【摘要】：接觸傳染性豬胸膜肺炎是由豬胸膜肺炎放線桿菌感染引起的危害嚴重的急性呼吸道傳染性疾病,研究其致病的分子細胞機制和疫苗有重要意義。探討革蘭氏陰性菌胸膜肺炎放線桿菌感染小鼠致肺病變的分子細胞機制。通過滴鼻法感染小鼠,觀察肺組織病變。RT-PCR和qPCR方法檢測小鼠肺部的Caspase-1等細胞因子表達量的變化。結果發(fā)現(xiàn)小鼠在感染后觀察到小鼠肺部有嚴重出血和炎癥。實驗組小鼠肺組織IL-1β、IL-6、IL-18和TNF-a的表達水平顯著增加：TLR4的表達量顯著上調；肺部組織Caspase-1的表達水平明顯升高,而Caspase-3的表達水平未見明顯變化。由此可以得出,TLR-4信號通路可能參與App感染引起的肺部炎癥的發(fā)生,App感染后激活Toll.-4信號通路使有關細胞釋放炎癥因子,引起的肺部炎癥。炎癥可能涉及Caspase-1參與的細胞焦亡。為驗證APP外膜蛋白P2是否可能具有成為疫苗的候選分子,誘導小鼠抗攻擊感染的保護力。利用基因重組技術制備重組APP外膜蛋白P2 (rompP2), rompP2加鋁佐劑皮下注射免疫小鼠,免疫前和感染前ELISA檢測小鼠血液抗體水平變化,第3次免疫后2周攻擊感染觀察小鼠的免疫保護效果。結果表明,rompP2皮下注射免疫可誘導小鼠產生免疫應答和較高的抗攻擊感染的免疫保護力。App ompP2的體外重組蛋白rompP2具有很好的免疫原性和一定的誘導抗攻擊感染的免疫保護力。
[Abstract]:Exposure to infectious porcine pleuropneumonia is a serious acute respiratory infectious disease caused by Actinobacillus pleuropneumoniae. It is of great significance to study the molecular cellular mechanism and vaccine of infectious porcine pleuropneumonia. To investigate the molecular cellular mechanism of actinobacillus pleuropneumoniae infection in mice with Gram-negative bacteria. RT-PCR and qPCR methods were used to detect the expression of Caspase-1 and other cytokines in the lung of mice. The results showed that severe hemorrhage and inflammation were observed in the lungs of mice after infection. The expression levels of IL-1 尾, IL-6,IL-18 and TNF-a in the lung tissues of the experimental group were significantly increased: the expression of TLR4 was up-regulated, the expression of Caspase-1 in the lung tissue was significantly increased, but the expression level of Caspase-3 was not significantly changed. It can be concluded that the TLR-4 signaling pathway may be involved in the occurrence of pulmonary inflammation induced by App infection, and the activation of Toll.-4 signaling pathway after App infection can release inflammatory factors and cause pulmonary inflammation. Inflammation may involve the involvement of Caspase-1 in the pyrolysis of cells. In order to verify whether APP outer membrane protein P2 may be a candidate molecule for vaccine, it can induce the protection of mice against attack infection. The recombinant APP outer membrane protein P2 (rompP2) was prepared by gene recombination technique. RompP2 and aluminum adjuvant were injected subcutaneously to immunize mice. The changes of blood antibody levels were detected before and before infection with ELISA. The immune protection of mice was observed 2 weeks after the third immunization. The results showed that the subcutaneous injection of rompP2 could induce the immune response and the immune protection of mice against attack infection, and the recombinant protein rompP2 of App ompP2 had good immunogenicity and certain immune protection against attack infection.
【學位授予單位】：湖南農業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：S858.28

【參考文獻】

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本文編號：2376099