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偽狂犬病病毒疫苗株SA738侵染BHK-21細(xì)胞誘導(dǎo)其凋亡及Caspase3表達(dá)情況分析

發(fā)布時(shí)間:2018-08-06 15:57
【摘要】:旨在深入了解豬偽狂犬病病毒疫苗株P(guān)RV SA738侵染BHK-21細(xì)胞后,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,細(xì)胞凋亡的時(shí)間及相關(guān)細(xì)胞凋亡因子表達(dá)情況。通過測定傳統(tǒng)疫苗毒株Bartha-K61株和實(shí)驗(yàn)室人工篩選的gI-/gE-/PRV SA738病毒株滴度,分別利用2株疫苗毒株侵染BHK-21,采用原位雙熒光染色法檢測細(xì)胞凋亡,用分光光度法測定細(xì)胞凋亡因子Caspase-3表達(dá)情況。結(jié)果表明,低劑量gI-/gE-/PRV SA738疫苗毒株和Bartha-K61疫苗毒株均延遲侵染細(xì)胞的凋亡。缺失疫苗毒株gI-/gE-/PRV SA738延遲侵染細(xì)胞的凋亡時(shí)間比Bartha-K61疫苗毒株時(shí)間長,但侵染細(xì)胞增殖速度下降。細(xì)胞凋亡后期最終細(xì)胞死亡,正常細(xì)胞細(xì)胞死亡后無凋亡小體。gI-/gE-/PRV SA738疫苗毒株和Bartha-K61疫苗毒株侵染細(xì)胞凋亡后期凋亡小體形成,并檢測到膜結(jié)構(gòu)。在病毒侵染早期細(xì)胞內(nèi)關(guān)鍵凋亡細(xì)胞因子Caspase3表現(xiàn)為上調(diào)。Caspase-3參與了病毒侵染過程中細(xì)胞凋亡的調(diào)控。
[Abstract]:The purpose of this study was to investigate the apoptosis of BHK-21 cells induced by porcine pseudorabies virus vaccine strain PRV SA738, the time of apoptosis and the expression of related apoptosis factors. The titers of the traditional vaccine strain Bartha-K61 and the gI-/gE-/PRV SA738 virus strain artificially screened in laboratory were determined. The two vaccine strains were used to infect BHK-21, and the apoptosis was detected by in situ double fluorescence staining. The expression of apoptotic factor Caspase-3 was measured by spectrophotometry. The results showed that both low dose gI-/gE-/PRV SA738 vaccine strains and Bartha-K61 vaccine strains delayed the apoptosis of infected cells. The time of delayed infection of gI-/gE-/PRV SA738 vaccine strain was longer than that of Bartha-K61 vaccine strain, but the rate of cell proliferation decreased. After the death of normal cells, there was no apoptotic body. The apoptotic corpuscles formed in the late stage of apoptosis and the membrane structure was detected. During the early stage of virus infection, the key apoptotic cytokines (Caspase3) were up-regulated. Caspase-3 was involved in the regulation of apoptosis.
【作者單位】: 山東省濱州畜牧獸醫(yī)研究院山東省獸醫(yī)生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;山東省濱州畜禽蜂膠疫苗研究開發(fā)推廣中心;山東綠都生物科技有限公司;
【基金】:山東省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(ZR2012CQ012) 山東省畜牧獸醫(yī)科技服務(wù)業(yè)沈志強(qiáng)創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目(魯發(fā)服務(wù)[2014]01041號)
【分類號】:S852.65

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3 吳e,

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