【摘要】：為了探究Wnt11(無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員11)對鴨骨骼肌成肌細(xì)胞增殖的影響以及可能與Wnt11相關(guān)的信號通路,采用體外分離培養(yǎng)鴨骨骼肌成肌細(xì)胞,脂質(zhì)體介導(dǎo)siRNA(小干擾RNA)轉(zhuǎn)染干擾基因的表達(dá),qRT-PCR(實(shí)時熒光定量PCR)檢測基因表達(dá)變化,Ed U(5-乙炔基-2'-脫氧尿苷)染色分析細(xì)胞增殖情況,流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期變化及信號通路抑制劑處理。結(jié)果顯示:干擾Wnt11的表達(dá)后,增殖相關(guān)基因CCND1(細(xì)胞周期蛋白D1)、CDK6(周期蛋白依賴性激酶6)和PCNA(增殖細(xì)胞核抗原)的表達(dá)量極顯著降低(P0.01),Ed U陽性細(xì)胞數(shù)極顯著降低(P0.01),處于S期的細(xì)胞數(shù)顯著降低(P0.05);當(dāng)用Akt(蛋白激酶B)抑制劑處理鴨成肌細(xì)胞后,Wnt11表達(dá)量顯著降低(P0.05),而干擾Wnt11表達(dá)后,PI3K(磷脂酰肌醇-3-羥激酶)和Akt的表達(dá)量顯著升高(P0.05)。提示:Wnt11在鴨成肌細(xì)胞增殖過程中有重要調(diào)控作用,Wnt11發(fā)揮調(diào)控作用需要PI3K/Akt信號通路參與,且二者間存在反饋?zhàn)饔谩?br/>[Abstract]:To investigate the effect of Wnt11 (wingless MMTV integration site family 11) on the proliferation of duck skeletal muscle myoblasts and the signal pathways associated with Wnt11, duck skeletal muscle myoblasts were isolated and cultured in vitro. Liposome mediated siRNA (small interfering RNA) transfection interference gene expression, qRT-PCR (real-time fluorescent quantitative PCR) detection of gene expression changes, Ed U (5-acetyl-2 deoxyuridine staining analysis of cell proliferation. Cell cycle changes and signal pathway inhibitor treatment were detected by flow cytometry. The results showed that the expression of proliferation-related genes CCND1 (cyclin D1), CDK6 (cyclin dependent kinase 6) and PCNA (proliferating cell nuclear antigen) decreased significantly after interfering with Wnt11 expression (P0.01). The number of Ed U positive cells decreased significantly (P0.01), and the number of S phase cells decreased significantly (P0.05). After treated with Akt (protein kinase B) inhibitor, the expression of Wnt11 decreased significantly (P0.05), but after interfering with Wnt11 expression, the expression of PI3K (phosphatidylinositol-3-hydroxykinase) and Akt increased significantly (P0.05). The results suggest that Wnt11 plays an important role in the proliferation of duck myoblasts, and Wnt11 plays a role in the regulation of PI3K/Akt signaling pathway, and there is feedback between them.
【作者單位】： 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院;南京市畜牧家禽科學(xué)研究所;
【基金】：江蘇省農(nóng)業(yè)科技自主創(chuàng)新資金項(xiàng)目(CX(11)1033) 國家科技支撐項(xiàng)目(2013BAD20B05)
【分類號】：S834

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本文編號：2364851