【摘要】：斷奶是仔豬出生后面臨的最大應(yīng)激反應(yīng),如何提高斷奶仔豬生長性能和免疫功能、減少斷奶應(yīng)激一直是畜牧科技工作者關(guān)注和研究的熱點。樹突狀細(xì)胞(Dendritic cells,DCs)是目前已知的體內(nèi)功能最強的抗原遞呈細(xì)胞,精氨酸(Arginine,Arg)是對提高仔豬生長性能、免疫功能以及促進(jìn)DCs分化成熟具有重要作用。但目前尚未見有關(guān)仔豬斷奶對DCs分化及其介導(dǎo)的腸道黏膜免疫功能的影響以及Arg對斷奶仔豬DCs化及其介導(dǎo)的腸道黏膜免疫功能的調(diào)節(jié)作用的報道。本試驗以仔豬為動物模型,以DCs為重點研究對象,研究斷奶對DCs介導(dǎo)的斷奶仔豬腸道黏膜免疫功能的影響及哺乳期補飼Arg對其的調(diào)節(jié)作用。試驗一、斷奶對樹突狀細(xì)胞介導(dǎo)的仔豬腸道黏膜免疫功能的影響本試驗選取21日齡體重相近的健康杜×長×大仔豬40頭,公母各半,隨機(jī)分為兩個組,每組20頭,分別為哺乳組(S組)和斷奶組(W組)。S組仔豬21日齡不斷奶,繼續(xù)哺乳,W組仔豬21日齡斷奶,飼喂常規(guī)仔豬日糧。分別于斷奶后3d和斷奶后7d每組隨機(jī)選取8頭仔豬,屠宰取樣。測定生長性能、腸道形態(tài)、T細(xì)胞數(shù)量、DCs數(shù)量、免疫指標(biāo)、Notch2信號通路關(guān)鍵基因的表達(dá)。結(jié)果表明:(1)與S組相比,斷奶后3d和7d,W組仔豬體重均極顯著降低(P0.01);斷奶后3d,W組仔豬血清中LDH含量顯著升高(P0.05),W組空腸和回腸絨毛高度和絨毛表面積顯著降低(P0.05)、隱窩深度顯著提高(P0.05)、V/C顯著降低(P0.05);斷奶后7d,W組空腸絨毛高度、絨毛寬度、絨毛表面積極顯著降低(P0.01)。(2)與S組相比,斷奶后3d,W組血液中CD3+T細(xì)胞數(shù)量顯著降低(P0.05),胸腺和脾臟中CD3+T細(xì)胞數(shù)量顯著提高(P0.05)、CD3+CD4+/CD3+CD8+T細(xì)胞比值顯著降低(P0.05),胸腺中CD3+CD4+T細(xì)胞數(shù)量顯著降低(P0.05)。(3)與 S 組相比,斷奶后 3d,W 組 CD111b+CD16+、SWC3a+CD86+、SWC3a+SLA-Ⅱ-DR+DCs 數(shù)量顯著減少(P0.05)。(4)與S組相比,斷奶后3d,W組血清中IL-2含量極顯著提高(P0.01),空腸黏膜中sIgA、IL-2和IL-10含量顯著降低(P0.05)、IL-1β含量顯著提高(P0.05),回腸黏膜中IL-2含量和IL-2、IL-4基因表達(dá)量顯著提高(P0.05)、IL-10含量顯著降低(P0.05);斷奶后7天,空腸黏膜中IL-2含量和IL-12、IFN-y基因表達(dá)量顯著提高(P0.05)、IL-10含量和IL-4基因表達(dá)量均顯著降低(P0.05),回腸黏膜中IL-Iβ極顯著降低(P0.01)、IL-2和IFN-y基因表達(dá)量顯著均提高(P0.05)。(5)與S組相比,斷奶后3天,W組回腸黏膜中Jagged1基因表達(dá)量極顯著降低(P0.01);斷奶后7天,W組空腸黏膜中Notch2和Jagged1基因表達(dá)量均顯著降低(P0.05),回腸黏膜中D111基因表達(dá)量顯著降低(P0.05)。由此可見,斷奶后仔豬腸道結(jié)構(gòu)受損,腸道黏膜促炎細(xì)胞因子分泌增加,免疫球蛋白和抗炎細(xì)胞因子分泌降低,T淋巴細(xì)胞亞群失衡,DCs分化成熟受到抑制,斷奶后3天免疫應(yīng)激大于斷奶后7天。斷奶后仔豬腸道黏膜Notch2信號通路基因表達(dá)受到抑制,仔豬斷奶應(yīng)激導(dǎo)致的腸道黏膜免疫功能損傷和DCs的分化減少可能與Notch2通路有關(guān)。試驗二、精氨酸對樹突狀細(xì)胞介導(dǎo)的斷奶仔豬腸道黏膜免疫功能的調(diào)節(jié)作用本試驗選取7日齡體重相近的健康杜×長×大哺乳仔豬40頭,公母各半,每組20頭,分為對照組(C組)和精氨酸組(A組)。7日齡起,在自然哺乳的同時,C組每日灌服0.9%生理鹽水40mL,A組每日灌服補飼Arg40mL(250mg/kg/d)。21日齡斷奶,飼喂常規(guī)配合飼料。分別在斷奶當(dāng)天(21d)和斷奶后3d(24d)每組隨機(jī)挑選8頭仔豬,屠宰采樣。測定生長性能、腸道形態(tài)、T細(xì)胞數(shù)量、DCs數(shù)量、免疫指標(biāo)、Notch2信號通路關(guān)鍵基因的表達(dá)量。結(jié)果表明:(1)哺乳期補飼Arg,可顯著提高斷奶時和斷奶后3d體重和ADG(P0.05),顯著提高斷奶時脾臟指數(shù)、血清和回腸黏膜中NO、NOS含量(P0.05),顯著提高斷奶后3d仔豬空腸回腸黏膜中LDH活性和NOS含量、回腸黏膜中NO含量(P0.05)。哺乳期補飼Arg,斷奶時可顯著提高空腸絨毛高度和V/C、回腸V/C和絨毛表面積(P0.05),極顯著降低回腸隱窩深度(P0.01);斷奶后3d,顯著提高仔豬空腸絨毛高度、V/C和絨毛表面積(P0.05)。(2)哺乳期補飼Arg,可顯著提高斷奶時胸腺和脾臟中胸腺中CD3+CD4+/CD3+CD8+T細(xì)胞比值(P0.05),顯著提高斷奶后3d胸腺中CD3+CD4+T細(xì)胞和脾臟中CD3+CD8+T細(xì)胞數(shù)量(P0.05)。(3)哺乳期補飼Arg,可顯著提高斷奶時回腸 CD11b+CD16+、SWC3a+CD1a+、SWC3a+CD86+、SWC3a+SLA-Ⅱ-DR+DCs數(shù)量(P0.05)。(4)哺乳期補飼Arg,斷奶時可顯著提高血清中IgG含量、空腸回腸黏膜中sIgA和IL-10含量(P0.05)、顯著降低血清IFN-γ含量、空腸黏膜中IL-11β、TNF-α基因表達(dá)量、回腸黏膜中IL-2、IL-12含量和IL-2、IFN-γ基因表達(dá)量(P0.05);斷奶后3d,可顯著提高空腸黏膜中sIgA含量和回腸黏膜中sIgA、IL-10含量、IL-10基因表達(dá)量(P0.05),顯著降低空腸黏膜中IFN-γ含量和IL-12基因表達(dá)量、回腸黏膜中IL-1β含量和IL-1β、IL-12基因表達(dá)量(P0.05)。(5)哺乳期補飼Arg,可顯著提高斷奶時空腸黏膜中Notch2基因表達(dá)量、回腸黏膜中D111和Jagged1基因表達(dá)量(P0.05),顯著提高斷奶后3d空腸黏膜中D111和Hes1基因表達(dá)量、回腸黏膜中Notch2基因表達(dá)量(P0.05)。由此可見,哺乳期補飼Arg可提高仔豬生長性能,減少斷奶失重,可通過減少促炎細(xì)胞因子分泌,增加抗炎細(xì)胞因子和免疫球蛋白分泌來減少斷奶造成的免疫應(yīng)激,并且可以促進(jìn)斷奶仔豬T淋巴細(xì)胞和DCs的分化。哺乳期補飼Arg可促進(jìn)Notch2信號通路關(guān)鍵基因的表達(dá),Arg對斷奶仔豬T淋巴細(xì)胞和DCs的分化的調(diào)節(jié)作用可能與Notch2信號通路有關(guān)。綜上,斷奶會導(dǎo)致仔豬腸道結(jié)構(gòu)和黏膜免疫功能受損,T淋巴細(xì)胞亞群失衡,成熟DCs數(shù)量減少,Notch2信號通路基因表達(dá)受到抑制,且仔豬斷奶后3天斷奶導(dǎo)致的免疫應(yīng)激更為嚴(yán)重。哺乳期補飼Arg可提高仔豬生長性能,減少斷奶失重,提高斷奶仔豬腸道黏膜免疫功能,促進(jìn)斷奶仔豬T淋巴細(xì)胞和DCs的分化。促進(jìn)Notch2信號通路關(guān)鍵基因的表達(dá),Arg對斷奶仔豬T淋巴細(xì)胞和DCs的分化的調(diào)節(jié)作用可能與Notch2信號通路有關(guān)。
【圖文】：

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【學(xué)位授予單位】：揚州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：S858.28

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本文編號：2665797