【摘要】：為掌握雞細胞中應(yīng)激顆粒(stress granules,SGs)形成機制,以及雞GTP酶激活蛋白SH3功能區(qū)結(jié)合蛋白1(G3BP1)在新城疫病毒(NDV)感染誘導(dǎo)SG形成過程中的作用,用NDV感染HeLa細胞,免疫熒光試驗檢測內(nèi)源性G3BP1的定位,外源轉(zhuǎn)染雞G3BP1和各分段結(jié)構(gòu)域,以不同應(yīng)激處理之后觀察與內(nèi)源性SG標(biāo)志物共定位現(xiàn)象,最后轉(zhuǎn)染G3BP1之后感染NDV,以Western blot和TCID50檢測病毒復(fù)制情況。結(jié)果顯示:NDV感染能夠誘導(dǎo)內(nèi)源性G3BP1聚集形成SG,將雞G3BP1分別轉(zhuǎn)染至HeLa、DF-1和CEF后,以不同應(yīng)激處理之后均能在細胞中觀察到SG。將雞G3BP1不同結(jié)構(gòu)域分別轉(zhuǎn)染HeLa細胞,以氧化應(yīng)激和NDV分別處理,結(jié)果顯示G3BP1的RNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域?qū)奂陵P(guān)重要,而NTF2樣結(jié)構(gòu)域不能被招募到SGs中,并且抑制原有SGs的形成。最后證實G3BP1過表達能夠增強病毒復(fù)制,說明SG在NDV復(fù)制過程中發(fā)揮促進作用。綜合以上結(jié)果表明:雞G3BP1在雞SG形成過程中至關(guān)重要,雞SG能夠促進NDV復(fù)制,這為進一步研究NDV和禽源細胞互作奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:In order to understand the mechanism of stress granules (stress granules,SGs) formation in chicken cells and the role of SH3 binding protein 1 (G3BP1) in SG formation induced by Newcastle disease virus (NDV), NDV was used to infect HeLa cells. The localization of endogenous G3BP1 was detected by immunofluorescence assay. After exogenous transfection of chicken G3BP1 and its segmental domains, co-localization with endogenous SG markers was observed after different stress treatments. Finally, NDV, was infected after transfection of G3BP1. Western blot and TCID50 were used to detect viral replication. The results showed that NDV infection could induce endogenous G3BP1 aggregation to form SG, transfection of chicken G3BP1 into HeLa,DF-1 and CEF, and SG. could be observed in cells after different stress treatments. Different domains of chicken G3BP1 were transfected into HeLa cells and treated with oxidative stress and NDV respectively. The results showed that the RNA binding domain of G3BP1 was very important for aggregation, but NTF2 like domain could not be recruited into SGs and inhibited the formation of SGs. Finally, it was confirmed that G3BP1 overexpression could enhance viral replication, indicating that SG played a role in NDV replication. The above results show that chicken G3BP1 is very important in the formation of chicken SG, and chicken SG can promote NDV replication, which lays a foundation for further study on the interaction between NDV and avian origin cells.
【作者單位】： 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院;中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海獸醫(yī)研究所;吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金重點項目(31530074);國家自然科學(xué)基金面上項目(31372421);國家自然科學(xué)基金青年基金(31400144)
【分類號】：S852.65

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 李增光;什么是新城疫病毒的基因型──從去冬今春的雞群病情談起[J];山東家禽;2000年06期

2 劉華雷,王永坤,嚴(yán)維巍,朱國強,周繼宏,田慧芳;中國部分地區(qū)新城疫病毒的分子流行病學(xué)研究[J];揚州大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2001年01期

3 王忠田,王澤霖,陳溥言,楊漢春;新城疫病毒分子生物學(xué)最新研究進展[J];動物醫(yī)學(xué)進展;2002年02期

4 吳艷濤,倪雪霞,萬洪全,劉文博,劉秀梵;我國部分地區(qū)不同動物來源新城疫病毒的分子流行病學(xué)研究[J];病毒學(xué)報;2002年03期

5 熊永忠,王秀榮,曹殿軍,劉培欣,張勇;鴿源新城疫病毒的分離與鑒定[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);2002年05期

6 成大榮,徐建生,朱麗華,賁巧云,繆曉斌,金山;免疫蛋雞攜帶新城疫病毒的調(diào)查研究[J];動物醫(yī)學(xué)進展;2004年01期

7 錢忠明,宋紅芹,錢晨,陳義平;鴨源新城疫病毒的生物學(xué)特性[J];中國家禽;2005年06期

8 錢晨,錢忠明,印繼華;鴨源新城疫病毒的分離鑒定及生物學(xué)特性[J];揚州大學(xué)學(xué)報;2005年03期

9 張鶴曉,高志強,賴平安,張利峰,谷強,楊偉,劉繼紅,郭晉優(yōu),段生濤,張向東;新城疫病毒通用型實時RT-PCR檢測方法的建立與應(yīng)用[J];動物醫(yī)學(xué)進展;2005年11期

10 黃勇;;新城疫病毒的演化[J];養(yǎng)禽與禽病防治;2006年08期

相關(guān)會議論文 前10條

1 魯會軍;劉昊;張丹;金擴世;金寧一;;新城疫病毒進化與跨種感染[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會家畜傳染病學(xué)分會第七屆全國會員代表大會暨第十三次學(xué)術(shù)研討會論文集（上冊）[C];2009年

2 孫玉章;母連志;丁壯;;新城疫病毒載體的研究及應(yīng)用進展[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會家畜傳染病學(xué)分會第七屆全國會員代表大會暨第十三次學(xué)術(shù)研討會論文集（上冊）[C];2009年

3 楊帆;岳華;湯承;侯巍;;靶向新城疫病毒NP基因shRNA重組腺病毒載體的構(gòu)建[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會禽病學(xué)分會第十四次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2008年

4 劉華雷;王志亮;吳延功;鄭東霞;孫承英;趙云玲;徐天剛;;2002-2007年355株中國新城疫病毒分子流行病學(xué)分析[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會禽病學(xué)分會第十四次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2008年

5 任濤;王琴;羅開健;張桂紅;廖明;;新城疫病毒單克隆抗體的制備及鑒定[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會畜牧獸醫(yī)生物技術(shù)學(xué)分會暨中國免疫學(xué)會獸醫(yī)免疫分會第七次研討會論文集[C];2008年

6 孟春春;張向樂;孫英杰;仇旭升;陳鴻軍;于圣青;丁鏟;;新城疫病毒感染腫瘤細胞后能誘導(dǎo)自噬的發(fā)生[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會獸醫(yī)公共衛(wèi)生學(xué)分會第三次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2012年

7 胡增壘;胡順林;胡嬌;宋慶慶;丁平云;朱杰;劉曉文;王曉泉;劉秀梵;;基因Ⅶd亞型新城疫病毒高度侵害雞免疫系統(tǒng)的重要機制[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會禽病學(xué)分會第十六次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2012年

8 劉家國;徐玉鳳;趙彪;王德云;范云鵬;胡元亮;;板藍根生物堿酸性部位對新城疫病毒吸附、釋放的影響[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會2010年學(xué)術(shù)年會——第二屆中國獸醫(yī)臨床大會論文集(下冊)[C];2010年

9 瞿國潤;吳艷濤;張如寬;劉秀梵;;我國部分地區(qū)新城疫病毒分子流行病學(xué)及其生物學(xué)特性的研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會禽病學(xué)會分會第十次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2000年

10 劉華雷;王永坤;嚴(yán)維巍;朱國強;;我國部分地區(qū)新城疫病毒的流行現(xiàn)狀分析[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會禽病學(xué)分會第十一次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2002年

相關(guān)重要報紙文章 前5條

1 哈冰;揭開新城疫病毒奧秘的曹殿軍[N];農(nóng)民日報;2001年

2 秦衛(wèi)紅;種鵝感染新城疫病毒的診斷[N];中國畜牧獸醫(yī)報;2013年

3 寧啟文;我國研制成功H5亞型禽流感重組新城疫病毒活載體雙價疫苗[N];農(nóng)民日報;2005年

4 劉萬珍;哪些畜禽不能混養(yǎng)[N];農(nóng)民日報;2013年

5 ;夏季怎樣提高養(yǎng)雞效益[N];中國畜牧獸醫(yī)報;2008年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 郝華芳;新城疫病毒V蛋白結(jié)合MDA5抑制DF-1細胞IFN-β生成的功能域研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2015年

2 朱杰;2008-2013年華東地區(qū)新城疫病毒分子流行病學(xué)及HN基因E347K變異對病毒抗原性的影響[D];揚州大學(xué);2015年

3 曹永忠;新城疫病毒生物信息分析系統(tǒng)的構(gòu)建及其全基因組的比較研究[D];揚州大學(xué);2009年

4 王元;重組新城疫病毒rNDV-18HL的構(gòu)建及抗腫瘤靶向作用機制研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2014年

5 孫英杰;新城疫病毒誘導(dǎo)宿主細胞應(yīng)激顆粒形成機制的研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2015年

6 李曉霞;新城疫病毒氣溶膠發(fā)生與傳染機制及其在生產(chǎn)雞舍環(huán)境中的監(jiān)測[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

7 程相朝;新城疫病毒地方株分子流行病學(xué)調(diào)查及其疫病控制[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2003年

8 胡海霞;表達C亞型禽偏肺病毒糖蛋白和融合蛋白的重組新城疫病毒二價苗的構(gòu)建及免疫效力評價[D];吉林大學(xué);2011年

9 詹媛;新城疫病毒通過激活真核翻譯起始因子4F促進病毒增殖[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2014年

10 聞曉波;新城疫病毒樣顆粒的構(gòu)建及其出芽機制的研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2006年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 孫娜娜;表達雞傳染性喉氣管炎病毒gI和gB基因的重組新城疫病毒的研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2015年

2 王海新;新城疫病毒蛋白特異性抗血清的研制[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2015年

3 劉蓬;中國中部候鳥遷徙區(qū)基因Ⅸ型新城疫病毒的分離鑒定與遺傳進化分析[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2015年

4 祁芳;表達雞傳染性喉氣管炎病毒gB基因重組新城疫病毒的構(gòu)建及其拯救[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

5 梁殊林;表達新城疫病毒HN蛋白重組鴨腸炎病毒的構(gòu)建[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

6 吳偉;鴨源新城疫病毒部分中國分離株生物學(xué)特性研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

7 張婷婷;兩種不同來源新城疫病毒的感染對雞免疫作用的分子機制[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

8 徐倩倩;鵝源新城疫病毒感染對鵝免疫功能作用的分子機制[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

9 王曉旭;新城疫病毒誘導(dǎo)宿主細胞應(yīng)激顆粒形成機制的初步探究[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

10 丁云磊;新城疫病毒降解線粒體抗病毒信號蛋白MAVS的機制研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

，

本文編號：2418429