【摘要】：為研究馬流產(chǎn)沙門菌新疆分離株鞭毛蛋白FliC(flagellin C)的免疫生物學(xué)特性及保護(hù)特性。本研究利用PCR技術(shù)擴(kuò)增獲得該菌的Fli C基因,并將其連接到原核表達(dá)載體p ET-28a(+)上,構(gòu)建重組表達(dá)質(zhì)粒,轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3)感受態(tài)細(xì)胞后,用IPTG誘導(dǎo)表達(dá)重組蛋白,SDS-PAGE和Western-blot檢測與分析表達(dá)蛋白,并將純化的重組蛋白免疫小鼠。結(jié)果顯示,成功誘導(dǎo)表達(dá)了52 ku的重組蛋白,該蛋白第2次免疫小鼠第14天時(shí)血清中的特異性Ig G抗體效價(jià)可達(dá)1∶72 900,且抗體亞型以Ig G1為主,免疫小鼠的攻擊保護(hù)率可達(dá)73%。結(jié)果表明,Fli C重組蛋白具有良好的免疫原性和免疫保護(hù)效果。為進(jìn)一步開展馬流產(chǎn)沙門菌亞單位疫苗的研究奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:To study the immunobiological and protective properties of flagellin FliC (flagellin C) of Salmonella equina isolated from Xinjiang. In this study, the Fli C gene was amplified by PCR and ligated to the prokaryotic expression vector p ET-28a (). The recombinant expression plasmid was constructed and transformed into E. coli BL21 (DE3) competent cells. The expressed protein was detected and analyzed by SDS-PAGE and Western-blot induced by IPTG. The purified recombinant protein was immunized with mice. The results showed that the recombinant protein of 52 ku was successfully induced. The specific IgG antibody titer of the second immunization mice reached 1:72 900 on the 14th day, and the antibody subtype was mainly Ig G 1, and the attack protection rate of the immunized mice could reach 73%. The results showed that Fli C recombinant protein had good immunogenicity and protective effect. It lays a foundation for further research on subunit vaccine of Salmonella equine.
【作者單位】： 新疆哈密市動物疫病預(yù)防控制中心;新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)學(xué)院;
【基金】：新疆維吾爾自治區(qū)重大科技專項(xiàng)項(xiàng)目(2017A01002-2) 國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31660707)
【分類號】：S852.61

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本文編號：2168217