發(fā)布時(shí)間：2020-03-23 09:37

【摘要】：豬瘟(Classical Swine Fever,CSF)是由豬瘟病毒(Classical Swine Fever Virus,CSFV)引起的一種急性、熱性、接觸性傳染病,具有高度傳染性和致死性,豬是該病的唯一天然宿主。CSF對(duì)世界養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失,是對(duì)世界養(yǎng)豬業(yè)危害最大的豬病之一。豬瘟最早于1833年在美國(guó)俄亥俄州出現(xiàn),并迅速傳播到世界各大洲。1954年,我國(guó)科學(xué)家研制出了高效豬瘟兔化弱毒疫苗,使我國(guó)的豬瘟疫情得以迅速控制,并幫助許多國(guó)家根除了CSFV的威脅。上世紀(jì)90年代末期,涂長(zhǎng)春等學(xué)者對(duì)中國(guó)各地區(qū)的CSFV進(jìn)行了系統(tǒng)性流行病學(xué)調(diào)查,并通過(guò)基因測(cè)序等方法對(duì)中國(guó)的豬瘟毒株進(jìn)行了分型,為世界豬瘟病毒數(shù)據(jù)庫(kù)的完善做出了巨大的貢獻(xiàn)。經(jīng)調(diào)查發(fā)現(xiàn),中國(guó)同時(shí)存在基因Ⅰ型(1.1亞型)、基因Ⅱ型(2.1、2.2、2.3亞型)和基因Ⅲ型(3.4亞型),目前我國(guó)流行的毒株主要為2.1亞型,基因Ⅲ型僅在臺(tái)灣地區(qū)存在。本研究基于對(duì)2016年-2018年本實(shí)驗(yàn)室接收的來(lái)自山東各地的CSF臨床樣品檢測(cè)分析,對(duì)山東省CSF疫情進(jìn)行了系統(tǒng)的流行病學(xué)調(diào)查,包括臨床病例的發(fā)病情況調(diào)查,送檢樣品的病理組織學(xué)檢測(cè)、病原學(xué)檢查、CSFV的分離鑒定以及CSFV-E2抗體的檢測(cè),并對(duì)E2基因進(jìn)行了序列的測(cè)定及遺傳變異分析。調(diào)查結(jié)果顯示,發(fā)病豬的癥狀表現(xiàn)不盡相同,急性病例以高熱、神經(jīng)癥狀、皮膚斑點(diǎn)狀出血、高死亡率為主要特征,妊娠母豬會(huì)引起流產(chǎn)、死胎等癥狀;公豬表現(xiàn)為包皮炎、陰鞘積尿等癥狀;仔豬多有神經(jīng)癥狀,表現(xiàn)為磨牙、后退、轉(zhuǎn)圈、強(qiáng)直、側(cè)臥及游泳狀,甚至昏迷等。慢性病例主要表現(xiàn)持續(xù)發(fā)熱、精神沉郁、腹瀉、消瘦等癥狀,還會(huì)因繼發(fā)或并發(fā)細(xì)菌或其他病毒感染使癥狀復(fù)雜化。該病的發(fā)生無(wú)明顯的季節(jié)性,從冬春多發(fā)轉(zhuǎn)為目前的四季常發(fā)。急性病例的剖檢病變主要表現(xiàn)為淋巴結(jié)、腎臟、胃腸道黏膜等全身組織器官?gòu)V泛性出血,脾臟邊緣出血性梗死;慢性病例除出血性病變外,特征病變?yōu)槟c道黏膜潰瘍。豬瘟組織病理學(xué)的特征病變?yōu)榱馨徒M織出血性壞死、病毒性腦炎及組織器官的廣泛性出血。在送檢的1716份樣品中,經(jīng)RT-PCR檢測(cè)有207份CSFV陽(yáng)性,陽(yáng)性率為12.06%(207/1716)。CSFV-E2抗體檢測(cè)結(jié)果顯示,在12709份血清中,陽(yáng)性為9767份,占76.85%。經(jīng)分群統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn),種公豬、經(jīng)產(chǎn)母豬、后備母豬、仔豬、育肥豬的抗體陽(yáng)性率分別為89.34%、84.44%、83.25%、70.94%、67.66%�？贵w檢測(cè)結(jié)果表明,各豬場(chǎng)均高度重視種公豬、母豬的疫苗免疫,抗體陽(yáng)性率和抗體水平都比較高,但對(duì)于仔豬和育肥豬的免疫多存在一定的問(wèn)題,免疫狀態(tài)欠佳,這可能是造成目前豬瘟多發(fā)的主要原因,當(dāng)然生物安全措施不到位也是現(xiàn)在傳染性疾病多發(fā)的重要原因。對(duì)分離到的41株CSFV進(jìn)行了E2基因序列的測(cè)定,經(jīng)同源性比對(duì)、遺傳進(jìn)化分析和突變位點(diǎn)分析發(fā)現(xiàn),分離株大多為豬瘟病毒2.1d亞型,僅有1株為2.1b亞型;與參考株之間的核苷酸同源性及推導(dǎo)氨基酸同源性分別為81.1%-96.2%和88.2%-98.4%,與2.1亞型的同源性最高;通過(guò)突變位點(diǎn)分析,發(fā)現(xiàn)糖基化位點(diǎn)發(fā)生了~(986)NYAK-NYTE~(989)的突變,推測(cè)是E2蛋白在疫苗免疫的壓力下發(fā)生了與疫苗株HCLV相同的突變;抗原位點(diǎn)“~(717)TTWKEYSH~(724)”、“~(771)LLFDGTNP~(778)”、“~(829)TAVSPTTLR~(837)”均發(fā)生了突變,但突變后產(chǎn)生的影響需進(jìn)一步研究,抗原表位“~(995)YYEP~(998)”未發(fā)生變化。綜合上述研究結(jié)果,目前山東省CSFV的感染壓力仍然很大,豬瘟疫苗的使用雖能夠?qū)ωi群產(chǎn)生有效的保護(hù)力,但未徹底消除疫病發(fā)生風(fēng)險(xiǎn),各規(guī)模豬場(chǎng)應(yīng)加大疫苗免疫效果監(jiān)測(cè),調(diào)整優(yōu)化疫苗免疫程序,健全生物安全措施,在綜合防控的基礎(chǔ)上,最終實(shí)現(xiàn)核心豬群的監(jiān)測(cè)凈化。本研究進(jìn)一步豐富了山東省CSF的流行病學(xué)資料,對(duì)于新型疫苗的研發(fā)亦具有一定的指導(dǎo)意義。
【圖文】：

圖 1 CSFV的基因組結(jié)構(gòu)及其編碼蛋白結(jié)構(gòu)（Beer et al., 2007）Figure 1 Genomic structure and encoded protein structure of CSFV（Beer et al., 2007） 由 360-374 個(gè)氨基酸組成，其大小因不同豬瘟病毒的序列et al., 1995），但因該區(qū)域序列高度保守，最高能達(dá)到 94%，，故的依據(jù)（Stadejek et al., 199）。5’端因缺乏“帽子”結(jié)構(gòu)，故不

CSFV-E2蛋白的抗原結(jié)構(gòu)域（彭志成，2013）
【學(xué)位授予單位】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類(lèi)號(hào)】：S858.28;S852.651

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2596540