【摘要】：腹瀉是導(dǎo)致斷奶仔豬死亡的主要疾病,給養(yǎng)豬業(yè)帶來(lái)了巨大經(jīng)濟(jì)損失。E.coli F18菌株是引起斷奶仔豬腹瀉的主要病原菌。目前中國(guó)地方品種斷奶仔豬抗E.coli F18的遺傳基礎(chǔ)和調(diào)控機(jī)制尚不清楚,而且國(guó)內(nèi)地方品種對(duì)E.coli F18的抗性基因和遺傳機(jī)制可能有別于外來(lái)引進(jìn)品種�；蛐酒案咄繙y(cè)序等技術(shù)為E.Coli F18抗性候選基因的篩選提供了有力手段,但其前提需要獲得斷奶仔豬E.coli F18抗性型和敏感型全同胞個(gè)體,因此地方豬品種極端表型個(gè)體有效的篩選和鑒定已成為其抗性遺傳基礎(chǔ)研究的關(guān)鍵和瓶頸。此外,研究報(bào)道針對(duì)仔豬細(xì)菌性腹瀉,目前人為的細(xì)菌攻毒試驗(yàn)是獲取素材的較好途徑。本研究以中國(guó)地方品種—梅山豬斷奶仔豬為研究對(duì)象,采用E.coli F18ac菌株攻毒試驗(yàn),并利用腸道細(xì)菌檢測(cè)、細(xì)菌計(jì)數(shù)以及小腸上皮細(xì)胞黏附試驗(yàn)等方法進(jìn)行驗(yàn)證,以期獲得E.coli F18抗性型和敏感型個(gè)體,為今后研究梅山豬抗E.coli F18遺傳機(jī)理提供寶貴素材,同時(shí)也為中國(guó)地方豬品種細(xì)菌性疾病模型的建立提供指導(dǎo)和參考。其次,結(jié)合課題組前期在蘇太豬上的研究進(jìn)展,對(duì)鞘糖脂生物合成—球系列通路及炎癥免疫通路相關(guān)基因在梅山豬攻毒群體中的表達(dá)水平進(jìn)行初步探究,旨在分析梅山豬E.coli F18腹瀉抗性的調(diào)控通路及關(guān)鍵基因,最終為國(guó)內(nèi)地方豬品種E.coli F18腹瀉的抗病育種提供一定的科學(xué)依據(jù)。主要試驗(yàn)結(jié)果如下：1、梅山仔豬攻毒后出現(xiàn)腹瀉、輕度腹瀉和不腹瀉3種不同表型。腹瀉仔豬腸道內(nèi)容物中的E.coli F18數(shù)量遠(yuǎn)多于正常仔豬；黏附試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)腹瀉仔豬小腸上皮細(xì)胞大量黏附E.coli F18,而正常仔豬小腸上皮細(xì)胞與E.coli F18基本不黏附；病理組織切片結(jié)果表明,重度腹瀉仔豬病變腸道組織間隙充血,黏膜層絨毛脫落、長(zhǎng)度縮短,由此可以推測(cè)E.coli F18與仔豬小腸上皮細(xì)胞受體結(jié)合后破壞了黏膜層絨毛的完整性,從而定居繁殖造成仔豬腹瀉。綜合上述結(jié)果,本試驗(yàn)仔豬腹瀉確實(shí)由攻毒造成,獲得了E.coli F18抗性型和敏感型仔豬全同胞個(gè)體,即成功建立梅山豬斷奶仔豬腹瀉模型,為今后豬細(xì)菌性腹瀉遺傳基礎(chǔ)研究素材和抗病育種基礎(chǔ)群的獲得提供了切實(shí)有效的方法和途徑。2、試驗(yàn)采用RT-PCR技術(shù)對(duì)鞘糖脂生物合成.—球系列及炎癥免疫通路相關(guān)基因在梅山豬E. coli F18抗性型和敏感型個(gè)體間的表達(dá)水平進(jìn)行探究。結(jié)果表明,鞘糖脂生物合成一球系列通路相關(guān)基因在抗性和敏感個(gè)體間的組織表達(dá)水平均沒(méi)有顯著差異(P0.05)；E.coli F18抗性組仔豬脾臟中的IL-1β、TNF-α基因表達(dá)量顯著高于敏感組(P0.05),抗性組淋巴結(jié)中的TNF-a基因表達(dá)量顯著高于敏感組(P0.05),抗性組胸腺中的SLA-3基因表達(dá)量也顯著高于敏感組(P0.05),此外BPI基因在抗性仔豬十二指腸中的表達(dá)量極顯著高于敏感個(gè)體(P0.01)。以上結(jié)果進(jìn)一步表明中國(guó)地方豬品種與外來(lái)品種抗E. coli F18的遺傳基礎(chǔ)和調(diào)控機(jī)制確實(shí)存在差異,在外來(lái)品種中發(fā)揮重要調(diào)控作用的鞘糖脂生物合成—球系列通路并未在梅山斷奶仔豬抗E. coli F18感染的過(guò)程中起到重要的調(diào)控作用,而炎癥免疫通路及相關(guān)基因?qū)τ诿飞綌嗄套胸i大腸桿菌抗性可能存在重要的調(diào)控作用。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：揚(yáng)州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：S858.28

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本文編號(hào)：2369026