本文選題：旋毛蟲 + T基因��； 參考：《中國獸醫(yī)學(xué)報(bào)》2017年04期

【摘要】：旋毛蟲抗原基因T668是本實(shí)驗(yàn)室發(fā)現(xiàn)的1條高反應(yīng)原性的特異性抗原基因,該基因編碼旋毛蟲絲氨酸蛋白酶。本試驗(yàn)利用重疊PCR的方法對旋毛蟲抗原基因T668成功實(shí)現(xiàn)酶活性中心重要位點(diǎn)定點(diǎn)突變改造,將酶活性中心的結(jié)合位點(diǎn)259位親水性絲氨酸和催化三聯(lián)體中240位的絲氨酸分別突變?yōu)槭杷员彼?并構(gòu)建、純化了可溶性表達(dá)的雙位點(diǎn)突變的重組蛋白,后經(jīng)Western blot分析表明所表達(dá)的重組蛋白能夠與旋毛蟲感染26d陽性血清發(fā)生特異性反應(yīng),具有良好的反應(yīng)原性。本試驗(yàn)為后續(xù)開展對該絲氨酸蛋白酶的研究及應(yīng)用奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。
[Abstract]:Trichinella spiralis antigen gene T668 is a highly reactive specific antigen gene which encodes serine protease of Trichinella spiralis. In this experiment, the gene T668 of Trichinella spiralis antigen was successfully transformed into a site-directed mutation at an important site of the enzyme active center by overlapping PCR. The binding site 259 of the enzyme active center and the 240 position serine of the catalytic triad were mutated to hydrophobic alanine, respectively, and the soluble recombinant protein with double site mutation was constructed and purified. Western blot analysis showed that the expressed recombinant protein could react specifically with the positive serum of Trichinella spiralis for 26 days. This experiment laid a solid foundation for the further research and application of the serine protease.
【作者單位】： 吉林大學(xué)人獸共患病研究所;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31520103916)
【分類號】：S852.7

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本文編號：2101457