發(fā)布時(shí)間：2020-04-20 12:24

【摘要】：捻轉(zhuǎn)血矛線蟲(Haemonchus contortus)是廣泛寄生于牛羊等反芻動(dòng)物真胃的常見寄生性線蟲,因成蟲吸食宿主血液而引起動(dòng)物尤其是羔羊的貧血、衰弱、生長遲緩甚至死亡,給畜牧業(yè)造成了重大的經(jīng)濟(jì)損失。目前,捻轉(zhuǎn)血矛線蟲的防治主要是靠化學(xué)藥物驅(qū)蟲。然而,化學(xué)藥物的濫用不僅導(dǎo)致抗藥蟲株的出現(xiàn),并且由于藥物殘留也給環(huán)境造成不同程度的污染。因此,尋找一種有效且對環(huán)境無害的防治捻轉(zhuǎn)血矛線蟲新方法是十分必要的。研究發(fā)現(xiàn),寄生線蟲的自由生活階段與自由生活的秀麗隱桿線蟲的dauer(滯育)階段無論在形態(tài)、發(fā)育和行為方面都極為相似。秀麗隱桿線蟲的dauer階段是由四個(gè)信號(hào)通路進(jìn)行調(diào)控的,其中核受體信號(hào)通路在最下游進(jìn)行調(diào)控,DAF-12是該信號(hào)通路極其關(guān)鍵的基因,且調(diào)控蟲體的生長發(fā)育。本課題通過生物信息學(xué)分析、免疫組化及RNA干擾等技術(shù)對捻轉(zhuǎn)血矛線蟲Hc-daf-12基因結(jié)構(gòu)和功能進(jìn)行了研究。本實(shí)驗(yàn)首先確定了捻轉(zhuǎn)血矛線蟲Hc-daf-12基因的c DNA、g DNA、氨基酸及上游啟動(dòng)子序列。并且發(fā)現(xiàn)Hc-daf-12與daf-12家族基因高度同源,且具有共同保守的結(jié)構(gòu)域Ligand Binding Domain和DNA Binding Domain。經(jīng)過生物信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn)Hc-daf-12在捻轉(zhuǎn)血矛線蟲中的各個(gè)階段都可以轉(zhuǎn)錄且在L3期轉(zhuǎn)錄水平最高。通過原核表達(dá)Hc-daf-12的截短蛋白Hc-DAF-12-LBD,并用純化到的高特異性的蛋白免疫兔子獲得多克隆抗體,用多抗定位到該基因在捻轉(zhuǎn)血矛線蟲腸道表達(dá)。最后成功用RNAi的方法研究了Hc-daf-12基因的功能,證明其在捻轉(zhuǎn)血矛線蟲的生長和發(fā)育中發(fā)揮重要的作用。綜上所述,本課題獲得了捻轉(zhuǎn)血矛線蟲Hc-daf-12基因,并對該基因的結(jié)構(gòu)和功能進(jìn)行了研究,為探索捻轉(zhuǎn)血矛線蟲L3期滯育機(jī)制及后續(xù)為開發(fā)藥物靶標(biāo)提供理論依據(jù)。
【圖文】：

圖 1-1 捻轉(zhuǎn)血矛線蟲的生活史示意圖Fig. 1-1 Life cycle of Haemonchus contortus（Jones，，2011）捻轉(zhuǎn)血矛線蟲病的流行病學(xué)ontortus 成蟲的壽命大約為一年。雌蟲每天可產(chǎn)卵 5000~10000 個(gè)。因帶鞘，對外界環(huán)境抵抗力較強(qiáng)，因此在一般草場上可存活約 3~4 個(gè)干燥的環(huán)境中，進(jìn)入休眠狀態(tài)后壽命會(huì)達(dá)到一年半的時(shí)間。該時(shí)期的光性和背地性，在濕度、光照和溫度適合時(shí)，從泥土爬到草上；當(dāng)環(huán)

圖 1-2 捻轉(zhuǎn)血矛線蟲感染羊的臨床癥狀Fig. 1-2 Clinical symptoms of sheep infected with Haemonchus contortus（Gasser et al 2008）1.1.5 捻轉(zhuǎn)血矛線蟲病的診斷及防治通過結(jié)合臨床癥狀和當(dāng)?shù)氐牧餍胁W(xué)對捻轉(zhuǎn)血矛線蟲病進(jìn)行初步的診斷。便捷的方法是用飽和食鹽水漂浮法檢測糞便中的蟲卵。但因?yàn)橄x卵的特征性不是很強(qiáng)，所以需進(jìn)行幼蟲的培養(yǎng)來進(jìn)一步鑒別，對三期幼蟲進(jìn)行鑒定。利用核糖體DNA 第二轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)（ITS-2）可以進(jìn)行分子鑒定。病畜死后可進(jìn)行剖檢，在尸體的真胃或小腸中找到成蟲即可確診（楊光友 2017；李國清 2006）。對于該病的預(yù)防：首先可以適時(shí)的進(jìn)行預(yù)防性的驅(qū)蟲，此可根據(jù)當(dāng)?shù)亓餍胁W(xué)資料做出詳細(xì)規(guī)劃。一般情況春秋各進(jìn)行一次驅(qū)蟲，即在放牧前和放牧后；注意飲水和放牧的衛(wèi)生；禁止飲用低洼地區(qū)的死水和積水，飲用干凈的井水和流水；有規(guī)劃地實(shí)行輪牧；加強(qiáng)適宜的飼養(yǎng)管理，合理的補(bǔ)充精料，從而增加畜體的抗
【學(xué)位授予單位】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：S852.731

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前5條

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本文編號(hào)：2634534