且行逡逑為較為活躍，容易沾染糞污從而促進(jìn)了細(xì)菌的傳播。逡逑另外，如圖１－１所示，２０１６年４月至２０１８年３月間，豬場沙門菌分離率出現(xiàn)２次重逡逑要變化，即２０１６年１２月驟然降低以及２０１７年１０月突然升高。第一次沙門菌分離率降低逡逑的原因主要是２０１６年１１月、１２月對(duì)豬場進(jìn)行了消毒優(yōu)化；第二次變化即沙門菌分離率在逡逑２０１７年１０月升高，在該時(shí)間段的采樣調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，２０１７年９月和１０月均在豬場飼料樣逡逑品中檢測(cè)到羅森沙門菌，表１－３中可以看出第１１次（２０１７年９月）采樣后，生豬糞便中逡逑羅森沙門菌分離株增多，表明飼料中的羅森沙門菌感染了豬群，說明豬場該時(shí)間段沙門菌逡逑分離率的升高極有可能由被污染的飼料引起。逡逑１００－．逡逑—８０－邋＼逡逑｜邋６０－邋Ｘ，逡逑丨：｜＼＾／＾逡逑圖１－１糞便樣品中沙門菌分離率的動(dòng)態(tài)變化逡逑Ｆｉｇｕｒｅ邋１－１邋Ｄｙｎａｍｉｃ邋ｃｈａｎｇｅ邋ｏｆ邋Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ邋ｉｓｏｌａｔｉｏｎ邋ｒａｔｅ邋ｉｎ邋ｆｅｃａｌ邋ｓａｍｐｌｅｓ逡逑２．１．２沙門菌分離株的耐藥性逡逑對(duì)１５４株沙門菌分離株進(jìn)行２０種抗生素的耐藥性試驗(yàn)，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析后結(jié)果如圖卜２，逡逑

持仔豬生長所需的恒溫環(huán)境（２５°Ｃ），通風(fēng)條件差，適宜細(xì)菌滋生；仔豬體型較小，并且行逡逑為較為活躍，容易沾染糞污從而促進(jìn)了細(xì)菌的傳播。逡逑另外，如圖１－１所示，２０１６年４月至２０１８年３月間，，豬場沙門菌分離率出現(xiàn)２次重逡逑要變化，即２０１６年１２月驟然降低以及２０１７年１０月突然升高。第一次沙門菌分離率降低逡逑的原因主要是２０１６年１１月、１２月對(duì)豬場進(jìn)行了消毒優(yōu)化；第二次變化即沙門菌分離率在逡逑２０１７年１０月升高，在該時(shí)間段的采樣調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，２０１７年９月和１０月均在豬場飼料樣逡逑品中檢測(cè)到羅森沙門菌，表１－３中可以看出第１１次（２０１７年９月）采樣后，生豬糞便中逡逑羅森沙門菌分離株增多，表明飼料中的羅森沙門菌感染了豬群，說明豬場該時(shí)間段沙門菌逡逑分離率的升高極有可能由被污染的飼料引起。逡逑１００－．逡逑—８０－邋＼逡逑｜邋６０－邋Ｘ，逡逑丨：｜＼＾／＾逡逑圖１－１糞便樣品中沙門菌分離率的動(dòng)態(tài)變化逡逑Ｆｉｇｕｒｅ邋１－１邋Ｄｙｎａｍｉｃ邋ｃｈａｎｇｅ邋ｏｆ邋Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ邋ｉｓｏｌａｔｉｏｎ邋ｒａｔｅ邋ｉｎ邋ｆｅｃａｌ邋ｓａｍｐｌｅｓ逡逑２．１．２沙門菌分離株的耐藥性逡逑對(duì)１５４株沙門菌分離株進(jìn)行２０種抗生素的耐藥性試驗(yàn)，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析后結(jié)果如圖卜２，逡逑
【學(xué)位授予單位】：揚(yáng)州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：S858.28

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2670743