【摘要】：禽白血病(Avian Leukosis,AL)群是指由禽白血病病毒(Avian Leukosis Virus,ALV)引起的禽類各種可傳播的良性和惡性腫瘤�？梢鹨幌盗信R床病理變化并導(dǎo)致雞群生產(chǎn)性能下降和免疫抑制。禽白血病可分為內(nèi)源性禽白血病(ALV-E)和外源性禽白血病。根據(jù)病毒的基因組結(jié)構(gòu)、染宿主的范圍、血清中和及干擾實驗,外源性禽白血病被劃分為5個亞型:A、B、C、D和J。臨床上較為常見的亞型主要是A、J亞型,J亞型禽白血病是在20世紀(jì)出現(xiàn)的,隨后在全世界流行、爆發(fā),造成了巨大的經(jīng)濟損失,并引起了人們的重視�，F(xiàn)在國內(nèi)有關(guān)禽白血病流行病學(xué)的報道已經(jīng)很多了,但主要集中在家禽上,關(guān)于野生鳥類感染禽白血病的報道較少。禽白血病病毒的自然宿主較少,其中雞為該病的主要自然宿主。為了解野生鳥類和活禽市場中禽類感染禽白血病的情況及不同動物之間感染情況的差異性,本研究選取東亞-澳大利亞野生鳥類遷徙路線上的江蘇鹽城濕地及鹽城地區(qū)周邊活禽市場作為研究基地,探究江蘇省鹽城地區(qū)野生鳥類與活禽市場中J亞型禽白血病病毒的流行情況。本研究于2015~2016年在我國江蘇鹽城地區(qū)(野鳥保護區(qū)、田間、野鳥救助站)進行了兩次野生鳥類的新鮮糞便樣品的采集、從市區(qū)及周邊的活禽交易市場采集新鮮家禽糞便樣品或家禽屠宰區(qū)污水、案板等地的棉拭子(環(huán)境樣品)以及從當(dāng)?shù)氐募仪蒺B(yǎng)殖場采集雞鴨鵝的新鮮糞便樣品,共采集樣品2427份,其中,1091份市場活禽糞便樣品,1336份野生鳥類糞便樣品,并對樣品進行了J亞型禽白血病的分子病原學(xué)檢測及基因序列分析。提取糞便樣品RNA,反轉(zhuǎn)錄后用熒光定量PCR(Real-Time PCR)的方法檢測ALV-J,檢測結(jié)果為陽性的樣品,進行RT-PCR擴增其gp85基因片段,并進行克隆測序和基因序列分析。取RT-PCR檢測結(jié)果為陽性及部分陰性糞便樣品上清,分別接種到9日齡SPF雞胚及CEF上,進行病毒增殖。CEF連續(xù)傳代3次,培養(yǎng)10d后收獲細胞及細胞上清;尿囊腔接種雞胚,傳代3次,收獲雞胚內(nèi)臟及尿囊液。提取細胞及雞胚內(nèi)臟DNA,進行普通PCR檢測;取細胞上清進行ELISA,檢測P27抗原。熒光定量PCR結(jié)果顯示,1091份活禽市場糞便樣品中,陽性樣品22份,陽性率為2.02%;1336份野生鳥類糞便樣品中有陽性樣品3份,陽性率為0.22%。熒光定量PCR檢測為陽性的樣品中,RT-PCR檢測結(jié)果顯示,活禽中檢測到3個陽性樣品,野生鳥類中未檢測到陽性樣品。通過克隆測序得到3個長度為924bp的活禽市場樣品(當(dāng)?shù)赝岭u)的ALV-J gp85基因片段,3個基因序列的同源性在93.7%~94.7%之間,與13個國內(nèi)外ALV參考毒株同源性在87.7%~95.7%之間。普通PCR檢測結(jié)果顯示,活禽市場中禽類擴增出的3個ALV-J陽性樣品均為熒光定量PCR及RT-PCR檢測為陽性的樣品,經(jīng)克隆測序得到2個基因序列,2個陽性樣品的同源性為98.3%,與國際參考株HPRS-103的同源性為97.8%、98.1%。細胞上清通過ELISA未檢測到陽性結(jié)果。本調(diào)查使用熒光定量PCR檢測ALV-J,對病毒的檢出率較普通PCR擴增高,并且普通PCR擴增的結(jié)果可以表明其檢測結(jié)果準(zhǔn)確度較高。本研究調(diào)查2016年江蘇省鹽城地區(qū)活禽市場與野生鳥類中ALV-J的流行情況,結(jié)果表明活禽市場禽類中存在ALV-J的感染,而野生鳥類中多次復(fù)檢未檢測到ALV-J的感染,但并不排除野生鳥類中不存在ALV-J的感染。探究了沿東亞-澳大利亞野生鳥類遷徙路線ALV-J的流行情況,為ALV防治提供了重要的監(jiān)測數(shù)據(jù),給江蘇鹽城地區(qū)ALV的防控提供了一定的參考意義。
【圖文】：

圖 1.1-1ALV 病毒粒子模式圖Fig.1-1 Structure ofALV virus particle毒復(fù)制血病病毒基因組是單股、正鏈、線性 RNA（ssRNA）的二聚

圖 2 活禽市場樣本 RT-PCR 凝膠電泳結(jié)果Figure 2 RT-PCR gel electrophoresis results of live poultry market samM：DL2000 Marker；1～8：PCR 產(chǎn)物；9：陽性對照；10：陰性對D2000 Marker; 1～8 : PCR amplification fragments; Lane 9 : positive contr
【學(xué)位授予單位】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：S857.4

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 彭聰;彭南秀;曾佳臻;薛紅;謝月優(yōu);鐘江國;;廣州活禽市場的升級改造及監(jiān)管[J];中國動物檢疫;2013年11期

2 陌上玉;;活禽市場何去何從[J];農(nóng)產(chǎn)品市場周刊;2013年18期

3 麥脫;;國務(wù)院著手整頓和規(guī)范活禽市場[J];中國牧業(yè)通訊;2006年23期

4 ;別帶孩子去活禽市場[J];鄉(xiāng)鎮(zhèn)論壇;2009年07期

5 ;合肥活禽市場十天一監(jiān)測[J];家禽科學(xué);2009年04期

6 楊文秀;;強化監(jiān)督檢查力度 加強活禽市場監(jiān)管[J];畜禽業(yè);2009年10期

7 ;活禽市場交易漸行漸遠 冷鮮制品將會成消費主流[J];畜禽業(yè);2013年06期

8 張海明;彭聰;段曉冬;沈丹;;香港活禽市場的管理措施[J];中國動物檢疫;2013年11期

9 ;農(nóng)業(yè)部組織專家研討活禽市場生物安全問題[J];農(nóng)村養(yǎng)殖技術(shù);2013年08期

10 王曉峰;錢勇;;活禽市場規(guī)范經(jīng)營的有效舉措[J];中國禽業(yè)導(dǎo)刊;2010年16期

相關(guān)會議論文 前1條

1 王遠孝;葛津瑤;張京;吳懿;劉凌云;顏培實;;活禽交易市場現(xiàn)狀的調(diào)查與研究[A];第十屆全國家畜環(huán)境科學(xué)討論會論文集[C];2006年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 王森;興區(qū)動監(jiān)部門專項整治活禽市場[N];盤錦日報;2008年

2 記者 天笑;所有活禽市場暫時關(guān)閉[N];蘇州日報;2013年

3 吳濤 王攀;活禽市場出路在哪？[N];中國食品安全報;2013年

4 崔尚金;活禽市場、養(yǎng)殖場與人類健康[N];中國畜牧獸醫(yī)報;2005年

5 記者 董峻 呂諾;世衛(wèi)專家:活禽市場是人感染主要來源地[N];新華每日電訊;2013年

6 特約記者 黃巧萍 通訊員 王建平;廣東活禽市場一月一休市[N];健康報;2013年

7 記者 蘇菁;蘇州活禽市場未“解禁”[N];蘇州日報;2013年

8 記者 李小維;兩節(jié)市場防“禽”不留死角[N];蘭州日報;2005年

9 本報記者 李海濤;關(guān)閉活禽市場要慎行[N];農(nóng)民日報;2014年

10 ;滬今起關(guān)閉活禽市場，暫�；钋萁灰譡N];新華每日電訊;2013年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前3條

1 田曉彥;環(huán)形病毒AGV2的檢測及其VP1-3基因表達[D];揚州大學(xué);2016年

2 張慧蓉;活禽市場和養(yǎng)雞場H7N9和H9亞型AIV氣溶膠的監(jiān)測[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

3 李穎利;上海市活禽市場彎曲菌耐藥性調(diào)查及其分子耐藥機制的初步研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2014年

，

本文編號：2598017