【摘要】：本試驗(yàn)主要探討豬仿生消化中消化酶活性隨消化時(shí)間的變化、小腸階段各消化酶對(duì)飼料粗蛋白質(zhì)消化率的貢獻(xiàn)、仿生消化清洗過程對(duì)谷實(shí)類飼料原料粗蛋白質(zhì)消化率的影響以及仿生消化法與生物學(xué)法測(cè)定谷實(shí)類原料氨基酸消化率的差異及相關(guān)性,為仿生消化法評(píng)定谷實(shí)類豬飼料原料蛋白質(zhì)效價(jià)提供參考。試驗(yàn)一旨在探討豬仿生消化過程中胃、小腸階段消化酶的衰減以及補(bǔ)加消化酶后酶活性變化的規(guī)律。第一部分采用單因素完全隨機(jī)設(shè)計(jì),評(píng)價(jià)玉米、大豆粕、小麥麩及玉米-大豆粕飼糧底物在仿生消化中消化酶活性隨消化時(shí)間的變化規(guī)律。第二部分,在小腸消化4 h補(bǔ)加消化酶,評(píng)價(jià)補(bǔ)加酶后小腸消化酶活性變化情況。結(jié)果表明:1)當(dāng)模擬胃液與4種飼料底物混合后,消化液中胃蛋白酶的比活性迅速降低,但在模擬消化1~4 h時(shí),胃蛋白酶的比活性和總活性呈二次曲線增加(P0.05),最終可達(dá)到模擬胃液比活性的78.0~96.1%和總活性的87.2~102.7%;在小腸消化階段,模擬消化液中消化酶的活性均有不同程度的衰減(P0.05),其中淀粉酶和糜蛋白酶活性因消化底物不同而呈二次或其它非線性變化(P0.05),而胰蛋白酶活性均二次曲線下降(P0.05)。胰蛋白酶的活性下降速度最快。2)補(bǔ)加消化酶后3種酶的活性均可恢復(fù)到初始值,但仍隨消化時(shí)間而衰減(P0.05),其中胰蛋白酶活性依然快速下降。試驗(yàn)二旨在探討豬仿生消化中小腸階段主要消化酶的組成及活性對(duì)飼料粗蛋白質(zhì)消化率的貢獻(xiàn)情況。試驗(yàn)采用單因素完全隨機(jī)設(shè)計(jì),5個(gè)處理組分別為:胃模擬消化、胃+小腸(組成:淀粉酶)模擬消化、胃+小腸(組成:淀粉酶+糜蛋白酶)模擬消化、胃+小腸(組成:淀粉酶+糜蛋白酶+胰蛋白酶)模擬消化、胃+小腸(組成:淀粉酶+糜蛋白酶+胰蛋白酶+小腸消化第4 h補(bǔ)充消化酶)模擬消化。考察各處理?xiàng)l件下玉米、大豆粕、小麥麩及玉米-大豆粕飼糧底物的干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)及總能的消化率差異和各消化酶的貢獻(xiàn)。結(jié)果表明:1)模擬小腸液中淀粉酶、糜蛋白酶均可顯著提高胃消化后4種底物的干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)以及總能的消化率(P0.05);胰蛋白酶可以進(jìn)一步提高胃消化后大豆粕、小麥麩的干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)以及總能的消化率(P0.05);補(bǔ)充3種消化酶可以提高對(duì)小麥麩粗蛋白質(zhì)及玉米-大豆粕型飼糧干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)及總能的消化率(P0.05)。2)小腸液中消化酶對(duì)飼料養(yǎng)分消化率的貢獻(xiàn)上,因飼料底物的不同而異,其中淀粉酶、糜蛋白酶對(duì)總能和粗蛋白質(zhì)消化率的貢獻(xiàn)相對(duì)較高,而胰蛋白酶和補(bǔ)酶對(duì)飼料養(yǎng)分消化率的貢獻(xiàn)雖然相對(duì)較少,但也可以引起消化率顯著性差異(P0.05)。試驗(yàn)三旨在探討仿生消化中清洗過程對(duì)谷實(shí)類飼料原料粗蛋白質(zhì)消化率的影響。采用單因素完全隨機(jī)設(shè)計(jì),設(shè)3個(gè)處理水平,即仿生消化法-12 h清洗的粗蛋白質(zhì)消化率,仿生消化法-24 h清洗的粗蛋白質(zhì)消化率和生物學(xué)法標(biāo)準(zhǔn)回腸蛋白質(zhì)消化率。仿生消化法每個(gè)處理5個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)1根消化管。生物學(xué)法每個(gè)處理6個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)1頭豬�？疾觳煌幚硐�14個(gè)谷實(shí)類飼料原料粗蛋白質(zhì)消化率。結(jié)果表明:14個(gè)谷實(shí)類飼料原料中,除2個(gè)稻谷樣品外,仿生消化-24h清洗測(cè)定的粗蛋白質(zhì)消化率與生物學(xué)法相差0.46~10.82%,兩者的相關(guān)系數(shù)為r=0.9186。而仿生消化-12 h清洗測(cè)定的粗蛋白質(zhì)消化率與生物學(xué)法相差0.77~6.84%,兩者相關(guān)系數(shù)為r=0.9519。從與生物學(xué)測(cè)值的接近程度及相關(guān)性考慮,仿生消化中12 h清洗過程較為適宜。試驗(yàn)四旨在探討豬仿生消化法與生物學(xué)法評(píng)定谷實(shí)類飼料原料可消化氨基酸含量和氨基酸消化率的相關(guān)性。采用單因素完全隨機(jī)設(shè)計(jì),分別采用仿生消化法和生物學(xué)法測(cè)定14個(gè)谷實(shí)類飼料原料的氨基酸消化率。仿生消化法每個(gè)處理5個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)1根消化管。生物學(xué)法每個(gè)處理6個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)1頭豬。在剔除2個(gè)稻谷后,對(duì)12個(gè)谷實(shí)類飼料原料可消化氨基酸含量及氨基酸消化率的仿生消化法測(cè)值與生物學(xué)法測(cè)值進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果表明:仿生消化法可以較好的預(yù)測(cè)16種氨基酸標(biāo)準(zhǔn)回腸可消化氨基酸含量,相關(guān)系數(shù)r≥0.95;仿生消化法可以預(yù)測(cè)除Arg外剩余15種AA的SID,相關(guān)系數(shù)r范圍在0.5779~0.9387,尤其是必需氨基酸:Lys、Ile、Leu和Phe,非必需氨基酸:Asp、Ser、Glu和Ala,相關(guān)系數(shù)r≥0.82。
【圖文】：

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文 第二章 豬仿生消化中消化酶活性隨消化時(shí)間變化的研究2.2.2 小腸仿生消化過程中消化酶活性隨消化時(shí)間的變化以玉米為底物時(shí)，模擬小腸消化階段（圖 2-1）消化液中淀粉酶比活性和總活性隨消化時(shí)間呈二次曲線降低（P<0.05），其中比活性和總活性在 0~4 h 依次顯著降低（P<0.05）；6~16 h 相對(duì)平穩(wěn)，但均顯著地低于 0 和 2 h 的相應(yīng)值。胰蛋白酶的比活性和總活性呈現(xiàn) 0~8 h 急速下降（P<0.05），8~16 h 保持較低值的二次曲線性變化。糜蛋白酶的比活性和總活性呈非線性變化，比活性在 2 h達(dá)到最高，隨后依次顯著下降（P<0.05）。

(a) (b)圖 2-2 以大豆粕為底物模擬小腸消化階段消化酶活性隨消化時(shí)間的變化Fig 2-2 Digestive enzyme activities varied with digestion time in in vitro small intestinal digestion for soybean meal淀粉酶活性濃度：SEM=3.27U/mL，方差 P<0.01，線性失擬 P<0.01，二次 P=0.11；胰蛋白酶活性濃度：SEM=0.47U/mL，方差 P<0.01，線性失擬 P<0.01，二次 P<0.01；糜蛋白酶活性濃度：SEM=0.30 U/mL，方差 P<0.05，線性P<0.05。淀粉酶總活性：SEM=0.08 KU，方差 P<0.01，線性失擬 P<0.01，二次 P=0.15；胰蛋白酶總活性：SEM=0.01KU，方差 P<0.01，線性失擬 P<0.01，二次 P<0.01；糜蛋白酶總活性：SEM=0.01 KU，方差 P<0.01，線性失擬P<0.05，，二次 P<0.05。以小麥麩為底物時(shí)，模擬小腸消化階段（圖 2-3），消化液中淀粉酶的比活性和總活性隨消化時(shí)間呈二次曲線依次降低（P<0.05），0~8 h 活性下降較快，8~12 h 緩慢下降。胰蛋白酶的比活性和總活性隨消化時(shí)間呈二次曲線顯著降低（P<0.05），總體上 0~8 h 呈現(xiàn)急速下降，8~16 h 酶活性降到較低水平。糜蛋白酶的比活性和總活性呈二次曲線降低，其中在 0~12 h 呈快速下降，12~16 h緩慢下降（P<0.05）。
【學(xué)位授予單位】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：S828.5

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本文編號(hào)：2607417