【摘要】：本試驗?zāi)康氖翘剿黧w外成熟培養(yǎng)過程中豬卵母細(xì)胞GV期和MⅡ期透明帶蛋白泛素化水平以及PSMD4對透明帶蛋白泛素化的影響,探討豬卵透明帶蛋白泛素化在精卵結(jié)合中的作用,為降低多精入卵提高豬精子生育力提供理論基礎(chǔ)和參考依據(jù)。從而,通過了解豬卵母細(xì)胞的生物學(xué)特性,優(yōu)化卵母細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù)、體外受精技術(shù)等輔助生殖技術(shù),避免卵母細(xì)胞體外培養(yǎng)對透明帶泛素化水平的影響導(dǎo)致的一些安全問題。本試驗主要采用SDS-PAGE、Western blot等試驗方法對不同處理的豬卵母細(xì)胞透明帶蛋白樣品進(jìn)行分析,試驗結(jié)果如下：GV期與MⅡ期豬卵母細(xì)胞透明帶蛋白(ZP)免疫印跡結(jié)果顯示約65 kDa、85 kDa和120 kDa處發(fā)生不同程度的泛素化標(biāo)記,且泛素化條帶的灰度值都差異顯著,表明豬卵母細(xì)胞體外成熟過程中透明帶蛋白均發(fā)生不同程度的泛素化。成熟培養(yǎng)液中添加PSMD4抗體對豬卵母細(xì)胞透明帶蛋白影響的免疫印跡結(jié)果顯示在120 kDa處,未添加PSMD4抗體組標(biāo)記出泛素化蛋白ZP1,而添加PSMD4抗體組未標(biāo)記出泛素化蛋白ZP1,兩組65 kDa、85 kDa處均標(biāo)記出的不同程度的泛素化。對條帶進(jìn)行灰度值分析發(fā)現(xiàn),兩組的條帶灰度值差異顯著。說明ZP1蛋白在PSMD4抗體的參與下未發(fā)生泛素化,而ZP2、ZP3泛素化水平下降。不同培養(yǎng)時間的豬卵母細(xì)胞透明帶蛋白(ZP)免疫印跡結(jié)果顯示約在65 kDa、85 kDa和120 kDa處均標(biāo)記出泛素化蛋白,且52 h之后透明帶泛素化程度均有所下降。說明卵母細(xì)胞成熟過程中,隨著培養(yǎng)時間的延長,卵母細(xì)胞老化,由于游離的泛素分子減少,透明帶蛋白的泛素化水平降低。
[Abstract]:The aim of this study was to explore the level of GV and M 鈪，

本文編號：2386515