【摘要】：通過探索JSRV Env真核表達質(zhì)粒誘導轉(zhuǎn)染小鼠NIH 3T3(小鼠成纖維細胞)后對血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)和表皮生長因子受體(EGFR)表達的影響,進一步探討其變化與綿羊肺腺瘤病(OPA)腫瘤發(fā)生的關(guān)聯(lián)性。首先體外培養(yǎng)NIH 3T3細胞,設立轉(zhuǎn)染pEGFP-C1-env、pEGFP-C1及未轉(zhuǎn)染細胞組。本研究采用實時熒光定量PCR方法檢測VEGF和EGFR mRNA水平上的表達;ELISA方法檢測兩細胞因子在不同處理的NIH 3T3細胞培養(yǎng)上清中蛋白的表達。結(jié)果顯示,相比pEGFP-C1和未轉(zhuǎn)染細胞組,轉(zhuǎn)染pEGFP-C1-env細胞組中VEGF和EGFR mRNA的表達量均顯著升高(P0.05);且在該處理組的細胞培養(yǎng)上清中檢測到VEGF和EGFR蛋白濃度呈明顯上升趨勢,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。轉(zhuǎn)染pEGFP-C1細胞組相比未轉(zhuǎn)染細胞組VEGF和EGFR mRNA和蛋白表達量均差異不明顯(P0.05)。結(jié)果表明,JSRV Env在誘導轉(zhuǎn)染小鼠NIH 3T3細胞轉(zhuǎn)化過程中,通過qPCR和ELISA的檢測結(jié)果均可得知VEGF和EGFR表達量均升高,由兩者的過表達變化推測VEGF和EGFR在OPA腫瘤發(fā)生過程中可能起關(guān)鍵作用,同時為OPA針對兩者進行的基因靶向治療方法提供理論基礎。
[Abstract]:To explore the effect of JSRV Env eukaryotic expression plasmid on the expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) and epidermal growth factor receptor (EGFR) in mouse NIH 3T3 (mouse fibroblasts). To further investigate the relationship between the changes and the tumorigenesis of sheep pulmonary adenomatosis (OPA). First, NIH 3T3 cells were cultured in vitro, then pEGFP-C1-envc1 transfected pEGFP-C1 and untransfected cells were established. In this study, the expression of VEGF and EGFR mRNA in NIH 3T3 cells was detected by real-time fluorescence quantitative PCR and the expression of two cytokines in the supernatant of NIH 3T3 cells was detected by Elisa. The results showed that the expression of VEGF and EGFR mRNA in pEGFP-C1-env cells was significantly higher than that in pEGFP-C1 and untransfected cells (P0.05), and the concentration of VEGF and EGFR protein in the culture supernatant of the treated group was significantly increased. The difference was statistically significant (P0.05). The expression of VEGF and EGFR mRNA and protein in pEGFP-C1 cells group was not significantly different from that in untransfected cells group (P0.05). The results showed that the expression of VEGF and EGFR increased by qPCR and Elisa during the induction of NIH 3T3 cell transformation by JSRV Env. The overexpression of VEGF and EGFR may play a key role in the development of OPA tumor and provide a theoretical basis for the gene targeting therapy of OPA.
【作者單位】： 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學獸醫(yī)學院;農(nóng)業(yè)部動物疾病臨床診療技術(shù)重點實驗室;
【分類號】：S852.65

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前7條

1 劉暢;李磊;于立新;么宏強;周建華;馬學恩;;綿羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白及其TM亞基通過激活Akt誘導NIH 3T3細胞轉(zhuǎn)化[J];中國預防獸醫(yī)學報;2014年08期

2 高曉來;;肺癌患者血清Survivin和VEGF的表達及其臨床意義[J];臨床肺科雜志;2012年01期

3 李付海;白樺;李夏南;吳梅娜;余榮;石安輝;尹麗;王潔;朱廣迎;;EGFR突變狀態(tài)對Ⅲ期非鱗非小細胞肺癌患者放化療近期療效和長期生存的預測價值[J];中國肺癌雜志;2011年09期

4 朱有才;杜開齊;尹滿香;張志豪;王細勇;;EGFR在非小細胞肺癌中的表達及臨床意義[J];腫瘤學雜志;2010年08期

5 陳晶晶;陳柯;王曉秋;;子宮內(nèi)膜癌組織中Id-1、VEGF-C和EGFR的表達及臨床意義[J];臨床與實驗病理學雜志;2010年02期

6 趙學維;孫光遠;李兵;徐志飛;何金;劉惠敏;;非小細胞肺癌組織中表皮生長因子受體和血管內(nèi)皮生長因子的表達及臨床意義[J];第二軍醫(yī)大學學報;2008年01期

7 胡雪君;宋娜;劉云鵬;馬艷菊;郝艷艷;康健;;EGFR、VEGF和COX-2在非小細胞肺癌中的表達和意義[J];實用腫瘤雜志;2007年03期

相關(guān)碩士學位論文 前1條

1 孫麗紅;JSRV-Env真核表達產(chǎn)物與體外細胞作用后對細胞信號通路中關(guān)鍵酶的影響[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學;2015年

【共引文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 黨勇;段釗;;CT聯(lián)合MRI子宮內(nèi)膜癌分期診斷與術(shù)后VEGF-C水平觀察[J];昆明醫(yī)科大學學報;2017年06期

2 駱爽;孫麗紅;于立新;么宏強;;JSRV-Env誘導轉(zhuǎn)染NIH 3T3細胞后對VEGF和EGFR因子表達的影響[J];中國獸醫(yī)學報;2017年05期

3 段國辰;郭濤;趙慶濤;;EGFR在肺腺癌原發(fā)灶與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶中的表達意義[J];河北醫(yī)藥;2016年23期

4 章雷;李妹;喬鵬崗;李功杰;;周圍型非小細胞肺癌CT特征與EGFR基因突變的關(guān)系研究[J];人民軍醫(yī);2016年09期

5 俞衛(wèi)衛(wèi);周錫建;周道安;潘德鍵;周仁貴;;EGFR-TKI聯(lián)合同步放療治療EGFR突變型轉(zhuǎn)移性非小細胞肺癌的療效及安全性評價[J];河北醫(yī)學;2016年08期

6 孫曉林;杜方原;劉淑英;;外源性綿羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白激活MAPK信號通路的分析[J];畜牧獸醫(yī)學報;2016年08期

7 梅齊;吳驍偉;李楊;嚴鵬;胡廣原;;肺癌患者胸腔積液中血管內(nèi)皮生長因子及CD40檢測的臨床意義[J];腫瘤研究與臨床;2016年07期

8 馬海民;程穎華;;吉非替尼治療EGFR基因突變非小細胞肺癌的療效及對生存情況的影響因素分析[J];中國現(xiàn)代醫(yī)藥雜志;2016年05期

9 羅衛(wèi)民;羅湘玉;郭家龍;林稱意;張軍;;miR-200b靶向VEGF抑制肺癌細胞侵襲[J];中南醫(yī)學科學雜志;2016年03期

10 徐成;楊華清;李明泉;;沙利度胺聯(lián)合奈達鉑治療非小細胞肺癌的臨床療效[J];中國腫瘤臨床與康復;2015年12期

相關(guān)碩士學位論文 前1條

1 駱爽;JSRV-Env重組質(zhì)粒對小鼠三種體外細胞的幾種細胞生長因子表達影響的研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學;2016年

【二級參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前5條

1 周艷喜;于立新;張月梅;敖威華;朱富余;么宏強;馬學恩;;綿羊肺腺瘤kras和其他相關(guān)基因突變的檢測[J];動物醫(yī)學進展;2013年02期

2 劉釗;周斌;趙堅;胡曄;朱昌生;張毅;;VEGF-C和VEGFR-3在非小細胞肺癌癌組織及癌旁組織中的表達及意義[J];臨床肺科雜志;2010年09期

3 尹光浩;劉偉;劉國津;李光虎;吳勇;;非小細胞肺癌的EGFR表達與EGFR基因突變的比較[J];中國實驗診斷學;2009年02期

4 薄愛華;蘆廣萍;閆愛春;雷杰;;EGFR和VEGF在乳腺癌中表達的臨床意義[J];中國腫瘤臨床;2007年23期

5 劉芳,張雅潔;VEGF-C及其受體Flt4在乳腺癌轉(zhuǎn)移中的作用[J];臨床與實驗病理學雜志;2003年03期

相關(guān)碩士學位論文 前1條

1 朱福余;綿羊肺腺瘤病毒受體hyal-2的原核表達及其多克隆抗體制備[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學;2014年

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 郭佳,姚相杰,鄭從義,方呈祥,屈三甫,李信墻,李衛(wèi)云;丙肝病毒全基因組克隆轉(zhuǎn)染細胞體系的初步研究[J];中國病毒學;2004年04期

2 賈帥爭,王全立;水動力轉(zhuǎn)染基因在小鼠體內(nèi)的長期高效表達[J];生物技術(shù)通訊;2005年03期

3 付強;李友瑞;徐亞娟;張藝平;沈韻;吳昌敬;;小分子干擾核糖核酸轉(zhuǎn)染小鼠成骨細胞的效率研究[J];廣東牙病防治;2009年09期

4 徐松柏;趙剛;許侃;候宜;于洪泉;崔陽;;血管內(nèi)皮生長因子基因在兔骨髓間充質(zhì)干細胞中的轉(zhuǎn)染和表達[J];吉林大學學報(醫(yī)學版);2007年03期

5 任麗偉;丁愛軍;徐貴江;李碧春;;提高基因轉(zhuǎn)染效率方法的研究[J];中國畜牧獸醫(yī);2010年05期

6 薛冠華;張紀蔚;張皓;張柏根;;內(nèi)皮型一氧化氮合酶基因在犬內(nèi)皮細胞的轉(zhuǎn)染和表達[J];上海交通大學學報(醫(yī)學版);2006年03期

7 張寶;霍霞;徐錫金;齊宗利;鄭謹;彭琳;;LipofectAMINE2000與Fugene6轉(zhuǎn)染細胞的效率比較[J];生物技術(shù)通訊;2007年04期

8 李水仙,賈文祥,趙連三,唐紅,劉麗,王松;磷酸鈣法轉(zhuǎn)染哺乳動物非貼壁細胞[J];山西大學學報(自然科學版);1998年02期

9 武力,何麗芳,蔣偉倫,邱申熊,聞玉梅;體內(nèi)與轉(zhuǎn)染細胞中乙型肝炎病毒株復制特性的相關(guān)性[J];中華傳染病雜志;2001年04期

10 何星;李華;邵雁;胡瑩;顧子春;陳力;馬菁晶;蘭志勇;;三種轉(zhuǎn)染試劑介導pGPU6/GFP/Neo真核表達載體轉(zhuǎn)染雞胚成纖維細胞的比較研究[J];浙江大學學報(醫(yī)學版);2013年06期

相關(guān)會議論文 前10條

1 王瓞;宣海星;景乃禾;林其誰;;影響SA陽離子脂質(zhì)體-DNA復合物轉(zhuǎn)染效率的因素[A];第七屆全國生物膜學術(shù)討論會論文摘要匯編[C];1999年

2 趙珍珍;金先慶;羅慶;劉偉;;Mdr1轉(zhuǎn)染鼠單個核細胞體外安全性研究[A];中國抗癌協(xié)會第七屆全國小兒腫瘤學術(shù)會議論文匯編[C];2007年

3 庹曉曄;柴家科;馮瑞;盛志勇;;hBD3轉(zhuǎn)染COS-7細胞中hBD3的誘導增強表達[A];第八屆全國燒傷外科學年會論文匯編[C];2007年

4 吳媛;孫紅柳;陳莉;楊琳;安威;;轉(zhuǎn)染肝刺激因子基因增強肝癌細胞抗凋亡作用研究[A];中國細胞生物學學會2005年學術(shù)大會、青年學術(shù)研討會論文摘要集[C];2005年

5 陳星;糜若然;伊鐵忠;瞿全新;熊冬生;許元富;楊純正;邵曉楓;范冬梅;;VEGF-C轉(zhuǎn)染在宮頸癌中的表達及侵襲轉(zhuǎn)移分子機制研究[A];第四屆中國腫瘤學術(shù)大會暨第五屆海峽兩岸腫瘤學術(shù)會議論文集[C];2006年

6 解慧琪;楊志明;鄧力;李秀群;宋超;羅靜聰;;不同方法轉(zhuǎn)染綠色熒光蛋白真核表達載體pEGFP-N1轉(zhuǎn)染效率的比較研究[A];2005'中國修復重建外科論壇論文匯編[C];2005年

7 趙珍珍;金先慶;宿玉璽;桂琳玲;郭振華;趙利華;;Ad-EGFP-MDR1體內(nèi)生物安全的實驗研究[A];中國西南地區(qū)第九屆小兒科學術(shù)會議論文匯編[C];2008年

8 劉珊林;;Racl轉(zhuǎn)染7721人肝癌細胞與活性氧的關(guān)系[A];第五屆全國自由基生物學與自由基醫(yī)學學術(shù)討論會論文摘要匯編[C];2000年

9 楊平;吳志宏;王愛麗;;重組人內(nèi)皮型一氧化氮合酶基因在增生性瘢痕成纖維細胞中的表達及意義[A];第六屆全國燒傷救治專題研討會論文匯編[C];2009年

10 劉建香;蘇旭;;pEgr-p16輻射誘導表達特性及抗腫瘤作用的實驗研究[A];中國毒理學會放射毒理專業(yè)委員會第七次、中國毒理學會免疫毒理專業(yè)委員會第五次、中國環(huán)境誘變劑學會致突專業(yè)委員會第二次、中國環(huán)境誘變劑學會致畸專業(yè)委員會第二次、中國環(huán)境誘變劑學會致癌專業(yè)委員會第二次全國學術(shù)會議論文匯編[C];2008年

相關(guān)博士學位論文 前10條

1 瞿瑋;多肽類靶向基因載體的制備及其轉(zhuǎn)染性能研究[D];武漢大學;2012年

2 黃婉榮;靶向si-EGFR對人晶狀體上皮細胞增殖的影響[D];天津醫(yī)科大學;2011年

3 萬亞峰;肝細胞癌AFPmRNA轉(zhuǎn)染CD40配體活化的B細胞誘導抗腫瘤免疫的實驗研究[D];華中科技大學;2010年

4 石敏;重組腺相關(guān)病毒載體介導的抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié)作用研究[D];第一軍醫(yī)大學;2007年

5 吳砂;CC族趨化因子21的克隆、表達及其誘導抗瘤效應研究[D];華中科技大學;2007年

6 溫劍平;PSGL-1表達細胞株的建立及其形態(tài)和生物學特性的研究[D];吉林大學;2004年

7 龔道軍;CD97-siRNA轉(zhuǎn)染對胃癌細胞株MKN45生物學特性的影響及其分子機制的初步研究[D];浙江大學;2009年

8 丁浩;XPD通過P53抑制乙型肝炎病毒復制、HBx表達和肝癌增殖[D];南昌大學;2012年

9 李永剛;SLC聯(lián)合IL-2轉(zhuǎn)染DC對膀胱癌的研究[D];蘭州大學;2008年

10 王洪斌;PinX1抑制胃癌細胞增殖、增強其對5-FU敏感性及機制研究[D];第三軍醫(yī)大學;2009年

相關(guān)碩士學位論文 前10條

1 王爽;結(jié)核桿菌兩個毒力因子CFP-10和ESAT-6協(xié)同對宿主細胞的影響及其機制研究[D];石河子大學;2015年

2 馮培;分枝狀PEI在不同細胞系轉(zhuǎn)染效率和細胞毒性間的關(guān)系[D];新鄉(xiāng)醫(yī)學院;2015年

3 李明;Toll樣受體4在腦膠質(zhì)瘤細胞中的表達及其作用研究[D];河北醫(yī)科大學;2015年

4 李慶軍;磷脂爬行酶1抑制HBV復制的分子機制研究[D];河南中醫(yī)學院;2015年

5 國建;miR-103a-1對hERG編碼的I_(kr)特性的作用研究[D];寧波大學;2015年

6 魏海田;轉(zhuǎn)運siRNA的雙靶向長循環(huán)多功能信封式納米基因載體的研究[D];青島大學;2015年

7 蔡偉良;腺病毒介導rhBMP-2轉(zhuǎn)染兔BMSCs聯(lián)合同種異體DBM構(gòu)建復合材料的生物安全性研究[D];桂林醫(yī)學院;2015年

8 游舒穎;AP4-siRNA轉(zhuǎn)染對人肺腺癌A549細胞凋亡的影響并肺癌病例臨床分析[D];大連醫(yī)科大學;2015年

9 杜方原;pcDNA4/myc-His/exJSRV-env轉(zhuǎn)染NIH3T3細胞的研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學;2016年

10 莊斯慧;基于光激化學發(fā)光免疫分析技術(shù)的酪氨酸激酶通路蛋白蛋白相互作用檢測試劑的研制[D];南方醫(yī)科大學;2016年

，

本文編號：2120745