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牛催乳素信號肽對多中和表位重組豬圓環(huán)病毒3衣殼蛋白表達量的提升作用

發(fā)布時間:2020-04-29 00:01
【摘要】:本文以豬圓環(huán)病毒三型(PCV3)的衣殼蛋白為研究對象,通過生物信息學的手段對其中和表位和逃逸表位進行預測,將其逃逸表位替換為其中的一個中和表位來獲得多中和表位的重組PCV3衣殼蛋白,在大腸桿菌表達系統(tǒng)中誘導表達該蛋白。在對這個低表達的重組蛋白改構的期間,我們發(fā)現(xiàn)牛催乳素信號肽具有提高多中和表位重組PCV3衣殼蛋白表達量的功能。本研究結果為解決大腸桿菌中重組蛋白的低表達提供了新的思路,同時為制備能在大腸桿菌中大量表達的更高活性的PCV3多表位VLP疫苗抗原奠定了基礎。
【圖文】:

基因組,復制酶


(1911-1966)[24]。統(tǒng)計發(fā)現(xiàn),妊娠衣殼蛋白的結構約為 1760bp,,典型的 PCV2 基因組V2 相似的環(huán)狀單鏈 DNA 基因組,大的反向排列的開放閱讀框架(open ,分別編碼 296 個氨基酸的復制酶psid, Cap),其中 Cap 蛋白是唯一的在宿主中的特異性免疫反應[8,25]。復制酶蛋白和蝙蝠環(huán)狀病毒有 55%

基因突變,位點,菌株


PCV3 CP 全長 214 個氨基酸,其氨基酸序列具有高突變性,不同序列之間的相似性都在 95%以上[15]。在自然條件下,60 個 PCV3CP 能夠組裝成天然病毒顆粒,為二十面體的對稱結構。PCV2 CP 的 N 端存在一個核定位信號肽序列(Nuclear localization sequence , NLS),由 41 個保守的氨基酸序列組成,這個區(qū)間富含精氨酸,有協(xié)助病毒的基因組進入細胞核中的功能[26]。 PCV3 CP 的 N端也存在 NLS 區(qū)域,長度為 36 個氨基酸[20]。PCV3 的 NLS 中富含精氨酸,應該也有與 PCV2 CP 的 NLS 相同或相似的作用。1.2.3 豬圓環(huán)病毒 3 型的分類PCV3 CP 的突變導致其亞型的產生。對出現(xiàn)在中國的 51 種 PCV3 CP 序列進行統(tǒng)計分析,PCV3CP 的突變點主要出現(xiàn)于以下位置:R2/G,R10/K,R14/K,Y23/F,A24/V,R27/K,I30/V,V48/I,I49/V,A75/S,T77/S,S95/F,F(xiàn)104/Y,R132/C,S137/F,I150/L 和R168/K(圖1.2)[20]。
【學位授予單位】:吉林大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2019
【分類號】:S852.4

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本文編號:2644007

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