【摘要】：本文以豬圓環(huán)病毒三型(PCV3)的衣殼蛋白為研究對(duì)象,通過(guò)生物信息學(xué)的手段對(duì)其中和表位和逃逸表位進(jìn)行預(yù)測(cè),將其逃逸表位替換為其中的一個(gè)中和表位來(lái)獲得多中和表位的重組PCV3衣殼蛋白,在大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)中誘導(dǎo)表達(dá)該蛋白。在對(duì)這個(gè)低表達(dá)的重組蛋白改構(gòu)的期間,我們發(fā)現(xiàn)牛催乳素信號(hào)肽具有提高多中和表位重組PCV3衣殼蛋白表達(dá)量的功能。本研究結(jié)果為解決大腸桿菌中重組蛋白的低表達(dá)提供了新的思路,同時(shí)為制備能在大腸桿菌中大量表達(dá)的更高活性的PCV3多表位VLP疫苗抗原奠定了基礎(chǔ)。
【圖文】：

（1911-1966）[24]。統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)，妊娠衣殼蛋白的結(jié)構(gòu)約為 1760bp，，典型的 PCV2 基因組V2 相似的環(huán)狀單鏈 DNA 基因組，大的反向排列的開放閱讀框架（open ，分別編碼 296 個(gè)氨基酸的復(fù)制酶psid, Cap），其中 Cap 蛋白是唯一的在宿主中的特異性免疫反應(yīng)[8,25]。復(fù)制酶蛋白和蝙蝠環(huán)狀病毒有 55%

PCV3 CP 全長(zhǎng) 214 個(gè)氨基酸，其氨基酸序列具有高突變性，不同序列之間的相似性都在 95%以上[15]。在自然條件下，60 個(gè) PCV3CP 能夠組裝成天然病毒顆粒，為二十面體的對(duì)稱結(jié)構(gòu)。PCV2 CP 的 N 端存在一個(gè)核定位信號(hào)肽序列（Nuclear localization sequence , NLS），由 41 個(gè)保守的氨基酸序列組成，這個(gè)區(qū)間富含精氨酸，有協(xié)助病毒的基因組進(jìn)入細(xì)胞核中的功能[26]。 PCV3 CP 的 N端也存在 NLS 區(qū)域，長(zhǎng)度為 36 個(gè)氨基酸[20]。PCV3 的 NLS 中富含精氨酸，應(yīng)該也有與 PCV2 CP 的 NLS 相同或相似的作用。1.2.3 豬圓環(huán)病毒 3 型的分類PCV3 CP 的突變導(dǎo)致其亞型的產(chǎn)生。對(duì)出現(xiàn)在中國(guó)的 51 種 PCV3 CP 序列進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，PCV3CP 的突變點(diǎn)主要出現(xiàn)于以下位置：R2/G，R10/K，R14/K，Y23/F，A24/V，R27/K，I30/V，V48/I，I49/V，A75/S，T77/S，S95/F，F(xiàn)104/Y，R132/C，S137/F，I150/L 和R168/K（圖1.2）[20]。
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：S852.4

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本文編號(hào)：2644007