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馬流產沙門菌鞭毛重組蛋白FliC的原核表達及對小鼠的免疫保護試驗

發(fā)布時間:2018-08-06 15:54
【摘要】:為研究馬流產沙門菌新疆分離株鞭毛蛋白FliC(flagellin C)的免疫生物學特性及保護特性。本研究利用PCR技術擴增獲得該菌的Fli C基因,并將其連接到原核表達載體p ET-28a(+)上,構建重組表達質粒,轉化大腸桿菌BL21(DE3)感受態(tài)細胞后,用IPTG誘導表達重組蛋白,SDS-PAGE和Western-blot檢測與分析表達蛋白,并將純化的重組蛋白免疫小鼠。結果顯示,成功誘導表達了52 ku的重組蛋白,該蛋白第2次免疫小鼠第14天時血清中的特異性Ig G抗體效價可達1∶72 900,且抗體亞型以Ig G1為主,免疫小鼠的攻擊保護率可達73%。結果表明,Fli C重組蛋白具有良好的免疫原性和免疫保護效果。為進一步開展馬流產沙門菌亞單位疫苗的研究奠定了基礎。
[Abstract]:To study the immunobiological and protective properties of flagellin FliC (flagellin C) of Salmonella equina isolated from Xinjiang. In this study, the Fli C gene was amplified by PCR and ligated to the prokaryotic expression vector p ET-28a (). The recombinant expression plasmid was constructed and transformed into E. coli BL21 (DE3) competent cells. The expressed protein was detected and analyzed by SDS-PAGE and Western-blot induced by IPTG. The purified recombinant protein was immunized with mice. The results showed that the recombinant protein of 52 ku was successfully induced. The specific IgG antibody titer of the second immunization mice reached 1:72 900 on the 14th day, and the antibody subtype was mainly Ig G 1, and the attack protection rate of the immunized mice could reach 73%. The results showed that Fli C recombinant protein had good immunogenicity and protective effect. It lays a foundation for further research on subunit vaccine of Salmonella equine.
【作者單位】: 新疆哈密市動物疫病預防控制中心;新疆農業(yè)大學動物醫(yī)學學院;
【基金】:新疆維吾爾自治區(qū)重大科技專項項目(2017A01002-2) 國家自然科學基金項目(31660707)
【分類號】:S852.61

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本文編號:2168217


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