本文選題：豬源ETEC + ESBLs��； 參考：《江西農(nóng)業(yè)大學(xué)》2016年碩士論文

【摘要】：近年來,產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(Extended Spectrum Beta-Lactamases,ESBLs)在豬源大腸桿菌中廣泛流行,賦予細(xì)菌多重耐藥性,給耐藥性大腸桿菌防控工作帶來巨大挑戰(zhàn)。產(chǎn)腸毒素大腸桿菌(ETEC)是養(yǎng)豬業(yè)最常見的致病性大腸桿菌之一。江西是我國養(yǎng)豬大省,了解ESBLs在江西豬源ETEC的流行及其介導(dǎo)的耐藥具有重大意義。本研究以從江西規(guī)模化養(yǎng)豬場腹瀉仔豬直腸拭子中分離的146株大腸桿菌為受試菌。首先采用PCR和紙片法對(duì)ETEC和產(chǎn)ESBLs ETEC進(jìn)行鑒定,并進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。結(jié)果:1.ETEC檢出率為65.07%(95/146),產(chǎn)ESBLs ETEC檢出率為20.55%(30/146);2.ETEC對(duì)林可霉素、四環(huán)素、甲氧芐啶、頭孢氨芐和阿莫西林耐藥率均超過90%,分別為100.00%、94.74%、94.74%、91.58%和90.53%。對(duì)亞胺培南、頭孢西丁、頭孢他啶、頭孢吡肟和氨曲南敏感;3.產(chǎn)ESBLs ETEC對(duì)β-內(nèi)酰胺類抗生素的耐藥率整體遠(yuǎn)高于非產(chǎn)ESBLs ETEC,非β-內(nèi)酰胺類抗生素耐藥情況相近。其次運(yùn)用PCR方法對(duì)產(chǎn)ESBLs ETEC進(jìn)行ESBLs分型、質(zhì)粒分型和細(xì)菌進(jìn)化分群研究。結(jié)果:1.TEM、CTX-M、SHV和OXA型ESBLs均有檢出,檢出率分別為70.00%、63.33%、16.67%和13.33%;2.共檢出FIB、I1、HI2、FIA、Y、FIC、FrepB和N8種不同類型質(zhì)粒復(fù)制子。產(chǎn)ESBLs ETEC以FrepB、FIB和I1型質(zhì)粒為主,分別占66.67%、60.00%和46.67%。非產(chǎn)ESBLs ETEC除N和I1型質(zhì)粒復(fù)制子檢出率較低,為13.33%外,其余質(zhì)粒復(fù)制子檢出率在33.33%~53.33%之間;3.細(xì)菌進(jìn)化分群研究發(fā)現(xiàn),產(chǎn)ESBLs ETEC多為A群ETEC,占46.67%(14/30)。非產(chǎn)ESBLs ETEC各進(jìn)化群所占比例相仿,A群占16.67%。最后,將ESBLs陽性質(zhì)粒轉(zhuǎn)至Top10感受態(tài)細(xì)胞,對(duì)轉(zhuǎn)化子進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。結(jié)果:共計(jì)獲得19株轉(zhuǎn)化子,這些轉(zhuǎn)化子具有原菌株全部或部分耐藥性。本研究夯實(shí)了我國豬源產(chǎn)ESBLs ETEC研究基礎(chǔ),豐富了江西產(chǎn)ESBLs ETEC研究數(shù)據(jù),為進(jìn)一步研究產(chǎn)ESBLs ETEC耐藥機(jī)制和耐藥修復(fù)奠定了理論基礎(chǔ)。
[Abstract]:In recent years, extended Spectrum Beta-Lactamases ESBLs (ESBLs) have been widely used in porcine Escherichia coli, which endows the bacteria with multiple drug resistance and brings great challenge to the prevention and control of drug-resistant Escherichia coli. Enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC) is one of the most common pathogenic Escherichia coli in pig industry. Jiangxi is a big pig raising province in China. It is of great significance to understand the prevalence of ESBLs in Jiangxi porcine ETEC and its mediated drug resistance. In this study, 146 strains of Escherichia coli isolated from the rectal swabs of piglets in a large scale pig farm in Jiangxi Province were selected as the tested bacteria. First, ETEC and ESBLs-producing ETEC were identified by PCR and disk method, and drug sensitivity test was carried out. Results the detectable rate of ETEC was 65.07% (95 / 146). The detection rate of ETEC in ESBLs was 20.55% (30 / 146). 2. The resistance rates of ETEC to lincomycin, tetracycline, trimethoprim, cefalexin and amoxicillin exceeded 90% (100.0094.7494.7474747.74 91.58% and 90.53%, respectively). It is sensitive to imipenem, cefxitin, ceftazidime, cefepime and aztreonam. The resistance rate of ESBLs-producing ETEC to 尾 -lactam antibiotics was much higher than that of non-ESBLs-producing ETEC, and the resistance of non-尾 -lactam antibiotics was similar. Secondly, ESBLs typing, plasmid typing and bacterial evolution were studied by PCR. Results 1. Both CTX-MN SHV and OXA ESBLs were detected, and the detectable rates were 70. 00% and 63. 33% and 13. 33%, respectively. A total of 8 different types of plasmids replicators were identified. The majority of ESBLs-producing ETEC were FrepBFIB and I1 plasmids, accounting for 66.67% and 46.67%, respectively. The detectable rate of non-ESBLs-producing ETEC plasmids was lower than that of N and I1 type plasmids (13.33%), and the detectable rate of other plasmids replicas was between 33.33% and 53.33%. The ESBLs-producing ETEC was mainly group A ETEC, accounting for 46.67% (14 / 30). The percentage of ESBLs-free ETEC was similar to that of ESBLs-A group (16.67%). Finally, the ESBLs positive plasmid was transferred to Top10 competent cells for drug sensitivity test. Results: a total of 19 transformants were obtained and the transformants were resistant to all or part of the original strain. This study consolidated the research foundation of ESBLs-producing ETEC in China, enriched the data of ESBLs ETEC from Jiangxi Province, and laid a theoretical foundation for further study on the mechanism of ESBLs-producing ETEC resistance and drug resistance repair.
【學(xué)位授予單位】：江西農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S852.61

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本文編號(hào)：2086681