【摘要】：中草藥具有營(yíng)養(yǎng)和藥用雙重作用,且藥物殘留低,因此研究中草藥對(duì)反芻動(dòng)物日糧營(yíng)養(yǎng)的調(diào)控具有重要的理論和實(shí)際意義。本課題自擬復(fù)方中藥“壯牛靈1、2、3”、“育肥散1、2、3”以及抗熱應(yīng)激復(fù)方,以瘤胃素為參照,以空白為對(duì)照,選擇36頭安裝有永久性瘤胃瘺管山羊,采用隨機(jī)單位平均分組設(shè)計(jì),結(jié)合傳統(tǒng)手段和分子生物學(xué)方法研究其對(duì)山羊瘤胃發(fā)酵和細(xì)菌菌群的影響,探討復(fù)方中藥對(duì)山羊瘤胃發(fā)酵特性的調(diào)控作用。復(fù)方中藥對(duì)山羊瘤胃發(fā)酵的影響采集第20-22日飼喂前Oh和飼喂后2h、4h、6h、8h、10h、12h共計(jì)7個(gè)時(shí)間點(diǎn)的瘤胃液,研究復(fù)方中藥對(duì)山羊瘤胃pH、氨氮(NH3-N)濃度、微生物蛋白(MCP)含量以及揮發(fā)性脂肪酸(VFA)濃度的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：不同復(fù)方中藥對(duì)瘤胃液pH值的影響范圍為6.22-6.91,各組影響差異不顯著(P0.05),但不同復(fù)方中藥組pH均值明顯升高；7種復(fù)方中藥對(duì)NH3-N濃度的影響差異不顯著(P0.05),“育肥散2”組瘤胃內(nèi)MCP含量顯著升高(P0.05),“壯牛靈1”組MCP含量顯著最低(P0.05)；“育肥散2”組總揮發(fā)性脂肪酸顯著高于瘤胃素組(P0.05),其他處理組TVFA含量降低,差異不顯著(P0.05)；“育肥散2”組乙酸顯著高于瘤胃素(P0.05)；除“育肥散2”組外,瘤胃素組丙酸顯著高于其他各組(P0.05),“育肥散2”組丙酸含量升高；“育肥散2”、抗熱應(yīng)激與“壯牛靈3”組丁酸含量顯著升高(P0.05),瘤胃素組丁酸含量顯著低于其他各組(P0.05)；瘤胃素組乙丙比顯著降低(P0.05),“育肥散1”和抗熱應(yīng)激組顯著升高(P0.05)。結(jié)論：所有復(fù)方中藥均能延緩山羊瘤胃內(nèi)pH下降,復(fù)方中藥“育肥散2”顯著增加瘤胃內(nèi)MCP含量,乙酸和丁酸產(chǎn)量增加；其他復(fù)方中藥處理組瘤胃乙酸產(chǎn)量降低,從而使降低VFA濃度,其中“壯牛靈1”和“壯牛靈2”效果較優(yōu)。二、復(fù)方中藥對(duì)山羊瘤胃細(xì)菌菌群的影響提取第20、21、22日晨飼前Oh瘤胃液細(xì)菌DNA,每頭羊不同采集時(shí)間的DNA等量混合,利用細(xì)菌16SrDNA V4區(qū)序列為引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,采用Illumina Miseq PE300測(cè)序,進(jìn)行物種注釋及豐度分析,進(jìn)一步α和β多樣性分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：36個(gè)樣品共得到1,445,331條tags,大約有81%的原始reads通過(guò)了所有質(zhì)量控制,OTU分析顯示樣品Total tags中能夠被注釋到物種的Taxon Tags豐富,各樣品中相似性沒(méi)有到達(dá)97%的OTUs序列大于最終獲得的OTUs數(shù)目。物種注釋顯示在不同的分類(lèi)水平下,除“壯牛靈2”以外,瘤胃素組所獲得的OTUs豐度顯著多于其他組(P0.05),“壯牛靈3”分類(lèi)在各級(jí)別的OTUs主度顯著降低(P0.05)。樣品復(fù)雜度分析發(fā)現(xiàn),空白組與“育肥散1”、“育肥散2”組的樣品物種OTU飽和曲線、Chaol曲線和香農(nóng)指數(shù)較高,其秩多度曲線豐富度和均勻度較高,而瘤胃素、“壯牛靈1”、“壯牛靈3”以及“育肥散3”組樣品物種OTU飽和曲線、Chaol曲線和香農(nóng)指數(shù)低,秩多度曲線其豐富度和均勻度較低�；陂T(mén)分類(lèi)水平上,將所有的序列鑒定為11個(gè)門(mén),其中擬桿菌門(mén)(Bacteroidetes)、變形菌門(mén)(Proteobacteria)和硬壁菌門(mén)(Firmicutes)為所有樣品優(yōu)勢(shì)菌門(mén),“壯牛靈1”、“壯牛靈3”、抗熱應(yīng)激以及瘤胃素組中硬壁菌門(mén)相對(duì)豐度顯著降低(P0.05),此外,瘤胃素組中變形菌門(mén)相對(duì)豐度顯著升高(P0.05)。根據(jù)相對(duì)豐度排在前10的屬進(jìn)行物種注釋,普雷沃氏菌屬(Prevotella)為各樣品中優(yōu)勢(shì)菌屬,琥珀酸弧菌屬(Succinivibrio)在抗熱應(yīng)激和瘤胃素組中比例較高,待定屬TG5在“壯牛靈1”中比例較高。PCoA分析發(fā)現(xiàn)納入本研究的36個(gè)山羊瘤胃菌群呈現(xiàn)連續(xù)分布的特點(diǎn),同一處理“壯牛靈1”、“壯牛靈2”、“育肥散3”、抗熱應(yīng)激、瘤胃素組樣品有聚類(lèi)趨勢(shì),‘壯牛靈1”與“壯牛靈2”樣品有明顯交疊現(xiàn)象。結(jié)論：除“育肥散1”、“育肥散2”外,其他復(fù)方中藥瘤胃菌群群落多樣性顯著降低,其中“壯牛靈3”瘤胃菌群群落豐度顯著降低,所有樣品中變形菌門(mén)(Proteobacteria)、擬桿菌門(mén)(Bacteroidetes)、硬壁菌門(mén)(Firmicutes)為優(yōu)勢(shì)菌門(mén),“壯牛靈1”、“壯牛靈3”、抗熱應(yīng)激對(duì)瘤胃菌群中硬壁菌門(mén)的相對(duì)豐度顯著降低,普雷沃氏菌屬(Prevotella)為36例樣品瘤胃菌群中的優(yōu)勢(shì)菌屬。三、復(fù)方中藥山羊瘤胃纖維降解菌數(shù)量的影響提取第20,21和22日早晨飼喂前(0h)瘤胃液細(xì)菌DNA,應(yīng)用Real-time PCR對(duì)產(chǎn)琥珀酸絲狀桿菌、黃色瘤胃球菌、白色瘤胃球菌進(jìn)行絕對(duì)定量。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：“壯牛靈1”與“育肥散2”組對(duì)白色瘤胃球菌數(shù)量的影響不顯著(P0.05),其他復(fù)方中藥組在白色瘤胃球菌的數(shù)量顯著降低(P0.05)；除瘤胃素組外,“育肥散2”組中黃色瘤胃球菌數(shù)量顯著高于其他各組(P0.05)；瘤胃素組中產(chǎn)琥珀酸絲狀桿菌數(shù)量顯著升高(P0.05),復(fù)方中藥組差異不顯著(P0.05)。結(jié)論：“壯牛靈1”和“育肥散2”對(duì)白色瘤胃球菌數(shù)量無(wú)顯著影響,“育肥散2”顯著促進(jìn)黃色瘤胃球菌的生長(zhǎng)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：西南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：S853.7

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2430245