【摘要】：本試驗從EM(Effective Microorganisms)原液發(fā)酵的杏鮑菇菌糠中分離篩選出具有纖維素降解能力和抑菌活性的芽孢桿菌、酵母菌及乳酸菌優(yōu)勢菌株,優(yōu)化復(fù)合后構(gòu)建復(fù)合微生物菌劑,用于發(fā)酵杏鮑菇菌糠,以改善其飼用品質(zhì),并探究其發(fā)酵的杏鮑菇菌糠對馬頭山羊生長性能和血清生化指標的影響。試驗一發(fā)酵杏鮑菇菌糠專用微生物的篩選本試驗采用纖維素-剛果紅、苯胺藍和MRS-Ca(De Man,Rogosa,Sharpe-Ca)篩選培養(yǎng)基,結(jié)合纖維素、木質(zhì)素酶活力及抑菌活性的測定,從EM(Effective Microorganisms)原液發(fā)酵的杏鮑菇菌糠中分離篩選出具有纖維素、木質(zhì)素降解能力和抑菌能力的細菌/真菌,并對分離出的菌株進行細菌16S rRNA和真菌18S rDNA基因序列分析,確定種屬。將篩選出的菌株菌液等體積混合制成復(fù)合菌劑。結(jié)果表明:篩選得到纖維素酶活性較高的特基拉芽孢桿菌P11(Bacillus tequilensis strain 10b)、發(fā)酵畢赤酵母R8(Pichia fermentans strain ATCC 10651)和馬克斯克魯維應(yīng)變酵母MU5(Kluyveromyces marxianus strain W103);木質(zhì)素酶活較高的解淀粉芽孢桿菌MU7(Bacillus amyloliquefaciens subsp.plantarum strain FZB42);抑菌活性較高的類腸膜魏斯氏菌R4(Weissella paramesenteroides strain NRIC 1542)和乳酸片球菌R9(Pediococcus acidilactici strain DSM 20284)。試驗二復(fù)合菌劑發(fā)酵對杏鮑菇菌糠飼用品質(zhì)的影響以杏鮑菇菌糠為原料,配合5%麩皮、0.3%紅糖和0.85%食鹽,試驗組接種4%復(fù)合菌劑;對照組添加等量的無菌液體培養(yǎng)基,將基質(zhì)水分含量調(diào)節(jié)至40%,于30℃厭氧發(fā)酵。間隔48 h測定一次發(fā)酵基質(zhì)pH和乳酸(LA)含量,待含量穩(wěn)定后終止發(fā)酵,取樣測定發(fā)酵基質(zhì)營養(yǎng)成分,確定最佳發(fā)酵工藝后與相同工藝條件下EM原液發(fā)酵的杏鮑菇菌糠進行飼用品質(zhì)的比較。結(jié)果表明:復(fù)合菌劑發(fā)酵菌糠的各項指標優(yōu)于對照組。30℃厭氧發(fā)酵7 d后杏鮑菇菌糠的pH、中性洗滌纖維(NDF)和酸性洗滌纖維(ADF)含量顯著低于對照組(P0.05),LA含量差異不顯著(P0.05),黃曲霉毒素B1(AFB1)低至1.92μg·kg~(-1),飼用品質(zhì)顯著高于EM原液發(fā)酵的杏鮑菇菌糠(P0.05)。試驗三飼喂發(fā)酵杏鮑菇菌糠對育肥羊生長性能和血清生化指標的影響本試驗選用3月齡、體重(20.99±3.90)kg、體況良好的60只馬頭山羊(羯羊),隨機分為5組,試驗組日糧添加復(fù)合菌劑發(fā)酵的杏鮑菇菌糠飼料(20%、25%、30%、35%);對照組日糧添加EM液發(fā)酵的杏鮑菇菌糠(30%),飼喂47 d后測定試驗羊的生產(chǎn)性能和血清生化指標。結(jié)果表明:(1)飼喂結(jié)束后,復(fù)合菌劑發(fā)酵菌糠組試驗羊的末重(FBW)和平均日增重(ADG)顯著高于對照組(P0.05),料重比(F/G)顯著低于對照組(P0.05),但干物質(zhì)采食量(DMI)差異不顯著(P0.05);隨著杏鮑菇菌糠添加量的增加,各生長性能指標測定值有增加的趨勢,當添加量為35%時,試驗羊的FBW、ADG和DMI達到最高值,且顯著高于其他各組(P0.05),但各組F/G差異不顯著(P0.05)。(2)復(fù)合菌劑發(fā)酵菌糠組試驗羊的葡萄糖(GLU)、鈣(Ca)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)和肌酐(CREA)含量,以及谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、乳酸脫氫酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、過氧化氫酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽-過氧化物酶(GSH-Px)活性顯著高于對照組(P0.05)。尿素氮(UREA)含量顯著低于對照組(P0.05)。血清磷(P)、鉀(K)、鈉(Na)、氯(Cl)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、球蛋白(GLB)、甘油三酯(TG)和丙二醛(MDA)含量與對照組差異不顯著(P0.05)。隨著菌糠飼料添加比例的增加,試驗羊的血清GLU、Ca、K、IgM、TP、ALB、GLB、LDH、HDL、CREA和MDA含量,以及AST、ALT、CAT和SOD活性整體呈增加趨勢。UREA含量呈減少趨勢。血清P、Na、Cl、TC、TG、LDL、IgA和IgG含量,以及CK和GSH-Px活性差異不顯著(P0.05)。綜上,本研究篩選的菌株優(yōu)化復(fù)合后發(fā)酵杏鮑菇菌糠,可以很好地改善其飼用品質(zhì)。杏鮑菇菌糠發(fā)酵飼料在山羊日糧中添加比例以35%為最佳,且不影響動物健康。
【圖文】：

理后用 SPSS 20.0 統(tǒng)計軟件進行單因子方差分析（one-wayuncan’s 法，結(jié)果用“平均值±標準差”表示，以“P<0.05”用 Graphpad Prism 6.0 軟件進行圖表的繪制。菌的復(fù)篩得到 32 株菌，其中纖維素、木質(zhì)素降解菌 22 株、疑似酵母對在纖維素和木質(zhì)素篩選培養(yǎng)基上有脫色圈的疑似芽孢桿菌維素、木質(zhì)素降解能力的菌株在纖維素-剛果紅（圖 2-1-A）基上可形成明顯的透明圈，部分菌株試驗效果如圖 2-1 所示。L9、MU1、MU9、P1、P5、P7、P10、P11 和 P14 在纖維素-相對強，，表明這 10 株菌的纖維素酶活性較高；菌株 L6、L9、、P1、P2、P5 和 P10 在苯胺藍培養(yǎng)基上的脫色能力相對強，較高。

mean no significant difference (P>0.05), the same as below.2.2.4 降解木質(zhì)素芽孢桿菌的篩選不同株芽孢桿菌的木質(zhì)素酶活性測定結(jié)果如圖2-3所示，MU7的MnP和LiP酶活性顯著高于其他菌株（P<0.05）；Lac酶活性與菌株MU1、MU3及MU6差異不顯著（P>0.05），但顯著高于其他菌株（P<0.05）。圖 2-3 不同株芽孢桿菌的木質(zhì)素酶活性Fig. 2-3 Ligninase activity of different Bacillus strains2.2.5 有抑菌活性乳酸菌的篩選乳酸菌抑菌活性測定結(jié)果見圖 2-4，乳酸菌在培養(yǎng) 48 h 后的抑菌活性均在 60%以上，A B16
【學位授予單位】：西北農(nóng)林科技大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：S816.3

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 梁瓊;魯明波;盧正東;何鋒;余龍江;;對羥基聯(lián)苯法定量測定發(fā)酵液中的乳酸[J];食品科學;2008年06期

2 李進杰,焦鐳,李鵬偉;食用菌糠在肉羊育肥中的應(yīng)用試驗[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);2005年08期

本文編號：2609023