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蒙古馬馬鼻狂蠅線粒體COⅠ基因分析與免疫學研究

發(fā)布時間:2020-04-03 20:19
【摘要】:馬鼻狂蠅(Rhinoestrus sp)是馬屬動物的一種寄生蟲病病原。馬鼻狂蠅幼蟲寄生在馬屬動物的鼻腔,鼻竇,咽部粘膜及附近腔竇中,引起寄生部位的損傷及炎癥反應,使馬匹發(fā)生消瘦、抗病性差等癥狀,致使馬屬動物的生產(chǎn)性能的下降,給馬養(yǎng)殖業(yè)帶來很大經(jīng)濟損失。目前我國對馬鼻狂蠅蛆病的相關研究相對滯后,因此本試驗對馬鼻狂蠅蠅蛆病病原進行種屬鑒定以及蒙古馬感染馬鼻狂蠅后的免疫應答等方面進行研究,為我國馬鼻蠅蛆病的防治跟治療奠定基礎。1、本研究采用光鏡和電鏡對蒙古馬鼻狂蠅幼蟲進行形態(tài)學觀察,得出蒙古馬馬鼻狂蠅的幼蟲的頭咽骨由“H”性舌懸骨和“Y”型的咽片組成。后氣門板上的結(jié)構(gòu)不同于其它狂蠅,氣門板上有兩個開口,氣門肌肉使得氣門板上的開口形態(tài)垂直。蒙古馬馬鼻狂蠅的一齡幼蟲,二齡幼蟲,三齡幼蟲在后氣門板上都有四個后氣門開口,后氣門板上有排列整齊的小刺,頭部有一對乳突狀感受器(papillary sensilla),而三齡幼蟲乳突狀感受器上還分布著一對疣狀乳突。2、本研究選取蒙古馬馬鼻狂蠅三齡幼蟲,通過PCR方法,提取蒙古馬馬鼻狂蠅的線粒體COⅠ基因,利用Clustalx及MEGA6.0軟件對馬鼻狂蠅與狂蠅科的同源序列進行比對,分析其堿基組成與構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹。結(jié)果發(fā)現(xiàn)蒙古馬馬鼻狂蠅與狂蠅亞科聚在一起,但又與羊狂蠅、寬額鼻狂蠅分離較遠。因此,對蒙古馬馬鼻狂蠅分子生物學的研究說明它是一種新變種。3、本研究對感染馬鼻狂蠅幼蟲的蒙古馬免疫學進行初步研究,采用免疫組化手段,分別對蒙古馬咽部、咽后淋巴結(jié)、咽扁桃體及喉囊等部位進行B淋巴細胞(CD20~+細胞)T淋巴細胞(CD3~+細胞)、巨噬細胞(CD20~+細胞)的檢測,并利用graphpad prism5.0軟件對感染組和對照組的CD3、CD20、CD68陽性細胞數(shù)統(tǒng)計相關性。結(jié)果顯示,在感染組的咽后淋巴結(jié)、扁桃體中B淋巴細胞,T淋巴細胞,巨噬細胞數(shù)量與對照組相比差異極顯著(p0.001),三種細胞在感染組的咽和喉囊下部與對照組相比差異顯著(P0.01)。B淋巴細胞增多說明,獲得性免疫反應發(fā)揮作用以后產(chǎn)生了針對馬鼻狂蠅特異性免疫球蛋白。T淋巴細胞數(shù)量增多說明,在抗原提成細胞中T細胞識別抗原產(chǎn)生,宿主已經(jīng)產(chǎn)生了獲得性免疫反應。巨噬細胞數(shù)量增多,說明巨噬細胞在馬狂蠅幼蟲產(chǎn)生的抗原的提成中發(fā)揮著巨大作用,能夠提呈抗原而且發(fā)起細胞介導免疫反應。綜上所述,蒙古馬鼻狂蠅在形態(tài)特征上與紫鼻狂蠅結(jié)構(gòu)相似,但是線粒體COⅠ基因檢測說明蒙古馬鼻狂蠅是紫鼻狂蠅的一個新變種。對蒙古馬感染鼻狂蠅的咽部及其鄰近組織進行了B細胞、T細胞、巨噬細胞的檢測,感染部位和周圍的淋巴器官咽后淋巴結(jié)、扁桃體、咽部及喉囊下部均出現(xiàn)了差異顯著的細胞免疫反應,初步探索了馬鼻狂蠅感染馬的免疫機制。
【圖文】:

線粒體基因組,基因,母系遺傳,粒體


圖 1 狂蠅科線粒體基因組Fig.1 mitochondrial genome of Oestridae粒體CO I基因 I 基因,普遍是母系遺傳基因,其分子質(zhì)量大,

氨基酸序列,二維模型,基因,氨基酸序列


圖 2 狂蠅科 CO I 基因氨基酸序列二維模型圖Fig.2 A two-dimensional model of the insect CO I gene根據(jù) Gennis 和 lunt 的研究,發(fā)現(xiàn)狂蠅科 mtDNACO I 基因氨基酸結(jié)構(gòu)中羧基端(COOH)相比于其他區(qū),即跨膜螺旋區(qū)(M)、內(nèi)環(huán)區(qū)(I)、外環(huán)區(qū)(E)及氨
【學位授予單位】:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2018
【分類號】:S852.743

【參考文獻】

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7 王心麗;試論昆蟲種類鑒定的準確性[J];昆蟲知識;1999年03期

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