【摘要】：禽致病性大腸桿菌(APEC)是危害養(yǎng)禽業(yè)發(fā)展的主要細菌性病原之一。有研究顯示,APEC是人腸外致病性大腸桿菌(ExPEC)的毒力基因和耐藥基因的貯存庫,被其污染的禽類食品可能是導致ExPEC跨宿主傳播的主要來源,因此研究分析APEC的致病性與耐藥性是目前研究熱點。本研究圍繞該熱點,通過對安徽部分地區(qū)APEC分離鑒定及其致病性與耐藥性分析,為安徽省養(yǎng)禽業(yè)的APEC流行情況及其在未來的流行病學的研究提供數(shù)據(jù)參考,為臨床防治和提高公共衛(wèi)生安全提供新的研究思路。具體研究內(nèi)容如下:1.安徽部分地區(qū)APEC的分離鑒定本研究通過培養(yǎng)分離、生化鑒定及16S rRNA等方法,從具有大腸桿菌病臨床癥狀的病例中,共鑒定出72株禽源大腸桿菌,其中14株從糞便和腸道中分離,58株從腸外臟器組織分離。2.APEC分離株的致病性分析本研究對72株禽源大腸桿菌分離株進行種系發(fā)生分型、致病性實驗、毒力基因的檢測等進行致病性分析,并通過PCR方法對分離株中O1、O2和O78血清型進行調(diào)查。種系發(fā)生分型、血清型調(diào)查和致病性實驗結果表明,安徽部分地區(qū)分離株以B2群為主要優(yōu)勢進化群,72株分離株均為APEC,58株屬于中高致病性菌株,共有23株APEC是O1、O2和O78血清型;毒力基因PCR結果顯示,分離株攜帶數(shù)量不一的毒力基因,其中mat、fimC、ibeB、yijP、ompA、iss、iucD、iroN、chuA基因陽性率均超過50%,在腸外APEC和腸內(nèi)APEC分離株中aatA、iucD、cva/cvi基因分布存在明顯差異,其它毒力相關基因檢出率無顯著差異。3.APEC分離株的耐藥性分析本研究分別對72株APEC進行藥物敏感性、耐藥基因等耐藥性分析,結果表明:72株APEC對氨芐西林全耐藥,對多粘菌素B和氟甲喹較為敏感,分別達100%和98.6%,其中表型多重耐藥中3-7重耐藥率占68.1%(49/71);耐藥基因PCR結果顯示,腸內(nèi)APEC和腸外APEC的耐藥基因檢出率基本一致,多粘菌素、氯霉素和喹諾酮類與表型耐藥基本符合。
【圖文】：

圖 1- 1 菌株分離結果圖Figure 1-1 Strains separation results2.1.2 APEC 分離株鑒定結果（鏡檢、生理生化實驗結果）經(jīng)革蘭氏染色鏡檢、三糖鐵斜面培養(yǎng)和 15 種生化實驗鑒定結果為：革蘭氏染色為紅色桿狀；可使葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，，分解乳糖、麥芽糖等；吲哚、MR 陽性，VP陰性，不產(chǎn)生 H2S，枸櫞酸鹽陰性；在三糖鐵斜面產(chǎn)酸產(chǎn)氣，這些基本生化特性都符合大腸桿菌的特征，鑒定出 72 株禽致病性大腸桿菌如下圖 1-2 和表 2-1。麥康凱 伊紅美藍 普通培養(yǎng)基

2 結果與分析2.1 安徽部分地區(qū)禽致病性大腸桿菌的分離鑒定2.1.1 APEC 安徽分離株分離結果觀察結果為：麥康凱培養(yǎng)基：圓形、表面濕潤光滑、亮紅色的菌落；伊紅美藍瓊脂：有金屬光澤、紫黑色的菌落；LB 培養(yǎng)基 ：圓形，濕潤、半透明光滑、凸起、灰白色的菌落，如圖 1-1。
【學位授予單位】：安徽農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：S852.612

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本文編號：2605396