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一種更靈敏的特異性檢測(cè)H9亞型禽流感抗體的間接ELISA方法的建立

發(fā)布時(shí)間:2018-06-20 16:38

  本文選題:H亞型 + 禽流感病毒 ; 參考:《生物工程學(xué)報(bào)》2017年08期


【摘要】:H9亞型禽流感在全球范圍內(nèi)廣泛流行,控制其傳播需監(jiān)測(cè)H9亞型禽流感病毒的感染情況及疫苗的免疫效果。為了建立便于檢測(cè)且靈敏特異的H9亞型禽流感抗體間接ELISA方法,本實(shí)驗(yàn)利用不同亞型之間變異較大的H9亞型禽流感病毒HA蛋白的頭部球狀區(qū)作為包被抗原,確定了最佳復(fù)合封閉液和抗體稀釋液,提高了其特異性。結(jié)果顯示建立的ELISA方法靈敏度高于血凝抑制試驗(yàn)(HI),且與H3N2、H5N2、H7N9亞型流感病毒及新城疫病毒(NDV)、雞傳染性支氣管炎病毒(IBV)、雞傳染性法氏囊病毒(IBDV)和產(chǎn)蛋下降綜合征病毒(EDSV)的陽(yáng)性血清均無(wú)交叉反應(yīng)。另外,利用該方法及HI試驗(yàn)對(duì)200份臨床雞血清樣本進(jìn)行檢測(cè),兩種檢測(cè)方法的符合率達(dá)97%,且存在較高的相關(guān)性(R2=0.981 1)。
[Abstract]:H9 subtype avian influenza is widespread in the world. It is necessary to monitor the infection of H9 subtype avian influenza virus and the immune effect of the vaccine to control the spread of H9 subtype avian influenza virus. In order to establish a sensitive and specific indirect Elisa method for detection of H9 subtype avian influenza antibody, the head spherical region of HA protein of H9 subtype avian influenza virus with great variation among different subtypes was used as the coating antigen. The best compound sealing solution and antibody diluent were determined, and the specificity was improved. The results showed that the sensitivity of the established Elisa was higher than that of the hemagglutination inhibition test (HI), and was associated with H3N2H2H2H7N9 influenza virus and Newcastle disease virus (NDV), chicken infectious bronchitis virus (IBV), chicken infectious bursal virus (IBDVV) and egg drop syndrome virus (EDSVV). No cross reaction was found in all the positive sera. In addition, 200 clinical chicken serum samples were detected by this method and HI test. The coincidence rate of the two methods was 97, and there was a high correlation between the two methods.
【作者單位】: 中國(guó)科學(xué)院微生物研究所中國(guó)科學(xué)院病原微生物與免疫學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;中國(guó)科學(xué)院大學(xué);中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所;
【基金】:國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目(Nos.2016YFD0500800,2016YFC1200803)資助~~
【分類(lèi)號(hào)】:S852.4

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本文編號(hào):2044927

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