【摘要】：以GenBank公布的大腸桿菌OmpA基因序列、沙門氏菌invA基因序列、禽多殺性巴氏桿菌基因序列(U51470)為靶基因,設(shè)計(jì)合成了3對(duì)引物,分別擴(kuò)增大小約為266bp、801bp和445bp的片段,優(yōu)化反應(yīng)條件,建立多重PCR反應(yīng)體系,并對(duì)臨床樣品進(jìn)行模擬檢測(cè),結(jié)果顯示:該反應(yīng)體系對(duì)目的菌具有高度的特異性,對(duì)三種菌的檢測(cè)下限為10~5CFU/ml;對(duì)24份臨床可疑病料檢測(cè)結(jié)果與細(xì)菌分離結(jié)果一致,證明該多重PCR檢測(cè)方法的誠實(shí)可靠,可用于三種菌的快速檢測(cè)。
[Abstract]:Using Escherichia coli OmpA gene sequence, Salmonella invA gene sequence and Pasteurella multocida gene sequence (U51470) published by GenBank as target genes, three pairs of primers were designed and synthesized. The reaction conditions were optimized and the multiplex PCR reaction system was established. The results showed that the reaction system was highly specific to the target bacteria and the detection limit for the three strains was 10 ~ 5 CFU / ml. The results of 24 clinical suspicious samples were consistent with the results of bacterial isolation, which proved that the multiplex PCR detection method was reliable and could be used for rapid detection of three kinds of bacteria.
【作者單位】： 山東畜牧獸醫(yī)職業(yè)學(xué)院;
【分類號(hào)】：S852.61

【參考文獻(xiàn)】

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1 邱剛;芮亞培;;朗德鵝 大腸桿菌 葡萄球菌混合感染診治[J];四川畜牧獸醫(yī);2013年11期

2 李佳桐;毛文智;邵洪澤;白翠;許堯;金鑫;;沙門菌PCR檢測(cè)方法的建立[J];吉林畜牧獸醫(yī);2013年09期

3 許英民;;鵝填飼時(shí)幾種常見疾病的防治[J];水禽世界;2013年04期

4 安俊卿;張紅壘;童德文;許信剛;;沙門菌、巴氏桿菌和大腸埃希菌多重PCR檢測(cè)方法的建立[J];西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào);2013年07期

5 張斌;朱曉霞;岳華;湯承;;青藏高原部分地區(qū)牦牛源沙門菌血清型及毒力基因的調(diào)查[J];畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào);2013年07期

6 吳林;汪云崗;肖智遠(yuǎn);姜文聯(lián);邱深本;劉思伽;;大蒜對(duì)有機(jī)肉鵝幾種常見非病毒性傳染病的預(yù)防效果觀察[J];水禽世界;2013年03期

7 楊澤曉;周香;王印;姚學(xué)萍;汪開毓;;肉鵝巴氏桿菌病的診治[J];動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2013年01期

8 肖敏;周興波;尹敏;高保雄;李海玲;劉家敏;楊煥理;;鵝的幾種常見病及防治[J];湖北畜牧獸醫(yī);2013年01期

9 龐耀珊,謝芝勛,M.I.Khan;二溫式多重PCR同時(shí)檢測(cè)雞的6種呼吸道病病原方法的建立[J];中國獸醫(yī)科技;2001年05期

【共引文獻(xiàn)】

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1 柏雪;郭春華;劉少文;譚子璇;陳宇;文勇立;;青藏高原部分地區(qū)牦牛與黃牛源沙門氏菌的分離鑒定與藥敏實(shí)驗(yàn)[J];食品工業(yè)科技;2017年02期

2 李婧;王成森;;朗德鵝大腸桿菌、沙門氏菌、多殺性巴氏桿菌三重PCR快速檢測(cè)技術(shù)研究[J];水禽世界;2016年06期

3 劉媛;李學(xué)伍;王麗;谷雨;王林建;;雞4種主要RNA病毒病多重感染復(fù)合PCR檢測(cè)方法的建立[J];河南農(nóng)業(yè)科學(xué);2016年11期

4 楊澤曉;劉常鈺;王印;姚學(xué)萍;鄔旭龍;王波;李桂黎;蒙正群;劉亞東;;一株鵝源多殺性巴氏桿菌強(qiáng)毒株的分離鑒定及其血清型鑒定相關(guān)基因的克隆[J];浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào);2016年06期

5 馬銳;黃小波;楊國淋;滑翔;趙玉佳;;多重PCR技術(shù)在豬病檢測(cè)中的應(yīng)用[J];四川畜牧獸醫(yī);2016年05期

6 林星宇;胡凌;王印;楊澤曉;姚學(xué)萍;肖璐;任梅滲;曾相杰;;豬源多殺性巴氏桿菌的分離鑒定及莢膜血清分型[J];浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào);2016年04期

7 趙嬋娟;;灰天鵝巴氏桿菌病的診治[J];養(yǎng)殖與飼料;2016年03期

8 劉再超;劉夢(mèng)佳;高淑娟;李延清;賀麗紅;;牛沙門菌病概述[J];畜牧獸醫(yī)雜志;2015年06期

9 林星宇;王印;楊澤曉;姚學(xué)萍;胡凌;彭善珍;鄔旭龍;;豬源莢膜血清F型多殺性巴氏桿菌的分離鑒定[J];中國獸醫(yī)科學(xué);2015年06期

10 雷占東;張斌;岳華;黃志宏;湯承;;一株牦牛源御成門沙門菌對(duì)小鼠的致病性[J];畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào);2015年02期

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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1 袁圣丹;袁生;張秋;;種鵝巴氏桿菌病的診斷及防治[J];畜禽業(yè);2011年08期

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3 馬驛;陳欽旭;陳秀眉;陳均玉;彭金菊;;鵝巴氏桿菌病病原分離鑒定及中西藥聯(lián)用抑菌試驗(yàn)[J];中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志;2011年02期

4 段新華;李建軍;楊學(xué)云;王登峰;王治才;;不同血清型牛源巴氏桿菌多重PCR檢測(cè)方法的建立[J];中國畜牧獸醫(yī);2010年08期

5 趙玉玲;張?zhí)焐?張巧艷;;PCR法快速檢測(cè)肉食品污染沙門菌的實(shí)驗(yàn)研究[J];微生物學(xué)雜志;2010年03期

6 楊澤曉;龐歌;王印;姚學(xué)萍;張彥明;楊增岐;汪開毓;楊波;;白鷺大腸埃希菌的分離鑒定與藥敏試驗(yàn)[J];動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2010年04期

7 李偉杰;趙耘;杜昕波;康凱;陳敏;;產(chǎn)毒素多殺性巴氏桿菌菌落雙重PCR檢測(cè)方法的建立[J];中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào);2010年04期

8 陳健雄;;2010年豬病流行趨勢(shì)及控制策略[J];養(yǎng)豬;2010年02期

9 焦新安;涂長春;黃金林;馮書章;;我國食源性人獸共患細(xì)菌病流行現(xiàn)狀及其防控對(duì)策[J];中國家禽;2009年19期

10 周延峰;蔣欣梅;于廣建;;大蒜素提取條件的優(yōu)化及其抑菌效果的研究[J];東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2009年06期

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2 安電進(jìn);曹樹澤;劉尚高;;兔多殺性巴氏桿菌監(jiān)測(cè)試驗(yàn)[J];河北畜牧獸醫(yī);1993年02期

3 劉建杰,吳斌,陳煥春;豬萎縮性鼻炎產(chǎn)毒多殺性巴氏桿菌的研究進(jìn)展[J];動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2002年01期

4 唐先春,吳斌,陳煥春;產(chǎn)毒多殺性巴氏桿菌研究進(jìn)展[J];動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2003年05期

5 唐先春,吳斌,索緒峰,王大林,陳煥春,尹爭(zhēng)艷;豬多殺性巴氏桿菌的分離鑒定及生物學(xué)特性研究[J];畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào);2005年06期

6 曾靜雯;劉慧芳;沈琴芳;鄭新添;余旭平;吳彤;李永明;周碧君;王開功;;多殺性巴氏桿菌鑒定與特性研究的分子生物學(xué)方法[J];中國獸藥雜志;2006年04期

7 楊發(fā)龍;張煥容;夏夢(mèng)蕓;于學(xué)輝;湯承;岳華;;禽A型多殺性巴氏桿菌的分離和鑒定[J];四川畜牧獸醫(yī);2008年05期

8 譚雙;余旭平;黃賢波;;多殺性巴氏桿菌基因組分泌蛋白的預(yù)測(cè)分析[J];湖北農(nóng)業(yè)科學(xué);2009年11期

9 高明燕;徐步;趙寶華;范建華;龔建森;劉學(xué)賢;;多殺性巴氏桿菌檢測(cè)、鑒定和分型研究進(jìn)展[J];動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2010年01期

10 謝波;朱必鳳;楊旭夫;;多殺性巴氏桿菌抗原的研究進(jìn)展[J];韶關(guān)學(xué)院學(xué)報(bào);2010年03期

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2 余旭平;朱軍莉;何世成;王麗輝;牛冬;阮輝;;多殺性巴氏桿菌跨膜蛋白基因片段的克隆與分析[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)家畜傳染病學(xué)分會(huì)成立20周年慶典暨第十次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集（下）[C];2003年

3 唐先春;吳斌;索緒峰;王大林;陳煥春;尹爭(zhēng)艷;;豬多殺性巴氏桿菌的分離鑒定及生物學(xué)特性研究[A];第一屆中國養(yǎng)豬生產(chǎn)和疾病控制技術(shù)大會(huì)——2005中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2005年

4 李任峰;戴金康;王絹;王三虎;鄭玉姝;劉麗艷;;新鄉(xiāng)地區(qū)兔巴氏桿菌的分離與鑒定[A];第四屆第九次全國學(xué)術(shù)研討會(huì)暨飼料和動(dòng)物源食品安全戰(zhàn)略論壇論文集（下冊(cè)）[C];2008年

5 楊寶鳳;鄒靈秀;李能章;黃園媛;吳建云;王自力;魏學(xué)良;彭遠(yuǎn)義;;6株牛源多殺性巴氏桿菌A型的分離鑒定及其部分生物學(xué)特性比較分析[A];第四屆全國牛病防制及產(chǎn)業(yè)發(fā)展大會(huì)論文集[C];2012年

6 彭遠(yuǎn)義;;牛源多殺性巴氏桿菌A型相關(guān)研究[A];第四屆全國牛病防制及產(chǎn)業(yè)發(fā)展大會(huì)論文集[C];2012年

7 楊寶鳳;周偉;李能章;胡娟;夏天;徐亞麗;王自力;魏學(xué)良;吳建云;彭遠(yuǎn)義;;兩株牛源多殺性巴氏桿菌的分離鑒定[A];中國奶業(yè)協(xié)會(huì)第26次繁殖學(xué)術(shù)年會(huì)暨國家肉牛牦牛/奶牛產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系第3屆全國牛病防治學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2011年

8 龍青山;李能章;鄒靈秀;黃園媛;楊寶鳳;吳建云;王自力;魏學(xué)良;彭遠(yuǎn)義;;6株牛源多殺性巴氏桿菌A型主要毒力基因的比較分析[A];第四屆全國牛病防制及產(chǎn)業(yè)發(fā)展大會(huì)論文集[C];2012年

9 李峰;沈志強(qiáng);吳信明;劉吉山;林初文;;蜂膠對(duì)禽源多殺性巴氏桿菌與大腸桿菌的抑菌試驗(yàn)[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)禽病學(xué)分會(huì)第十一次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2002年

10 王紅琳;廖永洪;楊峻;羅玲;羅青平;艾地云;溫國元;張蓉蓉;邵華斌;;湖北地方土雞多殺性巴氏桿菌的分離和PCR鑒定[A];第二屆中國黃羽肉雞行業(yè)發(fā)展大會(huì)會(huì)刊[C];2010年

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1 山西太原神龍應(yīng)用技術(shù)有限公司 李寶麗;豬多殺性巴氏桿菌感染的救治[N];中國畜牧報(bào);2002年

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1 郭東春;多殺性巴氏桿菌兔體內(nèi)差異表達(dá)基因及其突變株構(gòu)建的研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2012年

2 湯細(xì)彪;豬源多殺性巴氏桿菌的分子流行病學(xué)與致病性研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

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2 馮思源;牛源多殺性巴氏桿菌粘附相關(guān)基因的體內(nèi)表達(dá)及FimA蛋白功能的研究[D];西南大學(xué);2015年

3 李春明;基于抗原抗體反應(yīng)的牛源A型多殺性巴氏桿菌保護(hù)性抗原的篩選及鑒定[D];西南大學(xué);2015年

4 楊敬;鴨源多殺性巴氏桿菌的分離鑒定和生物學(xué)特性[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

5 羅璇;鴨源多殺性巴氏桿菌油乳劑滅活疫苗的制備與應(yīng)用[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

6 常春龍;牛多殺性巴氏桿菌菌影疫苗的制備及其免疫效力分析[D];黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué);2016年

7 任靜靜;牛多殺性巴氏桿菌通過NF-κB/MAPK-NLRP3/NLRP6誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)研究[D];西南大學(xué);2016年

8 李海娥;牛源A型多殺性巴氏桿菌強(qiáng)弱毒株差異基因篩選及初步分析[D];西南大學(xué);2016年

9 孫久鶴;多殺性巴氏桿菌分型分析及其感染雞IL-1β，，IL-6轉(zhuǎn)錄變化研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

10 劉順磊;牛源A型巴氏桿菌的分離鑒定及菌影疫苗的初步研究[D];石河子大學(xué);2016年

本文編號(hào)：2414225