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多菌種發(fā)酵豆粕優(yōu)化工藝研究

發(fā)布時(shí)間:2020-03-21 21:54
【摘要】:發(fā)酵飼料是當(dāng)前的熱門(mén)話題,發(fā)酵豆粕是其中一種,與傳統(tǒng)豆粕相比,具有很多優(yōu)勢(shì)。液體發(fā)酵在益生菌生產(chǎn)企業(yè)中是一種重要的生產(chǎn)方式,但是液體發(fā)酵完畢,經(jīng)過(guò)收集菌體后,剩余大量離心液,這些離心液里面,不但有殘留的菌體,而且還含有其他對(duì)動(dòng)物生長(zhǎng)有益的物質(zhì)。離心液的處理在巨大的環(huán)保壓力下,成為一個(gè)亟待解決的問(wèn)題。本文研究了運(yùn)用不同菌種的液體發(fā)酵離心液制作發(fā)酵豆粕的工藝,將原本要排放到環(huán)境中的廢棄液充分利用起來(lái),運(yùn)用一種能耗低的,操作簡(jiǎn)單的發(fā)酵方式制作發(fā)酵豆粕。試驗(yàn)得到單菌種液體發(fā)酵離心液最佳發(fā)酵條件。先設(shè)立發(fā)酵溫度、接種量、料水比、發(fā)酵時(shí)間的基礎(chǔ)發(fā)酵條件,四個(gè)因素分別再設(shè)立不同的水平,進(jìn)行發(fā)酵溫度、接種量、料水比和發(fā)酵時(shí)間的單因素試驗(yàn)。在單因素試驗(yàn)獲得結(jié)果的基礎(chǔ)上,進(jìn)行四因素三水平L_9(3~4)試驗(yàn)。試驗(yàn)結(jié)果表明,枯草芽孢桿菌液體發(fā)酵離心液的最佳發(fā)酵條件:發(fā)酵溫度32℃,接種量20%,料水比1:09,發(fā)酵時(shí)間60h。在該水平下,所得的發(fā)酵豆粕的蛋白酶活力為中性蛋白酶239U/g,堿性蛋白酶活力值為128U/g,總和為367U/g;酸溶蛋白含量為12.33%。酵母菌液體發(fā)酵離心液的最佳發(fā)酵條件:發(fā)酵溫度28℃,接種量25%,料水比1:0.8,發(fā)酵時(shí)間60h。在該水平下,所得的發(fā)酵豆粕的酸溶蛋白含量為3.32%,總酸含量為5.73%。乳酸菌液體發(fā)酵離心液的最佳發(fā)酵條件:發(fā)酵溫度28℃,接種量15%,料水比1:09,發(fā)酵時(shí)間60h,在此條件下的發(fā)酵豆粕酸溶蛋白含量為6.84%,總酸含量為6.44%。在前期試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,探索雙菌種發(fā)酵離心液組合時(shí)不同添加比例對(duì)發(fā)酵豆粕的影響。以發(fā)酵溫度30℃,料水比1:0.9,發(fā)酵時(shí)間72h,接種量20%為發(fā)酵條件。測(cè)試雙菌種不同配比情況下,豆粕的營(yíng)養(yǎng)變化。設(shè)定添加比例為3:2、2:1、3:1、1:1、1:3、1:2和2:3。試驗(yàn)結(jié)果表明:枯草芽孢桿菌液體發(fā)酵離心液與酵母菌液體發(fā)酵離心液組合時(shí),最佳添加比例為2:3?莶菅挎邨U菌液體發(fā)酵離心液與乳酸菌液體發(fā)酵離心液組合時(shí),最佳添加比例為1:2。酵母菌液體發(fā)酵離心液與乳酸菌液體發(fā)酵離心液組合時(shí),最佳添加比例為2:1。當(dāng)三種發(fā)酵離心液組合時(shí),設(shè)定添加比例芽孢菌:酵母菌:乳酸菌=1:1:1、1:2:1、1:2:2、1:2:3、1:3:2。最佳比例為1:2:1。各組合最終的發(fā)酵豆粕進(jìn)行抗原蛋白降解情況分析。做SDS-PAGE膠試驗(yàn),將各組與未發(fā)酵的豆粕進(jìn)行條帶對(duì)比,結(jié)果表明,當(dāng)三種菌的發(fā)酵離心液組合發(fā)酵豆粕時(shí),抗原蛋白降解效果最好。各組合發(fā)酵豆粕營(yíng)養(yǎng)成分分析結(jié)果表明,粗蛋白含量較對(duì)照組為發(fā)酵豆粕有所提高,粗灰分較未發(fā)酵豆粕高,粗纖維含量降低,但不明顯;還原糖較未發(fā)酵豆粕具有顯著提高,鈣、磷含量變化不大。
【圖文】:

標(biāo)準(zhǔn)曲線,L-酪氨酸,標(biāo)準(zhǔn)曲線


多菌種發(fā)酵豆粕優(yōu)化工藝研究式中:X-酶活力K-吸光常數(shù)A-樣品平均吸光度4-反應(yīng)體系的總體積n-樣品稀釋倍數(shù)10-反應(yīng)時(shí)間為 10min處酶活定義:1g液體或者固體酶,,在 40℃及相應(yīng) PH條件下 1min 水解酪素g L-酪氨酸為一個(gè)酶活單位,單位為 U/g 或者 U/ml表示。

標(biāo)準(zhǔn)曲線,標(biāo)準(zhǔn)曲線,葡萄糖,還原糖


冷卻至室溫,加蒸餾水定容至 25ml,混勻。分光光度計(jì) 540色,對(duì)照管調(diào)零。以葡萄糖含量為縱坐標(biāo)。以吸光值為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)的標(biāo)準(zhǔn)曲線見(jiàn)圖 2-2.樣品制備.0000g 發(fā)酵豆粕于 100ml 燒杯中,加 50ml 蒸餾水,充分?jǐn)嚢瑁心,還原糖充分溶解,轉(zhuǎn)移至 100ml 容量瓶中定容,此時(shí),已經(jīng)稀釋 100 倍釋適宜的倍數(shù)。結(jié)果計(jì)算測(cè)得的吸光值,利用標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算還原糖濃度。×n/m×100%,X-還原糖含量n-稀釋倍數(shù)m-取樣質(zhì)量
【學(xué)位授予單位】:山東農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類(lèi)號(hào)】:S816.6;TS229

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2593991

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