發(fā)布時(shí)間：2020-04-03 10:06

【摘要】：本研究通過(guò)對(duì)185株豬源大腸桿菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn),檢測(cè)它們對(duì)典型的β-內(nèi)酰胺類抗生素的敏感程度,并從中篩選出對(duì)氨芐西林高度耐藥的菌株,用以研究耐藥菌株和敏感菌株的競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系。并探索性將益生芽孢桿菌與大腸桿菌耐氨芐西林菌株和敏感菌株放在試管群落中和養(yǎng)豬場(chǎng)模擬地面上進(jìn)行混合培養(yǎng),人為調(diào)節(jié)某些因素,并結(jié)合一些輔助措施,考察耐氨芐西林大腸桿菌菌株在這兩種人工環(huán)境中的比例變化,為尋找降低養(yǎng)豬場(chǎng)耐藥細(xì)菌危害的方法提供理論依據(jù)。1.應(yīng)用改良影印培養(yǎng)法,考察耐氨芐西林大腸桿菌菌株(G414)起始比例、益生菌種類和營(yíng)養(yǎng)水平對(duì)人造微生物群落中G414菌落比例變化的影響。結(jié)果:人造群落中耐藥菌株生存競(jìng)爭(zhēng)能力大于敏感菌株(ATCC 25922),其比例在1~7天均逐漸上升;高初始比例組的耐藥菌落比例從33%上升至64%,絕對(duì)值增加31%,超過(guò)敏感菌株成為群落中的優(yōu)勢(shì)菌,低初始比例組從10%上升至43%;枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌在第1~7天能夠顯著放緩耐藥株在群落中比例的升高趨勢(shì)(P0.05),蠟樣芽孢桿菌除開(kāi)始兩天外,可極顯著地降低耐藥菌落的比例(P0.01);在高(100%)、中(10%)、低(1%)營(yíng)養(yǎng)條件下,耐藥菌落比例均逐步升高,中營(yíng)養(yǎng)水平組的比例上升最快。結(jié)論:耐氨芐西林大腸桿菌菌株并沒(méi)有因攜帶耐藥基因而升高其在無(wú)藥環(huán)境中的競(jìng)爭(zhēng)適應(yīng)度代價(jià),反而獲得了在正常營(yíng)養(yǎng)和低營(yíng)養(yǎng)以及多物種競(jìng)爭(zhēng)條件下的某種競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì),逐步成為人造群落中的優(yōu)勢(shì)菌群,傳播出去,可能對(duì)公共衛(wèi)生安全造成較大威脅;枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌只能降低耐藥菌落比例上升的趨勢(shì),而蠟樣芽孢桿菌可極顯著地抑制耐藥菌落的生長(zhǎng),促使其消亡,若加以開(kāi)發(fā)利用,或許能降低養(yǎng)殖環(huán)境中某些耐藥菌的數(shù)量。2.應(yīng)用瓊脂稀釋法和傾注平板培養(yǎng)法,考察在模擬養(yǎng)豬場(chǎng)地面上噴灑蠟樣芽孢桿菌、沖洗+噴灑蠟樣芽孢桿菌、消毒+噴灑蠟樣芽孢桿菌、沖洗+消毒+噴灑蠟樣芽孢桿菌等幾種措施下耐氨芐西林大腸桿菌菌落(G414)的耐藥水平及相應(yīng)比例在15天的內(nèi)變化情況。結(jié)果:總體而言,試驗(yàn)組中耐氨芐西林大腸桿菌菌落的比例隨時(shí)間降低,降低幅度在某些組間存在差異。結(jié)論:單獨(dú)在模擬地面噴灑蠟樣芽孢桿菌可能不能明顯降低耐氨芐西林大腸桿菌菌落的比例,結(jié)合沖洗則與有對(duì)照組有明顯差異(P0.05),亞最小殺菌濃度濃度的戊二醛對(duì)增強(qiáng)蠟樣芽孢桿菌的效果似乎沒(méi)有明顯作用。
【圖文】：

圖 2-3. 枯草芽孢桿菌 VPLGZU-1 16S rRNA 基因系統(tǒng)進(jìn)化 MP 樹(shù)Fig.2-3. B.subtilis VPLGZU-1 16S rRNA Gene Phylogenetic Maximum Parsimony Tree圖2-3中，16SrRNA基因進(jìn)化樹(shù)顯示，枯草芽孢桿菌VPLGZU-1與地衣芽孢桿菌DSM_1BCRC_11702 、Sonorensis 芽孢桿菌 NBRC_101234 等菌株有較近親緣關(guān)系，相比之下，與枯草芽孢桿菌 BGSC_3A28 關(guān)系較遠(yuǎn)。但枯草芽孢桿菌 BGSC_3A28 與枯草芽孢桿菌 JCM_146

圖 3-1. 遵義地區(qū)豬源大腸桿菌對(duì)氨芐西林的敏感性試驗(yàn)結(jié)果Fig.3-1. Results of Susceptibility Testing of Swine-derived E.coli toAmpicillin in Zunyi Area
【學(xué)位授予單位】：貴州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：S852.61

【參考文獻(xiàn)】

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1 張照婧;厲舒禎;鄧曄;李會(huì)杰;李端行;劉紫嫣;王經(jīng)偉;沈文麗;馬橋;曲媛媛;周集體;;合成微生物群落及其生物處理應(yīng)用研究新進(jìn)展[J];應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報(bào);2015年06期

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本文編號(hào)：2613231