發(fā)布時(shí)間：2020-05-07 07:26

【摘要】：實(shí)現(xiàn)馬驢高效擴(kuò)繁在生產(chǎn)、動(dòng)物保護(hù)等方面具有重要意義。在馬方面,論文研究了褪黑素、鈣離子抑制劑BAPTA-AM在馬精液低溫保存中的作用,外源藥物對(duì)馬排卵、情期的影響;在驢方面,研究篩選出適宜驢精液體外低溫保存的稀釋液和冷凍液,并對(duì)公驢精液質(zhì)量影響因素、母驢情期生理特性,外源藥物對(duì)母驢排卵、同期發(fā)情效果進(jìn)行了探討。研究發(fā)現(xiàn):在馬方面,褪黑素和BAPTA-AM對(duì)馬低溫保存精子保護(hù)呈濃度依賴性。馬精液冷凍稀釋液中加入1mM褪黑素可保護(hù)精子線粒體膜電位和提高DNA完整性,增加解凍后凍精ATP含量,減少BimEL ROS和MDA水平,延長精子4 ℃保存存活時(shí)間,提高凍精的受孕率;添加50μMBAPTA-AM的冷凍液可提高精子活力,增加解凍精子ATP,MMP,ROS和MDA含量,但未提高4℃保存48h精子輸精受孕率。馬匹排卵后7d后,分別連續(xù)兩天肌肉注射PG,PGF2α,PG+PGF2α或PGF2α+PG可使排卵周期縮短為18±2d,17±2d,14±2d,15±2d。重復(fù)使用hCG超4次使注射與排卵發(fā)生的時(shí)間間隔延長。GnRH類似物對(duì)母馬超排,輸精后平均每3.3個(gè)卵泡可回收1.6個(gè)胚胎。在驢方面,德州驢體高和采精量顯著正相關(guān);體長、陰囊周徑、管圍、尻長與總精子數(shù)顯著正相關(guān);爬跨、唇裂嗅次數(shù)、勃起時(shí)間、交配時(shí)間與精子總量不相關(guān);采精量與密度負(fù)相關(guān)。公驢采精量、精子活力和凍后活力受年齡、季節(jié)影響。SM3稀釋液4 ℃保存驢精液活力較其他SM組高,且SM3液稀釋處理的6億精子低溫保存96h的輸精情期受孕率與鮮精無差異;5%DMF添加到SM3液中可顯著提高凍精活率;同時(shí)發(fā)現(xiàn),凍精50 ℃解凍12-16s活率較35 ℃、36s高,凍精輸精情期受胎率與鮮精無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。德州驢黃體平均持續(xù)期為14.0±4.8d。情期平均有兩個(gè)卵泡波存在,第一個(gè)卵泡募集發(fā)生于排卵后5.2±1.9d,持續(xù)約8.0±4.0d,直到黃體消融前,但未發(fā)育成優(yōu)勢(shì)卵泡;優(yōu)勢(shì)卵泡出現(xiàn)在排卵后16.5±1.0d,卵泡優(yōu)勢(shì)化后距排卵時(shí)間約6.2±1.3d,即上一次排卵后的20.0±5.2d。分析情期血液激素變化后發(fā)現(xiàn),發(fā)情前期(18-21d)母驢E2濃度逐漸升高,并在排卵前3天維持高水平,間情期7-17d和排卵后4-6d 的E2濃度較低。FSH濃度在間情期最高,發(fā)情后期略低于發(fā)情期。P4濃度在排卵后逐漸升高,并在7-9d達(dá)到高峰,之后逐漸下降。LH濃度在優(yōu)勢(shì)卵泡出現(xiàn)后逐漸升高,并在排卵前2天達(dá)到峰值。母驢發(fā)情和卵泡發(fā)育受體內(nèi)激素影響,檢測(cè)體溫和陰道電阻值不能有效鑒定其發(fā)情狀態(tài)。排卵5-8d的母驢肌肉注射5,1OmgPGF2α和0.4mgPG后9-11d的排卵率分別為36.5%、88.8%和63.5%,情期排卵間隔分別為22.58±5.72d、18.11±1.92d 和 19.13±3.38d。德州驢自然排卵平均直徑為38.8±5.1mm,卵泡直徑大于30mm的母驢注射GnRH類似物后48h或25-48h的排卵率明顯高于hCG組和對(duì)照組,但無排卵個(gè)數(shù)差異。于此同時(shí),母驢群第0天注射GnRH類似物,第2天塞入孕酮栓,第7天肌肉注射PG,第9天再次注射PG、撤栓,可使85.69%的驢群在第10-14天內(nèi)發(fā)情。
【圖文】：

３．結(jié)果逡逑３．１褪黑素對(duì)馬精液保存影響逡逑如圖１－１，１－２所示，，總活力和直線前進(jìn)精子數(shù)隨著體外保存時(shí)間的延長而呈現(xiàn)逡逑下降的趨勢(shì)。同時(shí)發(fā)現(xiàn)，０．００１、０．１００、１．０００和ｌＯ．ＯＯＯｍＭ褪黑素組精子總活力和逡逑直線前進(jìn)精子體外保存４８ｈ后，比對(duì)照組和Ｏ．ＯＯｌｍＭ組高（；７＜０．仍），但０．００１、逡逑０．０１０、１．０００和１０．００0１１＾組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。精子４°（：體外保存大于４８１１后，１．００0１１＾逡逑褪黑素添加組顯示出最高的總精子活力和直線前進(jìn)數(shù)。逡逑１２０邋；逡逑Ｃｏｎｔｒｏｌ邐０．００１邋ｍＭ邐０．０１０邋ｍＭ邋０．１００邋ｍＭ邋１．０００邋ｍＭ邋１０．０００邋ｍＭ逡逑■邋１００邋Ａ；ｇ邋．邐Ａ：６邐ｆ邐Ａ；ｇ邐Ａ；ｇ邐Ａ；ｇ逡逑ＩｓｏＶ邐＼邐％邐％邐％邐＼逡逑１邋！邋ｔ邋＾邋Ｖ邋＼邋Ｖ邋ｔ逡逑＾邋Ｏ邋ｒ＞ｌ邋＊９邋ｉＣ邋ｒ＞ｌ邋＾邋0邋0邋？Ｓ邋ＳＣ邋ＪＳ邋Ｑ邋Ｃ邋ｆｓ？邋－５０邋Ｏ邋0邋0邐ａ？邋ｐｇ邋Ｕ５邋0逡逑５－ｉＰ４？ｒｒ＾ｓ？ｉｒ＊逡逑ｒ－？逡逑Ｔｉｍｅ邋（ｈ）逡逑圖１－１不同濃度褪黑素對(duì)４°Ｃ保存不同時(shí)間馬精子總活力的影響逡逑圖注：ＴＭ代表總活力、總運(yùn)動(dòng)精子的百分比；同一組和相同時(shí)間內(nèi)的不同上標(biāo)表示ＳＮＫ檢驗(yàn)的統(tǒng)計(jì)學(xué)顯逡逑著性（／？邐相同組、不同時(shí)間，Ａ，Ｂ，Ｃ，Ｄ，Ｅ，Ｆ；同一時(shí)間、不同組

３．結(jié)果逡逑３．１褪黑素對(duì)馬精液保存影響逡逑如圖１－１，１－２所示，總活力和直線前進(jìn)精子數(shù)隨著體外保存時(shí)間的延長而呈現(xiàn)逡逑下降的趨勢(shì)。同時(shí)發(fā)現(xiàn)，０．００１、０．１００、１．０００和ｌＯ．ＯＯＯｍＭ褪黑素組精子總活力和逡逑直線前進(jìn)精子體外保存４８ｈ后，比對(duì)照組和Ｏ．ＯＯｌｍＭ組高（；７＜０．仍），但０．００１、逡逑０．０１０、１．０００和１０．００0１１＾組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。精子４°（：體外保存大于４８１１后，１．００0１１＾逡逑褪黑素添加組顯示出最高的總精子活力和直線前進(jìn)數(shù)。逡逑１２０邋；逡逑Ｃｏｎｔｒｏｌ邐０．００１邋ｍＭ邐０．０１０邋ｍＭ邋０．１００邋ｍＭ邋１．０００邋ｍＭ邋１０．０００邋ｍＭ逡逑■邋１００邋Ａ；ｇ邋．邐Ａ：６邐ｆ邐Ａ；ｇ邐Ａ；ｇ邐Ａ；ｇ逡逑ＩｓｏＶ邐＼邐％邐％邐％邐＼逡逑１邋！邋ｔ邋＾邋Ｖ邋＼邋Ｖ邋ｔ逡逑＾邋Ｏ邋ｒ＞ｌ邋＊９邋ｉＣ邋ｒ＞ｌ邋＾邋0邋0邋？Ｓ邋ＳＣ邋ＪＳ邋Ｑ邋Ｃ邋ｆｓ？邋－５０邋Ｏ邋0邋0邐ａ？邋ｐｇ邋Ｕ５邋0逡逑５－ｉＰ４？ｒｒ＾ｓ？ｉｒ＊逡逑ｒ－？逡逑Ｔｉｍｅ邋（ｈ）逡逑圖１－１不同濃度褪黑素對(duì)４°Ｃ保存不同時(shí)間馬精子總活力的影響逡逑圖注：ＴＭ代表總活力、總運(yùn)動(dòng)精子的百分比；同一組和相同時(shí)間內(nèi)的不同上標(biāo)表示ＳＮＫ檢驗(yàn)的統(tǒng)計(jì)學(xué)顯逡逑著性（／？邐相同組、不同時(shí)間，Ａ，Ｂ，Ｃ，Ｄ，Ｅ，Ｆ；同一時(shí)間、不同組
【學(xué)位授予單位】：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：S814

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2652639