【摘要】：探討不同禽源大腸埃希菌中喹諾酮類藥物的耐藥情況及耐藥基因gyrA的分布和突變特征。采用K-B藥敏紙片法、gyrA基因的PCR擴(kuò)增,對(duì)9株大腸埃希菌進(jìn)行喹諾酮類藥物試驗(yàn),并將gyrA基因的PCR產(chǎn)物測(cè)序,對(duì)測(cè)序結(jié)果采用DNA MAN、DNA Star、MEGA6等軟件分析。藥敏試驗(yàn)結(jié)果表明,C1、C2、C3菌株對(duì)左氧沙星、氧氟沙星、環(huán)丙沙星、諾氟沙星敏感,D1、D2、D3、B1、B2和B3菌株對(duì)左氧沙星、氧氟沙星、環(huán)丙沙星、諾氟沙星均表現(xiàn)為耐藥和中介;gyrA基因的測(cè)序結(jié)果表明,除B1菌株有1處核苷酸突變位點(diǎn)和B2菌株有14處核苷酸突變位點(diǎn);B2菌株gyrA基因的氨基酸突變發(fā)生在87位Ile→Val替代、101位Leu→Met替代、102位Ala→Ser替代、129位Lys→Gln替代。9株禽源大腸埃希菌的同源性和進(jìn)化樹分析表明,不同禽源耐氟喹諾酮類藥物的大腸埃希菌菌株中B2菌株gyrA基因與其他9株菌株相比,同源性在90%左右,進(jìn)化樹不在一個(gè)分支上,研究中的B2菌株將為大腸埃希菌的氟喹諾酮類耐藥機(jī)制的研究提供候選菌株。
[Abstract]:The drug resistance of quinolones in Escherichia coli from different avian sources and the distribution and mutation characteristics of the drug resistance gene gyrA were investigated. The K-B drug sensitive paper method and the PCR amplification of gyrA gene were used to test 9 strains of Escherichia coli, and the PCR products of the gyrA gene were sequenced, and the sequencing results were soft, DNA MAN, DNA Star, MEGA6 and so on. The results of drug sensitivity test showed that C1, C2, C3 strains were sensitive to levofloxacin, ofloxacin, ciprofloxacin, norfloxacin, D1, D2, D3, B1, B2 and B3 were resistant to levofloxacin, ofloxacin, ciprofloxacin and norfloxacin, and gyrA based sequences showed that there were 1 nucleotide mutation sites and B2 strains except B1 strains. There are 14 nucleotide mutation sites, and the amino acid mutation of the B2 strain gyrA gene occurs in 87 Ile to Val substitution, 101 Leu to Met substitution, 102 Ala to Ser substitution, and 129 Lys to Gln substitutes for.9 strain of avian Escherichia coli. Compared with the other 9 strains, the homology is about 90%, and the evolutionary tree is not on one branch. The B2 strain in the study will provide a candidate for the study of the fluoroquinolone resistance mechanism of Escherichia coli.
【作者單位】： 湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所/農(nóng)業(yè)部畜禽細(xì)菌病防治制劑創(chuàng)制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/動(dòng)物胚胎工程及分子育種湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目(2016YFD0501305,2016YFD0500800) 公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)項(xiàng)目(201303044) 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)資金項(xiàng)目(CARS-42-G11) 湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院青年科學(xué)基金項(xiàng)目(2016NKYJJ16)
【分類號(hào)】：S852.61

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本文編號(hào)：2131450