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節(jié)桿菌HW08全基因組分析及其特性研究

發(fā)布時(shí)間:2021-03-06 12:44
  苦馬豆素(swainsonine,SW)是瘋草的主要有毒成分,可以抑制α-甘露糖苷酶和甘露糖苷酶II的活性,導(dǎo)致低聚糖貯積癥。動(dòng)物攝入過(guò)量苦馬豆素后會(huì)表現(xiàn)出失重、精神抑郁、行為改變、不孕不育等臨床病理特征,目前仍缺乏有效的防治方法。微生物降解苦馬豆素可作為防治動(dòng)物中毒的一種新思路。本實(shí)驗(yàn)室分離出的節(jié)桿菌HW08(Arthrobacter sp.HW08)能高效降解苦馬豆素。為了揭示節(jié)桿菌HW08降解苦馬豆素的機(jī)制,探究節(jié)桿菌在惡劣環(huán)境中的生存策略,本研究對(duì)節(jié)桿菌HW08進(jìn)行了全基因組測(cè)序、注釋和分析;并結(jié)合注釋結(jié)果對(duì)節(jié)桿菌HW08的底物利用多樣性、抗生素抗性和質(zhì)粒等進(jìn)行了研究,得到如下結(jié)果:通過(guò)三代測(cè)序,節(jié)桿菌HW08含有一個(gè)大小為5,063,552 bp的環(huán)狀染色體,G+C含量為62.65%。通過(guò)基因注釋,共獲得4816個(gè)基因,其中4742個(gè)為蛋白編碼基因。通過(guò)與COG數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì),發(fā)現(xiàn)節(jié)桿菌HW08的基因組中有將近半數(shù)的基因參與生物代謝。KEGG代謝通路數(shù)據(jù)庫(kù)顯示這些基因分布于13個(gè)氨基酸代謝通路、14個(gè)糖代謝通路和11個(gè)脂質(zhì)代謝通路。GO數(shù)據(jù)庫(kù)注釋結(jié)果顯示,節(jié)桿菌HW08的基因可分為三個(gè)區(qū)域,區(qū)域1生物學(xué)途徑注釋到5943個(gè)基因;區(qū)域2細(xì)胞學(xué)組件中注釋到1752個(gè)基因。基因組分析還表明該菌有多個(gè)基因參與滲透壓調(diào)節(jié)和氧化應(yīng)激的保護(hù),但在重金屬離子抗性方面僅注釋到了抗銅離子和砷酸鹽的相關(guān)基因。底物利用多樣性試驗(yàn)顯示該菌可以利用苯甲酸鈉、對(duì)氨基苯磺酸、4-氨基安替比林、L-脯氨酸、L-哌啶酸、1-甲基吡咯烷、N-甲基哌啶、敵敵畏和辛硫磷作為唯一氮源和碳源生長(zhǎng)?股乜剐栽囼(yàn)結(jié)果表明該菌對(duì)卡那霉素和鏈霉素具有抗性,但在基因組中并沒(méi)有注釋到已知的抗性基因。除此之外,在該基因組中還發(fā)現(xiàn)了一條編碼桿菌肽抗性蛋白BacA的基因,這在節(jié)桿菌中尚屬首次。通過(guò)脈沖場(chǎng)凝膠電泳檢測(cè)質(zhì)粒,確定了節(jié)桿菌HW08中不含有任何形式的質(zhì)粒。
【學(xué)位授予單位】:西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號(hào)】:S859.8
文章目錄
摘要
Abstract
文獻(xiàn)綜述
    第一章 節(jié)桿菌的研究進(jìn)展
        1.1 節(jié)桿菌生物學(xué)特征
        1.2 節(jié)桿菌生物降解的多樣性
            1.2.1 三嗪類農(nóng)藥
            1.2.2 有機(jī)磷類農(nóng)藥
            1.2.3 芳香族化合物
            1.2.4 生物堿類化合物
        1.3 節(jié)桿菌對(duì)環(huán)境適應(yīng)性的研究
            1.3.1 滲透壓調(diào)節(jié)
            1.3.2 氧化應(yīng)激的保護(hù)
            1.3.3 重金屬離子抗性
        1.4 節(jié)桿菌基因組學(xué)研究現(xiàn)狀
        1.5 小結(jié)
試驗(yàn)研究
    第二章 節(jié)桿菌HW08全基因組測(cè)序及分析
        2.1 材料
            2.1.1 菌種來(lái)源
            2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
            2.1.3 主要試劑
            2.1.4 培養(yǎng)基
        2.2 方法
            2.2.1 菌種復(fù)蘇及擴(kuò)大培養(yǎng)
            2.2.2 測(cè)序和拼接組裝
            2.2.3 基因組組分分析
            2.2.4 基因功能注釋
        2.3 結(jié)果
            2.3.1 基因組拼接組裝
            2.3.2 基因組概述
            2.3.3 基因組序列的注釋與分析
        2.4 討論
        2.5 小結(jié)
    第三章 節(jié)桿菌HW08的特性研究
        3.1 材料
            3.1.1 菌種來(lái)源
            2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
            3.1.3 主要試劑
            3.1.4 培養(yǎng)基和緩沖液
        3.2 方法
            3.2.1 節(jié)桿菌HW08底物利用多樣性試驗(yàn)
            3.2.2 節(jié)桿菌HW08抗生素抗性試驗(yàn)
            3.2.3 脈沖場(chǎng)凝膠電泳檢測(cè)節(jié)桿菌HW08質(zhì)粒
        3.3 結(jié)果
            3.3.1 節(jié)桿菌HW08底物利用多樣性
            3.3.2 節(jié)桿菌HW08抗生素抗性試驗(yàn)
            3.3.3 節(jié)桿菌HW08質(zhì)粒檢測(cè)
        3.4 討論
        3.5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前8條

1 張新建;張廣志;楊合同;;節(jié)桿菌環(huán)境適應(yīng)性的基因組學(xué)研究進(jìn)展[J];微生物學(xué)報(bào);2016年04期

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1 王妍;苦馬豆素降解菌HW 08的分離及其特性研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2011年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 翟阿官;節(jié)桿菌HW08降解苦馬豆素相關(guān)酶的篩選與乙醇脫氫酶的表達(dá)[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2015



本文編號(hào):2338658

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