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牛傳染性鼻氣管炎病毒nano-PCR與LAMP及PCR檢測(cè)方法的對(duì)比研究

發(fā)布時(shí)間:2019-02-15 01:05
【摘要】:本研究應(yīng)用金納米顆粒與PCR結(jié)合建立了牛傳染性鼻氣管炎病毒(BoHV-1)納米PCR(nanoPCR)新型檢測(cè)方法和LAMP可視化檢測(cè)方法,并與普通PCR方法進(jìn)行對(duì)比研究。建立的BoHV-1納米PCR新型分子檢測(cè)方法和LAMP方法,特異性良好,敏感性與LAMP方法和常規(guī)PCR對(duì)比結(jié)果顯示,nano-PCR方法敏感性是LAMP和普通PCR的10倍,最低檢出量為2.23×102copies/L,是普通PCR的100倍;LAMP樣品檢測(cè)用時(shí)最短,50 min即可得到檢測(cè)結(jié)果。臨床樣品的陽(yáng)性檢出率nano-PCR方法最高,檢出陽(yáng)性樣品8/10份(弱陽(yáng)性1份),普通PCR陽(yáng)性檢出率最低,檢出陽(yáng)性樣品3/10份,LAMP檢出6/10份。結(jié)果表明,nano-PCR敏感性和特異性更適合于臨床樣品的檢測(cè)。
[Abstract]:In this study, a new detection method of bovine infectious rhinotracheitis virus (BoHV-1) nanometer PCR (nanoPCR) and a visual detection method of LAMP were established by combining gold nanoparticles with PCR, and compared with common PCR method. The new molecular detection method and LAMP method for BoHV-1 nanometer PCR have good specificity. Compared with LAMP method and conventional PCR, the sensitivity of nano-PCR method is 10 times higher than that of LAMP and PCR, and the lowest detectable amount is 2.23 脳 102 copiesL / L. 100 times as much as normal PCR; The detection time of LAMP sample is the shortest, and the result can be obtained by 50 min. The positive rate of nano-PCR was the highest in clinical samples, with 8 / 10 positive samples (1 weakly positive), the lowest positive rate was common PCR, 3 / 10 positive samples and 6 / 10 LAMP positive samples. The results showed that the sensitivity and specificity of nano-PCR were more suitable for the detection of clinical samples.
【作者單位】: 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所農(nóng)業(yè)部經(jīng)濟(jì)動(dòng)物疫病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室特種動(dòng)物分子生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;東北農(nóng)業(yè)大學(xué);安圖縣畜牧獸醫(yī)總站;吉林省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心;
【基金】:吉林省科技廳項(xiàng)目(20150307024NY);吉林省科技廳項(xiàng)目(20170309002NY) “十三五”國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目(2016YFD0500907)
【分類(lèi)號(hào)】:S852.653

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本文編號(hào):2422797

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